张颖
- 作品数:4 被引量:11H指数:2
- 供职机构:中国热带农业科学院热带生物技术研究所更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金广西大学谭锦球青年科研基金中央级公益性科研院所基本科研业务费专项更多>>
- 相关领域:生物学农业科学更多>>
- 一种适用于提取香蕉果肉RNA的方法被引量:6
- 2004年
- 介绍一种适用于提取富含多糖和酚类物质的香蕉果肉总RNA的方法。此方法可用于从不同成熟度的果肉中提取总RNA。经紫外分光光度法检测和1%琼脂糖变性凝胶电泳分析,结果表明,所得样品RNA具有较好的完整性,较高的纯度和产率,可满足RT-PCR研究要求。
- 冯斗张春发张颖
- 关键词:核糖核酸香蕉
- 香蕉乙烯受体基因RNA干扰表达载体的构建被引量:4
- 2004年
- 设计两对引物,PCR扩增香蕉乙烯受体基因cDNA序列自AUG启始密码子起长538bp区段的正向(记为5'I)、反向(记为AI')DNA区段。构建含该正、反向互补重复序列DNA片段的中间载体,经测序证实连接正确后,克隆到植物表达载体pCAMBIA-1301中的GUS基因位置并经双酶切证实。在所得表达载体pCAMBIA-1301-S5'I-AI'中,该插入正反互补重复片段处于35S启动子之后,由此转录的mRNA因两端序列反向互补而形成发夹式RNA,因此可应用于RNA干扰研究。同时,文中对构建含正、反向重复序列插入片段植物表达载体过程中出现的插入片段链内退火引起连接困难等问题进行了分析讨论。
- 冯斗张春发张颖
- 关键词:乙烯受体基因RNA干扰植物表达载体香蕉
- ETR1靶向RNA干扰重组体的构建及序列分析被引量:1
- 2008年
- [目的]构建拟南芥乙烯受体(ETR1)特异性短发夹环RNA(shRNA)真核表达载体。[方法]从ETR1基因cDNA序列上选取目标序列,设计2对引物,经PCR扩增得到正反向2个DNA片段(S5I和AI),构建含有该正反向互补重复序列DNA片段的中间载体,测序分析正确后再克隆到植物表达载体pCAMBIA1301中的Gus位置并经双酶切证实。[结果]ETR1基因S5I和AI片段被成功克隆进质粒pCAM-BIA1301中,酶切鉴定及测序分析显示,重组质粒shRNA编码序列与设计片段的序列完全一致。[结论]ETR1靶向RNA干扰重组体的成功构建,为进一步获得拟南芥乙烯受体基因的功能缺失突变体奠定良好基础。
- 肖苏生张颖张春发
- 关键词:ETR1RNA干扰短发夹环RNA重组体
- ETR1靶向RNA干扰重组体的构建及序列分析
- 肖苏生张颖张春发
- 关键词:ETR1RNA干扰短发夹环RNA重组体