姚建强
- 作品数：11 被引量：7H指数：2
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- 蚯蚓新型脱氧核糖核酸酶的相对分子质量测定被引量：1
- 2007年
- 目的测定蚯蚓组织中一种新型脱氧核糖核酸酶(EWD3)的相对分子质量。方法采用凝胶过滤层析法、十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰氨凝胶电泳法(SDS-PAGE)和基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱法(MALDI-TOF-MS)3种方法测定一种新型蚯蚓脱氧核糖核酸酶(EWD3)的相对分子质量。结果凝胶过滤层析法、SDS-PAGE法和质谱法测定其相对分子质量分别为55080、58270和63460。结论凝胶过滤层析法和SDS-PAGE法可以常规粗略测定蛋白的相对分子质量,质谱法可以比较准确测定蛋白的相对分子质量,EWD3为单亚基蛋白,其相对分子质量约在55000￣65000之间。
- 罗佳姚建强王晓媛李方杨利军王建华牛勃
- 关键词：地龙分子量
- 一期前后路联合与单纯前路手术治疗腰骶段结核临床疗效对比
- 目的： 通过对临床资料的研究分析，从手术时间，术中失血量，住院天数，腰骶椎受累区矢状位Cobb角的矫正及丢失，VAS评分,下腰痛JOA评分，ASIA脊髓损伤分级及改善，植骨融合时间等方面，对比一期前后路联合病灶清除内固...
- 姚建强
- 关键词：腰骶段结核临床疗效
- 文献传递
- 三种方法测定蚯蚓脱氧核糖核酸酶(EWD_2)的分子量
- 2007年
- 目的用不同方法测定蚯蚓组织中一种新型脱氧核糖核酸酶分子量。方法采用凝胶过滤层析法、SDS-PAGE法和基质辅助激光解吸附电离飞行时间质谱法(MALDI-TOF)三种方法测定一种新型蚯蚓脱氧核糖核酸酶(EWD2)的分子量。结果凝胶过滤层析法、SDS-PAGE法和质谱法测定其分子量分别为62.16kD、62.08kD和69.075kD。结论EWD2为单亚基脱氧核糖核酸酶,其分子量在60-70kD。
- 姚建强王晓媛罗佳李方张建林杨利军牛勃
- 关键词：色谱法蚯蚓脱氧核糖核酸酶分子量
- 蚯蚓体内一组脱氧核糖核酸酶的酶学性质研究被引量：2
- 2008年
- 目的:研究一组新型蚯蚓脱氧核糖核酸酶(earthworm desoxyribonucleases,EWDs)的主要生化性质。方法:采用SDS-PAGE、MALDI-TOF、紫外分光光度方法。结果:确定了EWD1,EWD2、EWD3(总称为:EWDs)的分子量分别为157.2kDa,69.1kDa和63.5kDa。37℃,pH4.6以小牛胸腺DNA为底物时,EWDs的Km值分别为1.58mg/ml,3.95mg/ml,1.52mg/ml;Vmax分别为5.36mg/(ml·min),2.87mg/(ml·min),4.89mg/(ml·min)。EWDs在55℃保温10min,酶活性完全丧失,在40℃以下酶活性都比较稳定。这3种脱氧核糖核酸酶最适pH值分别是5.2,4.4,4.8,酸性条件下较稳定。Mn2+,Ca2+是蚯蚓组织脱氧核糖核酸酶EWD1,EWD2,EWD3的抑制剂,Mg2+对EWD3有较明显的抑制作用。结论:蚯蚓组织中发现的脱氧核糖核酸酶EWDs具有独特的酶学特征,不同于已经发现的DNaseⅠ和DNaseⅡ,是种新型的脱氧核糖核酸酶,但其作用机理和分类有待于进一步的研究和归类。
- 刘志贞樊慧杰康慧芳姚建强杨利军牛勃
- 关键词：分子量酶学性质
- 一种新型蚯蚓脱氧核糖核酸酶酶学性质的研究被引量：2
- 2008年
- 目的研究蚯蚓组织中1种新型脱氧核糖核酸酶(EWD1)的主要酶学性质。方法用SDS-PAGE凝胶电泳、质谱分析、毛细管等点聚焦电泳法和酶活性测定等方法。结果EWD1的相对分子质量约为157000。Mn2+、Ca2+是该酶的抑制剂,Mg2+对酶的活性基本上没有影响。该酶的最适温度为37℃,最适pH值为5.2,等电点为6.12。以小牛胸腺DNA为底物,测得Km为1.58 mg/mL,Vmax为5.36 mg/(mL.min)。结论蚯蚓组织中发现的此种脱氧核糖核酸酶EWD1具有特殊的酶学性质,明显区别于已知的脱氧核糖核酸酶类。
- 王晓媛姚建强康慧芳樊慧杰杨利军牛勃
- 关键词：蚯蚓脱氧核糖核酸酶酶学性质
- 地龙脱氧核糖核酸酶的部分性质研究及作用初探被引量：1
- 2008年
- 目的研究地龙体内两种新型脱氧核糖核酸酶(LDs)的部分生化性质,并对其作用进行初步探索。方法采用Sephacryl-200柱层析、毛细管等电聚焦电泳法、琼脂糖凝胶电泳等方法。结果初步得出LD1、LD2分子量为126、62kDa;确定了等电点分别为6.12、6.05。LD1、LD2对细菌质粒DNA、λDNA均有分解作用。结论地龙中的LDs是一种新型的脱氧核糖核酸酶。明确LDs的分子量、等电点有助于优化LDs的提取工艺以及LDs的进一步研究。对细菌质粒DNA、λDNA的降解提示LDs有可能对抗细菌的耐药性。
- 樊慧杰康慧芳姚建强王晓媛杨利军牛勃
- 关键词：地龙脱氧核糖核酸酶分子量等电点
- 蚯蚓组织脱氧核糖核酸酶EWD3的生化性质被引量：1
- 2008年
- 目的研究赤子爱胜蚓组织中1种脱氧核糖核酸酶（EWD3）的主要生化性质。方法采用Lowry法测定酶的蛋白含量，SDS-PAGE和MALDI-TOF方法测定相对分子质量，毛细管等点聚焦电泳法测定等电点，并测定EWD3酶的酸、碱稳定性、温度稳定性、激动剂和抑制剂对酶活性的影响及酶促反应米氏常数Km值。结果EWD3酶的蛋白含量为2．1mg／ml，相对分子质量为63460，等电点为6．20，Km值为1．52mg／ml，最适pH值为4．4～5．2，不耐高温。Mg^2＋、ca^2＋、Mn^2＋、10和20mmol／LEDTA对EWD3酶活性有抑制作用。这些参数与已发现的各种DNases相比有明显差异。结论蚯蚓组织中已发现的脱氧核糖核酸酶EWD3具有特殊的酶学特征。
- 康慧芳樊慧杰王晓媛姚建强杨利军牛勃
- 关键词：赤子爱胜蚓脱氧核糖核酸酶生化性质
- 一种新型蚯蚓脱氧核糖核酸酶相对分子质量的测定被引量：1
- 2007年
- 目的测定从蚯蚓组织中提取纯化的一种新型脱氧核糖核酸酶的相对分子质量。方法采用凝胶过滤层析法、十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)法和基质辅助激光解吸附电离飞行时间质谱法三种方法测定一种新型蚯蚓脱氧核糖核酸酶(EWD1)的相对分子质量。结果凝胶过滤层析法、SDS-PAGE法和质谱法测定其相对分子质量分别为126440、136320和157190。结论EWD1由两个亚基组成,其相对分子质量最终确定为157190。
- 姚建强张建林王晓媛李方樊慧杰杨利军牛勃
- 关键词：分子质量
- 赤子爱胜蚓脱氧核糖核酸酶酶动力学研究被引量：1
- 2007年
- 目的对赤子爱胜蚓中一组新型脱氧核糖核酸酶(EWDs)进行酶动力学研究。方法运用单相酶扩散法(SRED)、紫外分光光度法和林-贝氏(Lineweaver-Burk)作图法。结果EWDs的最适温度均为37℃。EWD1的最适pH为5.2,Km为1.58mg/ml,Vmax为5.36mg·ml-1·min-1;EWD2的最适pH为4.4,Km值是3.95mg/ml,Vmax值为2.87mg·ml-1·min-1;EWD3的最适pH为4.8,Km值是1.52mg/ml,Vmax值为4.89mg·ml-1·min-1。Mn2+和Ca2+是EWDs的抑制剂,Mg2+仅抑制EWD3的活性。结论蚯蚓组织中发现的此组脱氧核糖核酸酶具有特殊的酶学性质,区别于已知的脱氧核糖核酸酶类。
- 王晓媛罗佳张建林姚建强于保锋杨利军牛勃
- 蚯蚓脱氧核糖核酸酶纯化及酶学性质(英文)被引量：2
- 2008年
- 目的:从蚯蚓组织中纯化得到一种脱氧核糖核酸酶(取名为蚯蚓脱氧核糖核酸酶,简称EDNase)并研究其酶学性质。方法:采用丙酮沉淀、离子交换层析、高效液相层析、SDS-PAGE电泳,毛细管等点聚焦电泳和基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱等方法。结果:经证实这种纯化方案的纯化倍数是137,酶得率为45.6%。EDNase的相对分子质量约为63000。Mg2+,Mn2+和Ca2+对酶活性有较强的抑制作用,而Na+则轻微的提高酶的活性。在pH4.4～5.2的范围内EDNase酶活性稳定,其最适pH值为4.8。该酶的最适温度为37℃,在40℃范围内酶具有较高的稳定性。EDNase的等电点为6.20。在以小牛胸腺DNA为底物的条件下,酶的Km为1.52g/L,Vmax为4.89mg/(mL·min)。该酶可有效降解超螺旋质粒DNA,线状λ-噬菌体DNA和细菌染色体DNA,对RNA未见任何降解作用。结论:这种酶具有独特的酶学性质,不同于以往所知的脱氧核糖核酸酶。
- 张建林刘志贞王晓媛姚建强罗佳王建华杨利军杨琦牛勃
