常月红
- 作品数：30 被引量：49H指数：4
- 供职机构：中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室更多>>
- 发文基金：中央级公益性科研院所基本科研业务费专项国家科技攻关计划国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 重排噬菌体E基因、含有该基因的打孔质粒载体及其应用
- 本发明公开了一种经基因重排后获得的PhiX174噬菌体mE基因以及含有该基因的打孔质粒载体及其构建方法，本发明还进一步涉及该孔质粒载体在制备菌蜕中的用途，属于基因工程领域。本发明利用基因重排技术，对PhiX174噬菌体E...
- 刘思国常月红刘慧芳王春来彭伟司薇
- 文献传递
- 牛抗菌肽Bac7-Bac5融合基因在大肠杆菌中的过表达,纯化及抑菌活性被引量：14
- 2007年
- 牛抗菌肽Bac7和Bac5是一种线性阳离子小分子多肽,在机体天然免疫和获得性免疫中都发挥着重要作用。根据Gen bank中公布的牛抗菌肽bac7和bac5成熟肽基因序列,人工合成了融合基因Bac7-Bac5片段,克隆于原核表达载体pET32(a+)中构建了重组表达载体pET-B7-B5,将其转化于E.coli BL21(DE3)中实现了重组蛋白B7-B5(rB7-B5)的过表达,表达的rB7-B5以包涵体形式存在,rB7-B5表达量约占细菌总蛋白的36.6%,分子量大小为33kDa,与预测大小相符。以8mol/L尿素变性包含体后用Ni亲和层析柱纯化目的蛋白,经多步透析法复性的rB7-B5对猪胸膜肺炎放线杆菌和耐药性大肠杆菌具有很好的抑菌活性,为新型抗菌制剂的研制和开发奠定了基础。
- 赵昆刘思国王春来宫强迟磊刘建东王勇云孟克常月红刘慧芳周媛媛孙延鸣
- 关键词：融合基因抑菌活性
- 大肠杆菌打孔质粒载体、其构建方法及在制备菌蜕中的应用
- 本发明公开了一种大肠杆菌打孔质粒载体pBV－E及其构建方法，本发明还公开了该大肠杆菌打孔质粒载体在制备大肠杆菌菌蜕中的用途，属于基因工程领域。本发明大肠杆菌打孔质粒载体采用了两个启动子，即pR、pL串联双启动子来表达E基...
- 刘思国王春来常月红刘惠芳
- 文献传递
- 广宿主打孔质粒载体、其构建方法及在制备菌蜕中应用
- 本发明公开了一种广宿主打孔质粒载体pBBR－E及其构建方法，本发明还公开了该广宿主打孔质粒载体pBBR－E在制备支气管败血波氏杆菌菌蜕中的用途，属于基因工程领域。本发明广宿主打孔质粒载体pBBR－E由温敏调控基因cI85...
- 王春来刘思国常月红刘惠芳
- 文献传递
- 牛分枝杆菌单基因及双价融合基因DNA疫苗免疫效果的研究被引量：2
- 2007年
- 利用PCR技术和SOE技术扩增牛分枝杆菌ag85b、esat-6、hsp65、mpb64基因和ag85b-esat-6、hsp65-esat-6和mpb64-esat-6融合基因,连接真核表达载体pCDNA3.1(+),构建重组质粒pCA、pCE6、pCH、pCM、pCAE、pCHE和pCME。转染SP2/0细胞,检测目的基因的表达。以各重组质粒和pCDNA3.1(+)及PBS免疫BALB/c小鼠后检测血清特异性抗体水平、脾淋巴细胞增殖情况和IFN～γ分泌情况。结果表明,7种重组质粒免疫后小鼠血清抗体水平持续上升,与pCDNA3.1(+)对照组和PBS对照组相比差异显著(P<0.05),其中pCA组血清抗体水平明显高于其他6种DNA疫苗免疫组(P<0.05);三免两周后,融合基因免疫组的刺激值(SI值)与单基因免疫组相比差异显著(P<0.05),其中以pCME组的SI值最高;PPD刺激后融合基因DNA疫苗免疫组小鼠脾细胞分泌的IFN～γ高于单基因DNA疫苗组(P<0.05),而两对照组则未检测到IFN～γ的产生。成功构建了牛分枝杆菌ag85b、esat-6、hsp65、mpb64单基因和ag85b-esat-6、hsp65-esat-6、mpb64-esat-6双价融合基因DNA疫苗,从而为牛结核病新型疫苗的研制奠定了基础。
- 宫强刘思国王春来王勇刘建东迟磊赵昆周媛媛常月红云孟克孔宪刚
- 关键词：牛分枝杆菌单基因融合基因DNA疫苗
- 猪胸膜肺炎放线杆菌血清7型抑制消减杂交文库的构建和分析被引量：4
- 2007年
- 为了研究猪传染性胸膜肺炎放线杆菌（APP）不同血清型之间的差异表达基因,采用抑制消减杂交（SSH）法,以APP血清7型DNA作为测试方（Tester）、APP血清1型DNA作为驱动方（Driver）,进行2轮杂交和2轮选择PCR扩增,将PCR扩增产物连接pMD18-T载体,筛选阳性克隆后进行测序和序列比对.结果显示,15个阳性克隆中的13个为已知序列,其同源性为88%～100%,2个为未知序列,其结构和功能还需进一步研究.首次构建了APP7的抑制消减杂交文库,为APP感染和致病机制的研究奠定了基础.
- 王勇刘思国王春来宫强刘建东刘慧芳周媛媛常月红云孟克李广兴
- 关键词：胸膜肺炎放线杆菌抑制消减杂交DNA文库
- 重排噬菌体溶菌基因及其打孔载体和在制备疫苗中的应用
- 本发明公开了重排噬菌体溶菌基因及其打孔载体和在制备疫苗中的应用。本发明重排噬菌体溶菌基因的核苷酸序列为SEQ ID NO：1所示。将本发明重排噬菌体溶菌基因可操作的与原核表达载体相连即得到高效打孔载体；将该打孔载体转化到...
- 刘思国常月红彭伟刘慧芳王春来司微
- 文献传递
- 利用体内诱导抗原技术检测胸膜肺炎放线杆菌体内表达基因
- 本研究利用体内诱导抗原技术(IVIAT)对胸膜肺炎放线杆菌(APP)体内表达的基因进行了研究。.将收集到的5份感染了APP1的猪血清混合,分别吸附体外培养的APP1和大肠杆菌DE3的全菌及全菌
- 刘慧芳刘思国王春来司微王聃杜艳芬赫明雷常月红
- 文献传递
- 用胸膜肺炎放线杆菌基因组表达文库免疫小鼠产生的免疫保护作用
- 为了筛选、鉴定APP保护性抗原基因库,本研究构建了胸膜肺炎放线杆菌血清7型的基因组表达文库(～106个克隆),并将该文库分成10个克隆库(1.0×105个克隆/库)。提取每个克隆库的重组质粒免疫小鼠并以1型胸膜肺炎放线杆...
- 刘慧芳周媛媛刘思国宫强王勇刘建东王春来云孟克常月红迟磊赵昆
- 关键词：胸膜肺炎放线杆菌免疫保护
- 文献传递
- 增强噬菌体溶菌基因打孔效率的DNA序列及其应用
- 本发明公开了增强噬菌体溶菌基因打孔效率的DNA序列及其应用。本发明利用基因重排技术对噬菌体E基因进行重排，使其阅读框架为276个核苷酸的E突变成阅读框架为201个核苷酸的ΔE(SEQ ID NO：3)，而前74bp基因变...
- 刘思国彭伟常月红刘慧芳王春来司微
- 文献传递
