沈圣
- 作品数：8 被引量：54H指数：4
- 供职机构：四川大学华西公共卫生学院(华西第四医院)更多>>
- 发文基金：四川省科技攻关计划国家质检总局科技计划项目中美新发和再发传染病合作项目更多>>
- 相关领域：医药卫生轻工技术与工程更多>>
- 食品中常见病原菌快速检测系统研究——裸磁珠制备及TaqMan实时荧光PCR快速检测芽胞杆菌Ⅰ群大细胞群
- 目的：建立以磁分离技术为核心的分离系统，摸索制备具有非特异吸附性能的裸磁珠及其包被的条件，为下一阶段免疫磁珠的制备奠定基础。同时建立以蜡样芽胞杆菌为代表的芽胞杆菌I群大细胞群细菌的TaqMan实时荧光PCR快速检测方法，...
- 沈圣
- 关键词：食源性病原菌快速检测系统免疫磁珠
- 文献传递
- TaqMan^(TM)实时荧光PCR快速检测蜡样芽胞杆菌的初步研究被引量：8
- 2006年
- 目的:建立实时荧光TaqM anTM定量检测蜡样芽胞杆菌的快速检测方法,为食品中蜡样芽胞杆菌污染的调查及食物中毒的快速准确定量检测提供手段。方法:通过分析蜡样芽胞杆菌16S rDNA、23S rDNA、16S-23S ITS、gyrB、groEL、cereolysin AB、HBL(hb lA、hb lC、hb lD)、NHE(nheA、nheC、nheD)、bce-T等目的基因,对比所选取的不同目的基因优缺点,最终选择合适的目的基因16S-23S ITS进行同源性分析,并根据GenBank公布的蜡样芽胞杆菌16S-23S ITS基因的保守序列,用引物与探针专业设计软件自行设计引物和TaqM anTM探针,并利用硅胶模型TM基因组DNA提取法制备DNA标准品,通过对TaqM anTM实时荧光PCR退火温度、探针浓度、引物浓度、Mg2+离子浓度、缓冲液浓度及酶用量等反应条件的优化,初步建立蜡样芽胞杆菌的实时荧光TaqM anTM快速定量检测方法,并利用该方法对模拟样品进行检测。结果:选取的16S-23S ITS基因同源性达到99%以上,特异性好;所有蜡样芽胞杆菌均含有两段16S-23S ITS基因,有利于提高反应的灵敏度。通过对各实验条件的优化,得出蜡样芽胞杆菌TaqM anTM实时荧光PCR的最佳反应条件,初步建立起实时荧光TaqM anTM定量检测蜡样芽胞杆菌的快速检测方法,该方法能在3 h左右完成整个检测过程。结论:实时荧光Taq-M anTM定量检测法不但灵敏度好,而且特异性高,检测时间短,能提高蜡样芽胞杆菌的检出率和检测准确性,可望应用于蜡样芽胞杆菌食物中毒的快速准确定量诊断。
- 沈圣余娟滕毅丁晓贝郑萍裴晓方
- 关键词：蜡样芽胞杆菌实时荧光PCR
- 自制裸磁珠对常见食源性致病菌吸附性能的研究被引量：12
- 2006年
- 目的:研究自制裸磁珠对常见食源性致病菌和卫生指示菌的吸附性能,摸索从样品中快速分离和浓集细菌的方法。方法:试验裸磁珠对细菌的吸附性能,摸索温度和样品成分对其吸附性能的影响。结果:自制裸磁珠在37℃对常见食源性致病菌和卫生指示菌有很强的吸附,吸附率均高于97%。食品成分对其吸附有一定影响,吸附率最低为58.42%。结论:自制裸磁珠可望用于环境和食品样品中多种细菌的非特异性吸附分离和浓集,值得进一步研究和推广。
- 邱晋樊学军沈圣孙敏谢志梅腾毅许欣裴晓方
- 关键词：食源性致病菌
- 多重PCR快速检测致泻大肠埃希菌被引量：4
- 2010年
- 大肠埃希菌（Escherichia coli，E．coli）是寄居在人和动物肠道中的正常菌群之一，但其中一些菌株携带毒力基因，具有致病性，能引起人类腹泻，被称为致泻E．coli。根据发病机制、临床特征、流行病学特征、O抗原血清及细菌的毒力测定，可将致泻E．coli分为5类：
- 朱敏冉陆沈圣邱晋张立实裴晓方
- 关键词：致泻大肠埃希菌多重PCRE.COLI流行病学特征正常菌群毒力基因
- 沙门菌检测方法的循证确定被引量：1
- 2006年
- 目的将循证医学的研究方法应用于卫生检验,寻找沙门菌快速检测的最佳方案。方法通过检索多个数据库,全面查找沙门菌检测方法的文献,并对找到的文献进行评估和筛选,找到符合要求的文献确定检测方法。结果从5256篇检索到的文献中,共找到相关Ⅱ级文献4篇,Ⅲ级综述文献1篇用于确定沙门菌快速检测的最佳方案。结论在沙门菌的快速检测中,宜采用以139-141为引物的PCR检测法。
- 沈圣江华洲邱晋许欣裴晓方
- 关键词：沙门菌循证医学聚合酶链反应
- 淋球菌临床分离株外膜蛋白PI基因序列与耐药性关系初探被引量：1
- 2007年
- 目的研究成都地区淋球菌临床分离株PI基因序列与青霉素和四环素耐药性的关系。方法用T-A克隆的方法得到H基因克隆重组子，对PI基因测序后，用序列分析软件进行分析。同时测定青霉素和四环素对淋球菌的最低抑菌浓度，比较耐药性与PI基因序列的相关关系。结果成功克隆并测序淋球菌H基因，17条PI序列根据blastn结果可分为PIA和PIB两类。序列在影响淋球菌耐药性的第120和121位的氨基酸序列仅有部分发生单位点的D突变，未见文献报道的双位点D突变。5-9、6-1两条序列在120位发生K突变，且2株菌的耐药性均处于中等水平，与文献报道一致。结论成都地区淋球菌临床分离株外膜蛋白PI的序列与染色体介导的青霉素和四环素耐药性可能存在一定的相关关系，是否与肼基因序列120和121位氨基酸残基突变相关，还有待调查更多的临床分离株。
- 雍刚汪东篱滕毅沈圣邱晋谢志梅裴晓方
- 关键词：淋球菌耐药性
- 40%四氯化碳大鼠慢性肝损伤模型的研究被引量：27
- 2005年
- 目的 :研究 4 0 %四氯化碳致大鼠慢性肝损伤病理变化过程 ,完善 4 0 %四氯化碳慢性肝损伤的动物模型。方法 :雄性Wistar大鼠 80只 ,随机分为对照组和实验组。对照组每周两次给予溶剂玉米油 ,实验组每周两次给予 4 0 %四氯化碳 ,0 1ml/ 10 0g bw。于实验第 1、 3、 6、 8周染毒 4 8h后将动物处死 ,取肝组织作常规HE、Masson和Retculin染色 ,光镜下观察病理变化。结果 :染毒 1周后 ,中央静脉周围出现较多坏死肝细胞 ,并伴有气球样变和脂肪变性。染毒 3周后 ,气球样变和坏死进一步增多 ,并形成桥接坏死 ,局部网状纤维支架塌陷。染毒 6周后出现肝纤维化。染毒第 8周出现肝硬化。结论 :4 0 %四氯化碳使肝组织严重坏死 ,从而致肝组织第八周就出现明确的肝硬化。
- 杨开选程薇波王文冬沈圣
- 关键词：慢性肝损伤病理变化给药方法
- 食品中常见病原菌快速检测系统研究
- 目的为建立以磁分离技术为核心的分离系统，摸索制备具有非特异吸附性能的裸磁珠及其包被的条件，为下一阶段免疫磁珠的制备奠定基础。同时建立以蜡样芽胞杆菌为代表的芽胞杆菌Ⅰ群大细胞群细菌的TaqMan实时荧光PCR快速检测方法，...
- 沈圣
- 关键词：食源性病原菌蜡样芽胞杆菌实时荧光PCRTAQMAN探针
