牛勃
- 作品数：296 被引量：756H指数：12
- 供职机构：首都儿科研究所更多>>
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- 相关领域：医药卫生生物学化学工程轻工技术与工程更多>>
- 5-氟尿嘧啶对神经管畸形胎鼠脑组织基因表达的影响
- 2020年
- 目的利用5-氟尿嘧啶(5-fluorouracil,5-FU)诱导C57BL/6J小鼠神经管畸形(neural tube defects,NTDs),观察5-FU对NTDs胎鼠脑组织基因表达的影响。方法采用无特定病原体(specific pathogen free,SPF)级C57BL/6J小鼠,孕鼠随机分为实验组和对照组。在孕7.5 d时,实验组孕鼠腹腔注射12.5 mg/kg的5-FU(叶酸相关代谢通路中关键酶胸苷酸合成酶抑制剂);对照组孕鼠腹腔注射等体积的生理盐水。孕13.5 d时通过体视显微镜及HE染色观察胎鼠畸形及神经管发育情况。在此基础上利用表达谱芯片分析NTDs胎鼠脑组织中基因表达的变化,并利用实时荧光定量PCR进行验证。统计学方法采用t检验。结果实验组小鼠NTDs的发生率为42.3%(22/52),主要为露脑畸形;对照组无一例NTDs。HE染色可见NTDs胎鼠的端脑和后脑结构紊乱。表达谱芯片筛选出差异表达基因137个,其中表达上调的基因40个,表达下调的基因97个,这些基因主要参与了多器官发育、细胞增殖及分化等生物过程以及与脑部发育相关的重要通路。选择表达差异明显且与胚胎神经发育相关的基因Avp、Hes3和Wnt1进行实时荧光定量PCR验证,结果发现所验证的基因表达情况与表达谱芯片的结果一致。结论5-FU可能通过影响胚胎神经发育过程中与神经发育相关基因Avp、Hes3及Wnt1等的表达,进而导致NTDs的发生。
- 王秀伟官臻朱智强牛勃王建华
- 关键词：神经管畸形胚胎5-氟尿嘧啶基因芯片
- 利用噬菌体表面展示技术制备TNF-α单链抗体的研究
- TNF-α抗体能够中和高浓度TNF-α在机体内产生的各种有害效应,已有许多实验证据表明,具有中和作用的TNF-α单克隆抗体能够预防和治疗因TNF-α过量而导致的炎症、感染性休克等相关疾病状态。单链抗体(single ch...
- 杨涛解军张悦红吴博威牛勃
- 文献传递
- 一种特异性降低人IQGAP1基因表达的shRNA及其应用
- 本发明涉及分子遗传学及生物医药领域，具体为一种特异性降低人IQGAP1基因表达的shRNA及其应用，本发明提供了一种特异性降低人IQGAP1基因表达的发夹型干扰RNA，如SEQIDNO.1所示，针对的靶序列为人IQGAP...
- 王晓霞陈显久牛勃解军路娜程牛亮
- 重组γ干扰素的表达与纯化被引量：4
- 2000年
- 目的 探讨γ干扰素在大肠杆菌中的表达及纯化方法 ,为下一步批量生产提供实验依据。方法 应用DNA重组技术把中国人淋巴细胞mRNA反转录产物IFN -γcDNA克隆到原核表达质粒 pBV2 2 0上 ,构建出pBVIFN高效表达载体 ,转化大肠杆菌 plyss。通过温度诱导 ,高效表达IFN -γcDNA。然后 ,经过包涵体溶解、复性、浓缩及DEAE离子交换层析 ,使γ干扰素纯化。结果 IFN -γcDNA表达水平占菌体可溶性蛋白的 40 4% ,包涵体纯度为 70 % ,总生物活性为 1 2 7× 10 9U ,比活性达 1.31× 10 9U/L蛋白 ,活性回收率为 77.7%。
- 吴玲牛勃解军赵建滨
- 关键词：分子克隆重组DNA
- 抗叶酸药物在制备构建神经管畸形小鼠模型中的应用
- 本发明涉及抗叶酸药物在制备构建神经管畸形小鼠模型中的应用，具体而言，是采用抗叶酸代谢药物干预孕鼠，造成叶酸代谢障碍，引起鼠胚胎发育异常，从而建立起神经管畸形小鼠模型；本发明所采用的方法操作简单，重复性好，致畸率高，效果稳...
- 张霆谢秋牛勃向前王明生关涛王秀伟官臻王建华王国亮朱智强
- 文献传递
- 香烟烟雾对大鼠晶体的损伤及硒强化沙棘油的保护作用
- 1997年
- 利用香烟烟雾制成的动物模型，观察了香烟烟雾对大鼠晶体的损伤及硒强化沙棘油的保护作用。实验结果表明，吸烟组大鼠晶体中水溶性蛋白质、非蛋白质巯基和蛋白质巯基的含量以及超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）和谷胱甘肽过氧化物酶（ＧＳＨ－Ｐｘ）的活性显著降低，水不溶性蛋白质和丙二醛（ＭＤＡ）的含量显著升高，而硒强化沙棘油组的上述指标则无显著性差异。结果提示，香烟烟雾可致大鼠晶体损伤而硒强化沙棘油则具有保护作用。
- 程牛亮王惠珍崔香丽郑国平牛勃高应
- 关键词：硒沙棘油自由基晶体损伤白内障
- 人源性抗HBsAg单链抗体在大肠埃希菌中分泌表达条件的研究被引量：1
- 2009年
- 目的研究抗HBsAg单链抗体A-15在大肠埃希菌中的高效表达，增加该抗体在培养基中的产量。方法改变工程菌的诱导时机、诱导剂浓度和诱导时间，以观察这些因素对单链抗体表达的影响。另外，加入不同浓度的蔗糖、甘氨酸和Triton X-100，以考察三种化学物质对单链抗体在培养基中分泌量的影响。结果工程菌培养4h后，加终浓度0．5mmol／LIPTG诱导表达8h为抗HBsAg单链抗体A-15较佳的表达条件。终浓度0．3mol／L蔗糖，2％甘氨酸和1％Triton X-100同时加入诱导时的培养基中，可使培养基中表达的单链抗体亲和活性分别增加16．78倍。经测定抗HBsAg单链抗体A-15在培养基中最终表达量为7．4mg／L。结论抗HBsAg单链抗体A-15的分泌表达条件得到优化，表达量明显提高，这为更有效地制备该抗体用于其结构和功能研究提供了一个切实可行的方法。
- 张建林王建华钟儒刚牛勃
- 关键词：分泌表达大肠埃希菌
- 缺血再灌注大鼠肝组织细胞核NF-κB提取被引量：6
- 2000年
- 应用液氮快速冷冻组织破碎技术 ,将缺血再灌注大鼠肝组织破碎 ,去除组织细胞碎片。应用高盐溶液提取法、高速离心法分离纯化大鼠肝组织核蛋白。提取物经凝胶滞留电泳分析其NF -κB成分 ,结果满意。该方法的建立 ,为进一步研究核转录因子活性及其调控基因的表达提供了基础。
- 徐钧牛勃王惠珍解军吴玲
- 关键词：核蛋白肝缺血再灌注肝组织
- 老年大鼠的慢性硒中毒被引量：3
- 2002年
- 目的 探讨老年大鼠对硒的耐受剂量 ,并比较有机硒 (富硒平菇 )与亚硒酸钠的优劣。方法 在正常饲料的基础上 ,分别加亚硒酸钠、普通平菇干粉、富硒平菇干粉配成含硒量为 0 9、0 3、0 2、0 172mg/kg混合饲料 ,对 18个月龄的Wistar大鼠进行实验 ,实验期 10 2d。观察实验前后体重变化、生存时间、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH PX)活性、血红蛋白 (Hb)含量、丙氨酸转氨酶 (ALT)活性、尿素氮 (BUN)含量以及脂质过氧化物 (LPO)含量和超氧化物歧化酶 (SOD)活性。结果 ①亚硒酸钠 0 9mg/kg组GSH PX活性随喂养时间延长活性降低、富硒平菇 0 9、0 3mg/kg两组均随时间延长而活性增加。②雄、雌性大鼠在实验前后体重有显著变化 ,雄性减重、雌性增重。③富硒平菇和亚硒酸钠 0 9mg/kg两组生存时间均有降低。④亚硒酸钠 0 9mg/kg组Hb含量降低、ALT活性增高。⑤普通平菇组Hb含量有所增高。⑥富硒平菇 0 3mg/kg组LPO含量降低。结论 亚硒酸钠 0 9mg/kg饲料长时间补充对老年鼠有毒害作用。而适量硒的补充 。
- 覃秀桃牛勃程牛亮王树党戴兆雄田浩
- 关键词：硒老年期耐受剂量
- DNA总体低甲基化、错配修复基因启动子甲基化异常与神经管畸形的相关性被引量：4
- 2012年
- 目的研究神经管畸形(NTDs)胚胎脑组织和皮肤组织DNA总体甲基化以及错配修复基因启动子区甲基化水平。方法在山西省吕梁地区以医院为基础进行病例-对照研究。从县级医院及妇幼保健院收集经B超诊断为NTDs的胎儿标本,同时收集非病理性引产、无畸形和发育迟缓的胎儿作为正常对照组。运用甲基化定量试剂盒测定脑组织和皮肤组织的DNA总体甲基化水平,甲基化特异性多连接依赖性探针扩增试剂盒检测7个错配修复基因(MLH1,MSH2,MSH6,MSH3,MLH3,PMS2和MGMT)启动子区甲基化水平。结果共有65例NTDs胚胎,48例对照胚胎进入研究。①NTDs组的脑组织DNA总体甲基化水平显著低于对照组(5.3%vs6.5%,P<0.001),DNA总体低甲基化显著增加了NTDs发生风险(OR=4.98,95%CI:1.42～17.53)。皮肤组织DNA总体甲基化水平在两组间差异无统计学意义(13.3%vs13.1%,P>0.05);②NTDs和对照组的MSH6启动子(MSH6-301:2.5%vs3.7%,P<0.05)和PMS2启动子(PMS2-328:5.7%vs6.7%;PMS2-142:2.0%vs2.7%,P<0.05)的甲基化水平存在显著差异。结论 DNA总体低甲基化、错配修复基因启动子区的异常甲基化修饰与NTDs发生有关。
- 陈晓丽郭金邹继珍卢晓琳包怡华吴丽华牛勃
- 关键词：神经管畸形错配修复基因病例对照研究
