张美丽
- 作品数：6 被引量：7H指数：1
- 供职机构：中国医学科学院北京协和医学院基础医学院基础医学研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 1号染色体长臂扩增削弱人胚胎干细胞神经分化潜能
- 2022年
- 目的探讨1号染色体长臂(1q)的扩增对人胚胎干细胞(hESCs)神经分化的影响。方法通过对H9 hESCs克隆化培养的方法获得1q扩增的hESCs系。中期染色体计数的方法明确细胞内的染色体数目,核型分析鉴定染色体变异的情况,全基因组测序(WGS)分析基因组片段拷贝数变异的情况。使用碱性磷酸酶(AP)染色法检测细胞干性维持的情况,RT-qPCR和免疫荧光染色等方法检测胚胎干细胞(ESCs)标志物OCT4、SOX2、NANOG、REX1和SSEA4等的表达。拟胚体(EB)形成实验进行hESCs不定向分化、全反式视黄酸(RA)诱导hESCs向外胚层分化、使用STEMdiff?SMADi Neural Induction Kit诱导hESCs向神经祖细胞(NPCs)定向分化,并通过RT-qPCR、AP染色和免疫荧光染色等方法检测其分化能力。两组间比较采用独立样本t检验。结果分离获得一株1q发生2个拷贝扩增的细胞,核型分析发现额外获得的2个1q是等臂染色体,核型为[47,XX,+i(1q)],将其命名为Amp(1q)。Amp(1q)AP染色呈阳性,且表达ESCs标志物OCT4、SOX2、NANOG、REX1和SSEA4,具备干细胞自我更新的特征。EB分化过程中,与H9细胞相比,Amp(1q)向外胚层的分化能力下降,MAP2(29.67±1.53比66.67±1.15)和PAX6(8001±567.09比28308.00±1692.50)的表达降低(P均<0.05);RA诱导分化实验进一步证明,与H9细胞相比,Amp(1q)存在向外胚层分化的缺陷,MAP2(22.50±3.54比42.50±2.12)和PAX6(5403.00±569.93比38756.00±1068.44)的表达降低(P均<0.05)。当定向诱导向神经谱系分化时,Amp(1q)形成NPCs的能力降低,NPCs标志物PAX6的表达水平低于H9细胞(13.83±3.75比88.33±1.53)(P均<0.05)。结论Amp(1q)具有ESCs自我更新的能力,但1q的扩增会削弱hESCs神经分化的能力。
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- 关键词：人胚胎干细胞自我更新神经分化
- 异倍体小鼠胚胎干细胞系的建立及功能分析
- 目的:建立异倍体小鼠胚胎干(mES)细胞系,研究异倍体对mES细胞功能特征的影响.方法:我们用转座子介导的基因组随机插入、Cre-loxP系统等遗传学操作方法富集某条或某几条染色体三体(Trisomy)的mES细胞株系....
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- 关键词：异倍体胚胎干细胞自我更新增殖
- 使用单倍体干细胞高效建立遗传修饰动物模型的方法
- 本发明公开了使用单倍体干细胞高效建立遗传修饰动物模型的方法。具体地，本发明公开了使用单倍体干细胞高效建立遗传修饰动物模型的方法，其包括：a)使用同源重组敲除孤雄单倍体胚胎干细胞的H19基因；b)筛选和鉴定正确敲除H19基...
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- 文献传递
- DNA转座子在小鼠基因功能研究中的应用被引量：7
- 2011年
- 近年来,转座子介导的插入突变在哺乳动物的分子遗传学研究中得到了广泛的应用。转座子作为一种简便高效的遗传学操作工具,在构建转基因动物模型、基因治疗、细胞水平和动物整体水平的基因功能研究等方面发挥了重要的作用。文章重点介绍DNA转座子的结构、功能及其应用于小鼠分子遗传学领域的最新研究进展。
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- 关键词：转座子插入突变SLEEPINGBEAUTYPIGGYBAC
- 探究内质网应激在异倍体胚胎干细胞分化障碍中的作用机制
- 异倍体(Aneuploidy)，即细胞内染色体数目的 非整倍性变异。它是自发性流产和胚胎发育异常的主要原因，也是肿瘤细胞的重要特征，并与肿瘤病人的不良预后直接相关。然而异倍体是肿瘤发生的原因还是肿瘤产生的副产物一直是学术...
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- 关键词：干细胞分化异倍体内质网应激
- 异倍体小鼠胚胎干细胞系的建立及功能分析
- 目的:建立异倍体小鼠胚胎干(mES)细胞系,研究异倍体对mES细胞功能特征的影响。方法:我们用转座子介导的基因组随机插入、Cre-loxP系统等遗传学操作方法富集某条或某几条染色体三体(Trisomy)的mES细胞株系。...
- 张美丽贾玉艳纪少伟黄粤
- 关键词：异倍体胚胎干细胞自我更新增殖
- 文献传递
