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白细胞介素-1β基因多态性与新型甲型H1N1流感的关系被引量：1: 2012年; 目的探讨白细胞介素-1β（IL-1β）基因单核苷酸多态性（SNP）与新型甲型H1N1流感易感性的关系。方法针对IL-1β基因5’端的4个SNP位点（rs1143623,rs1143639,rs16944,rs3917345）,使用飞行时间质谱分析技术（TOF-MS）对167例H1N1流感组患者和192例健康对照组人群检测其基因多态性。结果rs16944有A和G两种等位基因,H1N1组A等位基因频率为61.9%,对照组为49.5%,差异有统计学意义（χ2=10.761,P=0.001,OR=0.602,95%CI0.444~0.816）;rs1143639有G和A两种等位基因,G等位基因频率在H1N1组中为95.5%,对照组为98.7%,差异也有统计学意义（χ2=6.708,P=0.0096,OR=3.564,95%CI 1.281~9.917）;其余两个位点在两组人群间无统计学意义。结论rs16944和rs1143639位点与新型甲型H1N1流感易感性相关。; 杨辉张国良汪文斐陈心春郑学宝吴爱武; 关键词：白细胞介素-1Β 单核苷酸多态性甲型H1N1流感

丹皮酚在肝星状细胞活化与胶原合成中的作用研究被引量：2: 2018年; 目的研究丹皮酚在肝星状细胞活化与胶原合成中的作用。方法培养人肝星状细胞共80株,分为A、B、C、D组,每组细胞株为20株,观察丹皮酚对肝星状细胞活化与胶原合成的影响。结果与A组比较,C、D组肝星状细胞α平滑肌动蛋白(α-SMA)mRNA的表达明显升高,差异有统计学意义(P<0.05)。与B组比较,丹皮酚在作用48 h后,C组和D组肝星状细胞活化α-SMA的mRNA表达降低明显,C组和D组均对肝星状细胞活化α-SMA蛋白表达产生明显抑制,与B组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论丹皮酚在肝星状细胞活化与胶原合成中具有抑制作用。; 张美平邱智辉邓乐汪文斐; 关键词：丹皮酚肝星状细胞胶原合成

丹皮酚对人肝星状细胞α-SMA表达的影响被引量：2: 2016年; 目的研究丹皮酚对肝星状细胞活化及胶原合成的影响,进一步阐明其抑制肝纤维化的机制,为抗肝纤维化提供新的成分明确的中药单体。方法采用TGF-β刺激培养的人肝星状细胞,观察丹皮酚在上述条件下对肝星状细胞表型转化、胶原合成的影响,以探讨丹皮酚在体外抗纤维化作用并初步研究其机制。实时荧光定量PCR、Western Blotting检测肝星状细胞α-SMA mRNA及蛋白水平表达,明确丹皮酚对TGF-β刺激下肝星状细胞表型转化的影响。羟脯氨酸法检测细胞培养上清总胶原的表达。结果在TGF-β刺激作用下,α-SMA基因表达明显上调,加入不同浓度的丹皮酚后,α-SMA基因表达下调,并且具有丹皮酚剂量依赖性。在TGF-β刺激作用下,肝星状细胞培养上清中的羟脯氨酸含量明显上升,加入不同浓度的丹皮酚后明显下降。结论 TGF-β刺激使得α-SMA基因表达上调,加入丹皮酚表达下调,丹皮酚对肝星状细胞表型转化有促进其纤维化作用。TGF-β刺激作用下,肝星状细胞培养上清中的羟脯氨酸含量明显上升,提示肝星状细胞胶原合成增加。; 邱智辉张福萍张洁云林静燕潘东明张国良汪文斐张明霞; 关键词：肝纤维化丹皮酚 TGF-Β 肝星状细胞 Α-SMA

肺结核患者外周血单个核细胞中miRNA-150的表达及意义被引量：8: 2016年; 目的分析外周血单个核细胞(PBMC)中miRNA-150在肺结核患者(TB)及健康人群(HD)中的表达差异,探讨miRNA-150诊断活动性肺结核的应用价值。方法选择41例TB患者为实验组(其中19例为涂阳患者,22例为凃阴患者),同时选择35例HD为对照组。采集外周抗凝血利用密度梯度离心法分离PBMC,提取总RNA,利用Taq Man探针q PCR技术检测miRNA-150在各组人群中的相对表达量,以RNU6B作为内参基因。结果 miRNA-150在TB患者外周血PBMC中表达量为(8.74±1.36),显著高于健康对照组(3.544±0.59),差异有统计学意义(P<0.05);应用ROC曲线分析表明,miRNA-150诊断TB的敏感性为61%,特异性为82%。痰涂片阳性TB患者中miRNA-150表达水平显著高于痰涂片阴性患者(12.30±2.43Vs 5.66±1.12),差异有统计学意义(P<0.05)。结论 miRNA-150在TB患者PBMC中表达水平升高,尤其是涂阳患者,可以作为诊断TB的分子标识。; 侯杏芳孟娟张国良汪文斐尤信信张明霞陈心春; 关键词：肺结核外周血单个核细胞

肺结核患者外周血单个核细胞中CD32和CD64的表达及意义被引量：3: 2013年; 目的检测CD32和CD64在肺结核患者外周血单个核细胞(PBMC)中的表达,探讨其在结核病发病中的作用及诊断价值。方法应用Illumina Solexa高通量测序技术和荧光定量PCR检测健康者(HD),结核潜伏感染者(LTBI)和肺结核患者(TB)PBMC中CD32和CD64的表达情况。结果肺结核患者PBMC CD32和CD64表达明显高于健康人和结核潜伏感染者。结论肺结核患者PBMC高表达CD32和CD64,CD32和CD64可能在抗结核免疫中起到重要作用。; 汤跃强汪文斐杨倩婷纪奕玲张明霞陈心春; 关键词：CD64 肺结核

功能性单核苷酸多态性调控结核病易感的分子机制研究: 2017年; 目的通过构建花生四烯酸12-脂氧合酶（ALOX-12）基因（ALOX-12基因）启动子区域rs3840880位点不同基因型的双荧光素酶表达质粒，分析此单核苷酸多态性（singlenucleotide polymorphisms，SNP）对ALOX-12基因启动子活性的影响及其对基因表达的影响，阐明功能性SNP调控结核病易感的分子机制。方法从全血样本中提取人全基因组，PCR扩增ALOX-12基因启动子区域包含rs3840880位点在内的约1700bp的基因片段，构建pGL3-Basic-rs3840880G质粒，对此质粒进行定点突变得到pGL3-Basim-rs3840880D放散型（DEL）质粒，分别转染人宫颈癌细胞株Hela细胞后使用双荧光报告酶检测系统（dual luciferase assay system）检测相对荧光值。结果成功构建了ALOX-12基因启动子区rs3840880位点等位基因G的表达质粒pGL3-basim-G，采用定点突变技术成功将pGL3-basic-G质粒改造为pGL3-Basic-DEL质粒，测序验证后，两质粒其他序列完全相同。分别将此两个质粒转染Hela细胞并检测相对荧光比值[荧光值（F）／荧光（R）]后，发现pGL3-Basic质粒F／R=0．129，等位基因G的F／R=0．194，低于等位基因DEL质粒的F／R（0．274），采用单因素方差分析，二者之间的差异有统计学意义（F=25．09，P=0．001）。结论不同等位基因构建的质粒转染细胞后，荧光报告基因的表达差异具有统计学意义，故ALOX-12基因启动子区域的功能性SNPs确实能够影响启动子的活性，从而调控结核病的易感性。; 朱秀云汪文斐张培泽张洁云邱智辉王召钦张明霞邓国防; 关键词：荧光光度测定法结核病

miR-101调控非小细胞肺癌的发病机制被引量：2: 2018年; 目的探讨miR-101在非小细胞肺癌发生、发展中的作用以及新的分子调控机制。方法将miR-101转染到非小细胞肺癌A549细胞株,比较测量人类非小细胞肺癌组织及癌旁组织的miR-101表达水平。采用生物信息学技术预测miR-101在c-Fos的3′UTR潜在结合靶点,然后采用Western blot法和基因敲除方法检测c-Fos的表达和功能。结果分析miR-101在非小细胞肺癌组织及癌旁组织表达,miR-101在非小细胞肺癌组织中低表达(0.00010±0.00002 vs 0.00021±0.00003,P=0.036),过表达miR-101抑制非小细胞肺癌A549细胞增殖并诱导细胞凋亡。并且在非小细胞肺癌细胞中敲除c-Fos和过表达miR-101有相似的效果。结论 miR-101通过c-Fos靶点调节非小细胞肺癌细胞的生长,因此调控miR-101和c-Fos可以应用于非小细胞肺癌潜在的分子治疗。; 王海江宋丽霞汪文斐杨争夏照华黄丕来李国保陈培芬关彩艳; 关键词：C-FOS 非小细胞肺癌发病机制

不同中医证型肺结核患者外周血CD14+单核细胞IL-1β、IL-1Ra表达水平的差异被引量：8: 2016年; 目的探讨肺结核患者不同中医证型与CD14+单核细胞白介素-1β(interleukine-1β,IL-1β)、白介素-1受体拮抗剂(interleukine-1 receptor anlagenist,IL-1Ra)表达水平的相关性。方法选取104例肺结核确诊患者为研究对象,其中肺阴亏虚33例,阴虚火旺36例,气阴两虚35例。采集抗凝血并利用密度梯度离心法分离外周血单个核细胞,与CD14+免疫磁珠孵育后获得单核细胞,使用结核杆菌裂解物刺激单核细胞,同时设立空白对照。12小时后收集细胞上清通过酶联免疫吸附法测定IL-1β、IL-1Ra水平,同时裂解细胞提取总RNA,利用实时定量PCR技术测定IL1B、IL1RN基因相对表达量。通过方差分析比较不同证型肺结核患者IL-1β、IL-1Ra表达水平的差异。结果(1)成功建立检测IL1B、IL1RN基因的实时定量PCR技术,靶基因可以被有效扩增,并且引物具有良好特异性;(2)结核菌刺激后IL-1β蛋白表达水平显著升高,其中肺阴亏虚组显著高于阴虚火旺组和气阴两虚组(P<0.05),阴虚火旺组IL-1β分泌水平又显著高于气阴两虚组(P<0.05)。IL-1B mRNA表达趋势与蛋白表达趋势一致,肺阴亏虚、阴虚火旺、气阴两虚三组中IL-1B基因表达水平依次降低,组与组之间差异均有统计学意义(P<0.05、P<0.01);(3)结核菌刺激能够显著增加IL-1Ra分泌水平,气阴两虚组显著高于其它两组(P<0.05),而肺阴亏虚组和阴虚火旺组差异无统计学意义(P>0.05)。同时,在mRNA层面气阴两虚组IL1RN表达水平显著高于其它两组,差异有统计学意义(P<0.05、P<0.01);(4)在结核菌刺激后,IL-1β/IL-1Ra比值在肺阴亏虚和阴虚火旺组中明显增高,显著高于气阴两虚组(P<0.01、P<0.05)。结论 IL-1β、IL-1Ra表达水平与肺结核中医病机演变密切相关,由此推测它们不仅可以作为肺结核中医微观辨证的生物标识,也可以作为未来结核病治疗的有效分子靶点。; 张国良王玲玲詹森林曹廷智汪文斐张红梅邓群益聂广; 关键词：中医证型白介素-1Β 白介素-1受体拮抗剂单核细胞

IL-6R基因单核苷酸多态性与肺结核易感性的相关性研究: 目的：利用高通量飞行时间质谱探讨白细胞介素-6受体(Interleukin-6R，IL-6R)基因多态性与汉族人群肺结核发病的关系。<br>　　方法：采用美国Sequenom公司建立的Massarray平台分...; 汪文斐张国良张明霞邱振刚陈心春; 关键词：肺结核易感性基因频率白细胞介素-6受体

xCT基因rs13120371位点单核苷酸多态性与肺结核易感性的相关性被引量：2: 2018年; 目的通过大样本病例与对照研究明确x CT基因功能性SNP与结核病易感性的相关性,明确其调控结核病发生发展的分子机制。方法从健康对照和结核患者的全血样本中提取基因组DNA,采用TaqMan探针技术对x CT基因rs13120371位点进行基因分型并对基因频率进行关联性分析,结核菌特异性抗原IFN-γ斑点形成细胞的数量和放射影像学分数反应不同基因型与临床指标的相关性,Real-time PCR方法检测健康对照和结核患者外周血单个核细胞中x CT基因及其相关的CXCL1、CXCL2、IL1B基因的表达水平。结果等位基因位点基因频率分布符合Hardy-Weinberg平衡定律(χ~2=0.678,P>0.05),选择的样本具有群体代表性。rs13120371位点的单核苷酸多态性与结核病的易感性相关,其中结核患者组等位基因A的基因频率为70.2%,等位基因G的基因频率为29.8%;健康对照组等位基因A的基因频率为66.8%,等位基因G的基因频率为33.2%,两组之间的等率基因频率差异具有统计学意义(P=0.02,OR=0.86)。AA基因型患者的结核菌特异性刺激分泌的IFN-r斑点形成细胞数量及炎症反应指标明显高于基因型GG的患者,基因型AA的细胞xCT基因的表达水平也明显上调。结论 xCT基因rs13120371位点的单核苷酸多态性与汉族人群结核感染的易感性相关,并且rs13120371位点是功能性SNP,等位基因A可能增加结核菌感染的风险。; 蔡侃儒邱智辉张洁云汪文斐张明霞王召钦; 关键词：肺结核 TAQMAN探针基因分型单核苷酸多态

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汪文斐

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