宋红卫
- 作品数:5 被引量:8H指数:2
- 供职机构:西北农林科技大学动物医学院生物工程研究所更多>>
- 发文基金:国家高技术研究发展计划国家科技重大专项更多>>
- 相关领域:生物学农业科学更多>>
- 人胎盘TRAIL基因的cDNA克隆及序列测定被引量:1
- 2005年
- 根据GeneBank(U37518)中TRAIL(肿瘤坏死因子相关的凋亡诱导配体)的cDNA序列,设计扩增引物。采用RT-PCR从人胎盘中扩增出TRAIL基因的全长cDNA。产物纯化后连至pGEM-TEasy载体,转化大肠杆菌DH5α。筛选阳性克隆菌,酶切鉴定并进行序列测定。结果表明,本试验成功地克隆了TRAIL基因的1039bp全长cDNA。
- 张明烽唐爽宋红卫张涌
- 关键词:RT-PCR人胎盘
- 人乳铁蛋白基因乳腺表达载体构建及细胞表达
- β-乳球蛋白(BLG)是反刍动物最主要的乳清蛋白,在人和啮齿动物乳中都不存在。基质结合区是真核基因组的DNA序列中能特异地和核基质紧密结合的区域,它广泛地存在于从酵母到人的所有真核生物基因组中。本试验以山羊β-乳球蛋白基...
- 宋红卫
- 关键词:人乳铁蛋白基因山羊乳腺上皮细胞表达载体构建脂质体转染真核生物基因组
- 文献传递
- 山羊BLG基因5′调控序列克隆及其调控GFP基因细胞的表达被引量:3
- 2005年
- 通过PCR扩增出2.2kb的山羊β-乳球蛋白基因5′端的调控序列,包括第一外显子和第一内含子。测序结果表明,该序列与GenBank中登录序列相比,同源性为99.5%。用其替代表达载体pEGFP-c1上原来的启动子CMV,指导报告基因绿色荧光蛋白(GFP)在山羊乳腺细胞中的瞬时表达,结果发现该调控序列可以有效指导报告基因的表达,从而初步验证了所克隆的山羊乳球蛋白(BLG)基因表达调控序列的有效性。表明克隆的调控序列可用于乳腺生物反应器的研究。
- 宋红卫郑月茂张明烽唐爽张涌
- 关键词:山羊Β-乳球蛋白基因GFP基因
- 人乳铁蛋白基因乳腺特异性表达载体的构建及转染研究被引量:4
- 2007年
- 构建了携带人乳铁蛋白(LTF)基因、绿色荧光蛋白(GFP)基因的乳腺特异性表达载体(pEBL),用脂质体法转染泌乳期莎能奶山羊乳腺上皮细胞,转染后于荧光显微镜下观察GFP表达情况。用G 418对转染细胞进行筛选,获得抗性细胞克隆,并对转染细胞进行PCR检测。结果显示,pEBL构建成功,转染6 h后可观察到细胞有GFP表达,PCR检测阳性克隆细胞转有LTF基因。表明pEBL载体已转染山羊乳腺上皮细胞,为进一步建立转基因动物乳腺生物反应器奠定了基础。
- 张晶晶刘凤军彭淑英宋红卫张涌
- 关键词:山羊乳腺上皮细胞人乳铁蛋白绿色荧光蛋白
- 山羊基因组文库的构建研究
- 2005年
- 构建了山羊基因组文库,为筛选山羊乳蛋白基因,构建山羊乳蛋白基因定点整合的转基因敲入载体奠定基础.全血提取基因组DNA,Sau3AI部分酶切,分级分离回收15~23 kb片段,将片段插入Lambda BlueSTAR BamHI vector,连接并包装后,NotI酶切鉴定.结果表明,文库滴度为3.4×106;共得到1.7×106个有效克隆,插入片断长度在15~23kb范围,成功构建了西农萨能奶山羊基因组文库.
- 唐爽安志兴张明烽宋红卫张涌
- 关键词:基因组文库西农萨能奶山羊萨能奶山羊基因组文库LAMBDAVECTOR酶切鉴定