张西萌
- 作品数：27 被引量：93H指数：6
- 供职机构：北京出入境检验检疫局更多>>
- 发文基金：国家质检总局科技计划项目国家质检公益性行业科研专项质检公益性行业科研专项项目更多>>
- 相关领域：医药卫生轻工技术与工程农业科学生物学更多>>
- 实时荧光定量RT-PCR法快速定量检测果蔬中星状病毒被引量：3
- 2017年
- 目的:针对不同果蔬表面建立星状病毒富集与RNA提取方法,结合已报道的实时荧光定量逆转录聚合酶链式反应(reverse transcription-polymerase chain reaction,RT-PCR)引物和探针,实现果蔬中星状病毒的高灵敏快速定量检测。方法:利用10倍梯度稀释的星状病毒c RNA分子检测Ct值及其对应的初始浓度,构建标准曲线,为星状病毒的定量检测提供参考。将ISO/TS 15216-2:2013针对果蔬中诺如病毒和甲肝病毒RNA的提取方法用于星状病毒的检测,利用人工感染的大白菜和草莓样品,分析病毒回收率、灵敏度及检测重复性。最终通过60份果蔬样品的检测验证该方法的实用性。结果:所建立的实时荧光定量RT-PCR方法扩增效率达95.9%,检测低限为5.6拷贝/反应。人工感染的大白菜样品中病毒回收率在0.94%~9.63%之间,而人工感染草莓样品中病毒回收率最高达1.03%。对同一感染浓度的样品在不同时间的检测结果变异系数均小于2%。最终检出1份来自北京农贸市场的草莓样品为星状病毒阳性,检测阳性率达1.67%。结论:建立的果蔬中星状病毒荧光RT-PCR定量检测方法快速、高效、灵敏,在食源性病毒的日常筛查和风险评估工作中具有重要的应用价值。
- 马丹魏海燕徐蕾蕊魏咏新汪琦张西萌付溥博刘莉赵晓娟曾静
- 关键词：星状病毒实时荧光定量RT-PCR果蔬
- 北京港口水产品中非O1/O139群霍乱弧菌MLST分型研究被引量：2
- 2018年
- 为了分析2008-2011年北京港口进出口水产品中非O1/O139群霍乱弧菌的多位点序列分型(MLST)特征,为霍乱弧菌导致食品安全事件的有效溯源提供理论支持,选取2008-2011年北京港口食源性非O1/O139群霍乱弧菌分离株67株,采用毒力基因PCR检测并用MLST分析。结果:毒力基因PCR检测结果显示,所有菌株均未检出CTX、tox R、hly A 3种基因。菌株的MLST结果显示,菌株可被分为62个ST型,具有明显的多样性。其中原有STs 2个,新发现STs 60个。同ST型菌株均来源于同一国家,本实验数据同pubmlst数据库中数据进行分析,有7个STs可以归为7个克隆组,它们来源于中国和泰国,同组内STs来源于中国、澳洲、法国、泰国和非洲。表明北京港口非O1/O139群霍乱弧菌遗传特征复杂多样,MLST方法可作为可靠的食品污染溯源手段,相同地区的菌株有一定的地域特点,此研究丰富了现有霍乱弧菌MLST数据库,为其溯源提供支持。
- 付溥博张琳曾静张西萌魏咏新魏海燕耿荣
- 关键词：多位点序列分型
- 2008～2017年间北京进出口水产品中副溶血性弧菌耐药性分析被引量：4
- 2018年
- 目的了解北京进出口水产品中副溶血性弧菌(Vibrio parahaemolyticus,VP)的耐药情况。方法对2008~2017年间北京进出口水产品中分离出的320株副溶血性弧菌应用药敏纸片扩散法(K-B法)进行21种常用抗生素药敏测试。结果 89.1%的实验菌株同时对氨苄西林耐药,而对环丙沙星、诺氟沙星、庆大霉素、多粘菌素B、亚胺培南全部敏感;分别有高达94.7%和82.1%的菌株对红霉素和链霉素表现为中介。结论实验菌株存在大量中介耐药和异质性耐药的情况,应进一步加强水产品中副溶血性弧菌耐药性的监测工作,以期指导临床和水产养殖中抗生素的使用。
- 付溥博张西萌马丹徐蕾蕊魏海燕魏咏新曾静
- 关键词：副溶血性弧菌水产品耐药性
- 星状病毒核酸检测标准物质的研制被引量：7
- 2016年
- 目的：研制用于食品中星状病毒核酸检测的c RNA标准物质。方法：利用基因克隆体外转录方法制备星状病毒c RNA纯品,初步定量后稀释至适宜浓度进行分装,其中一部分分装样品添加RNAsafe处理,剩余部分不做处理,制备2种标准物质样品。采用实时荧光定量实时聚合酶链式反应（real-time-polymerase chain reaction,RTPCR）方法检验2种标准物质样品均匀性和稳定性。样品中RNA浓度（拷贝/μL）通过荧光定量RT-PCR和数字PCR联合定值获得,并进行不确定度分析。结果：均匀性结果显示2种样品组间精密度与组内精密度差异均无统计学意义（P〉0.05）。稳定性检验表明20-25℃10 d、4℃14 d、-20℃3个月及-80℃和液氮6个月2种样品c RNA含量无显著变化。RNAsafe（-）标准物质定值为：（1.652±0.143）×10^8拷贝/μL（-80℃）和（1.652±0.135）×10-8拷贝/μL（液氮）。结论：RNAsafe（-）标准物质样品可作为用于星状病毒核酸检测的标准物质。
- 徐蕾蕊魏海燕林长军马丹汪琦张西萌李丹付溥博刘莉魏永新赵晓娟曾静
- 关键词：星状病毒核酸标准物质
- 食品微生物检测试剂盒评价方法建立与应用被引量：2
- 2015年
- 目的建立实用可行的食品微生物检测试剂盒的评价方法。方法本研究以ISO 16 140为理论基础、GB 4789.10-2010为参比方法 ,从检测特异性、灵敏度、耐变性/统计学分析等方面对3M公司Petrifilm大肠埃希氏菌检测试剂盒(PEC)进行了可替代性评价。结果 PEC法对目标菌检测的特异性为84%,对非目标菌检测的特异性为100%;灵敏度检测中在25份低浓度添加样品里,PEC法的灵敏度有22份可以达到10 CFU/g,3份火腿样品的结果为阴性,国标法所有样品灵敏度均可达到10 CFU/g;耐变性评价中,PEC法在35℃/37℃、18 h/24 h耐变性条件的比较中检测结果差异均无统计学意义(P>0.05);应用2种方法对添加高、中、低3个水平的大肠埃希菌的五大类样品进行测试,线性方程为y=0.942 1x+0.328 4,相关系数为0.798 9,5类样品不同方法测试结果差异均无统计学意义(P>0.05);应用2种方法对30份自然样品进行检测,PEC法检测出4份阳性样品,国标法检测出6份阳性样品,2种方法阳性符合率为93.33%,差异无统计学意义(P>0.05)。结论以ISO 16140为理论基础可建立一套评价方法 ,此方法可系统的对微生物检测用试剂盒的可替代性进行评价。
- 付溥博张西萌韩笑刘莉马丹魏海燕王紫薇曹嘉悦朱涵俊曾静
- 关键词：食品微生物
- 3D人工皮肤模型用于化学品皮肤刺激性实验的评估被引量：4
- 2014年
- 目的采用"EpiSkin"3D人工皮肤模型,对20种化学品的刺激性进行评价。方法 20种化学品(固体10 mg、液体10μl)局部接触检测模型表面15 min,用MTT方法测定细胞活力。结果以相对细胞活力值为判定刺激性的依据,在20种化学品中,检测模型特异性为70%,灵敏度为90%。结论 "EpiSkin"3D人工皮肤模型能正确分类所测试的化学品,可以尝试用于化学品皮肤刺激性测试。
- 马丹赵晓娟付溥博张西萌魏海燕刘莉曾静
- 关键词：刺激性化学品
- 单核细胞增生李斯特氏菌Rapid’L.mono快速筛选方法的评价被引量：1
- 2018年
- 目的对单核细胞增生李斯特氏菌Rapid’L.mono快速筛选方法进行评价。方法以国家标准GB4789.30-2016作为参照方法,在检测特异性、交叉反应试验、添加实验、不同批次产品培养条件的影响和实际样品的检测方面对Rapid’L.mono快速筛选方法进行比较和评价。结果 Rapid’L.mono快速筛选培养基准确率达到97%,与30株非目标菌无交叉反应。GB 4789.30-2016方法的检出率高于快速筛选方法,2种方法的检测差异存在统计学意义(χ~2=15.864,P<0.05)。培养温度和培养时间的变化对Rapid’L.mono快速筛选方法的检出率没有影响。230份样品中,GB 4789.30-2016方法和Rapid’L.mono快速筛选方法均未检测到阳性结果样品。结论 Rapid’L.mono快速筛选培养基可以作为一种选择性培养基来使用,Rapid’L.mono快速筛选方法可以辅助国标方法应用于食品检测中。
- 韩笑张西萌张琳王紫薇陈鑫杨丽莉吕敬章曾静
- 关键词：单核细胞增生李斯特氏菌食品
- 海产品中副溶血性弧菌免疫磁分离和环介导等温扩增快速检测方法的建立被引量：4
- 2013年
- 目的采用纳米免疫磁珠分离副溶血性弧菌,建立副溶血性弧菌环介导等温扩增检测方法。方法采用副溶血性弧菌单克隆抗体,制备纳米免疫磁珠,特异性吸附副溶血性弧菌,结合环介导等温扩增技术,建立副溶血性弧菌快速检测方法。结果副溶血性弧菌纳米免疫磁珠在菌体浓度为103cfu/ml水平时,对副溶血性弧菌的捕获率达到74%。免疫磁分离结合环介导等温扩增技术,在纯培养、无需增菌情况下,检测灵敏度达到140 cfu/ml增菌液;通过对134株副溶血性弧菌和74株非目标菌的测试,环介导等温扩增技术具有良好的特异性;食品基质添加试验中,在增菌时间缩短至8 h的条件下,其检测限为2 cfu/25 g样品。结论副溶血性弧菌免疫纳米磁珠结合环介导等温扩增技术,有效缩短了增菌时间,适用于副溶血性弧菌的快速检测。
- 张蕾张海予曾静程晋霞魏海燕张西萌马丹
- 关键词：副溶血性弧菌海产品环介导等温扩增食源性致病菌
- RAPID'Sakazakii Agar克罗诺杆菌属显色培养基的性能评价被引量：2
- 2018年
- 依据RSA快速筛选方法及GB 4789.40方法,在特异性、检测灵敏度、样品种类、培养条件等方面对伯乐公司RAPID'Sakazakii Agar克罗诺杆菌属显色培养基的性能进行评价。结果显示,该培养基特异性和选择性好,具有高检出率、易观察、易配制、使用方便等特点,可以作为一种选择性培养基在微生物检测行业推广使用。
- 张西萌韩笑付溥博曾静魏海燕陈鑫魏咏新
- 关键词：显色培养基
- 海产品中霍乱弧菌免疫磁分离和环介导等温扩增快速检测方法的建立被引量：5
- 2015年
- 目的:采用纳米免疫磁珠分离霍乱弧菌,建立霍乱弧菌环介导等温扩增检测方法,以缩短检测时间。方法:采用本实验室制备的霍乱弧菌单克隆抗体制备纳米免疫磁珠,特异性吸附霍乱弧菌,结合环介导等温扩增技术,建立霍乱弧菌快速检测方法。结果:霍乱弧菌纳米免疫磁珠在菌体浓度103CFU/m L水平,对霍乱弧菌的捕获率最高达70%。免疫磁分离结合环介导等温扩增技术,在纯培养、无需增菌的情况下,检测灵敏度达到4.8×102CFU/m L菌液。通过测试102株霍乱弧菌和101株非目标菌,该检测方法均具有良好的特异性。在食品基质添加试验中,其检测限为1 CFU/25g样品,增菌时间缩短到8 h。结论:霍乱弧菌免疫纳米磁珠结合环介导等温扩增技术缩短了增菌时间。目标菌纯培养、无需增菌条件下,检测灵敏度达到4.8×102CFU/m L增菌液。人工添加样品,8 h增菌条件下,检测低限达到1 CFU/25 g样品。
- 程晋霞曾静张西萌张蕾刘莉张海予
- 关键词：霍乱弧菌环介导等温扩增
