夏娟
- 作品数：5 被引量：10H指数：2
- 供职机构：四川农业大学动物医学院更多>>
- 发文基金：四川省学术和技术带头人培养资金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 犬前松弛素原基因的克隆与生物信息学分析被引量：1
- 2016年
- [目的]本试验通过对犬前松弛素原基因的分析推导获得犬松弛素基因序列,为犬松弛素多克隆抗体的制备及临床应用提供理论基础。[方法]以北京犬和吉娃娃新生胎盘、贵宾犬卵巢为材料,分别提取总RNA,经RT-PCR扩增,获得犬前松弛素原基因,应用生物信息学方法初步分析犬前松弛素原基因的结构及功能。[结果]完整克隆了从所获样品中扩增到的预期大小目的片段,包含一个534 bp的开放阅读框,编码177个氨基酸。扩增片段序列分析结果显示,与NCBI核酸数据库检索的犬前松弛素原的c DNA序列同源性为99.6%,均有3个核苷酸位点发生改变,从而引起相应氨基酸改变,但并未引起蛋白结构的变化。进化树分析结果显示,所获3条目的片段同为一支,与猫前松弛素原基因的进化距离最近。生物信息分析显示,3条序列等电点、带电荷数、最高(最低)氨基酸、消光系数、半衰期、不稳定系数均一致,相对分子质量、不稳定系数、脂肪系数、总平均疏水指数有细微差异;跨膜区、信号肽、糖基化位点分析结果一致;二级结构组成一致,包含α-螺旋、延伸链、无规则卷曲,比例存在细微差异。[结论]成功克隆了犬前松弛素原基因,可以生物信息学分析为基础进行犬松弛素多克隆抗体的制备。
- 任志华夏娟刘欢欢余树民沈留红曹随忠左之才邓俊良马晓平
- 关键词：松弛素生物信息学分析
- 仔猪睾丸支持细胞的体外生物学特性研究被引量：7
- 2015年
- 为研究仔猪睾丸支持细胞生物学特性,以3~5周龄仔猪睾丸为材料,优化消化和差异贴壁方法,分离纯化支持细胞,研究其体外培养特性包括增殖活力、标志分子和细胞因子的表达。结果显示,先以0.25%胶原酶IV和0.1%透明质酸酶消化60 min,再以0.25%胰蛋白酶和0.1%DNase I消化20 min,有利于获得支持细胞;支持细胞接种后贴壁时间主要集中在3~5 h;纯化后细胞胞体宽大,呈梭形或不规则形;GATA4染色呈阳性,碱性磷酸酶染色呈阴性;RT-PCR结果表明,细胞表达GATA4、SOX9和INHB,不表达CYP17、3β-HSD和α-SMA;ELISA结果表明,细胞表达GDNF、LIF、CSF-1、EGF和FGF2,符合支持细胞的基本特征。
- 刘欢欢余树民夏娟孙成亮沈留红曹随忠左之才马晓平
- 关键词：支持细胞体外培养细胞因子
- 哺乳动物精原干细胞体外分离培养研究进展被引量：2
- 2014年
- 精原干细胞(spermatogonial stem cells,SSCs)作为成体干细胞的一种,具有高度自我更新和分化潜能。近几年研究发现,SSCs的体外培养是表观遗传基础研究、精子发生机制深入探索以及治疗雄性不育的基础条件。本文根据国内外SSCs相关研究,对哺乳动物SSCs的生物学特性、体外分离培养和鉴定等作一综述,以期为哺乳动物SSCs和其他干细胞的长期体外培养以及建系提供一定的借鉴。
- 刘丹夏娟刘欢欢余树民
- 关键词：精原干细胞生物学特性体外培养
- 干细胞标志分子在猪脐带组织中的表达
- 2014年
- 【目的】研究干细胞标志分子,如干细胞"干性"调控关键基因及胚胎阶段特异性抗原(Stage-specific embryonic antigen,SSEA)在猪脐带组织中的表达状况,为猪脐带来源细胞的利用提供参考。【方法】以猪脐带为研究材料,利用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)和免疫组化方法,分析干细胞"干性"调控关键基因Oct4、Nanog、Sox2、Rex1以及SSEA-1、SSEA-3和SSEA-4在猪脐带组织中的表达。【结果】RT-PCR分析显示,干细胞"干性"调控关键基因Oct4、Nanog、Sox2、Rex1在所有猪脐带样品中阳性转录,但Nanog mRNA的相对表达量显著低于Oct4mRNA、Sox2mRNA和Rex1mRNA,而后三者之间无显著差异;免疫组化分析显示,Oct4、Nanog、Sox2、SSEA-1、SSEA-3和SSEA-4在猪脐带组织中呈阳性染色,表达这些蛋白抗原的阳性细胞主要分布于脐带华通氏胶,且多集中于血管附近。【结论】从基因转录和蛋白水平证实猪脐带组织表达干细胞标志分子,SSEAs表达谱与猪胚胎生殖细胞相符,提示脐带组织中含有早期未分化的多潜能细胞。
- 余树民凌占业刘丹刘欢欢夏娟沈留红曹随忠左之才邓俊良任志华马晓平王娅胡延春
- 关键词：脐带干细胞
