王晶
- 作品数：2 被引量：4H指数：1
- 供职机构：上海交通大学医学院附属第三人民医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金上海市宝山区科技发展基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 过表达mimecan对人脐静脉内皮细胞增殖和凋亡的作用初探
- 2014年
- 目的应用反转录病毒载体技术构建稳定过表达mimecan的人脐静脉内皮细胞株(HUVEC),并观察过表达mimecan后HUVEC增殖及凋亡的变化。方法应用反转录病毒载体构建稳定过表达mimecan的HUVEC细胞株,real-time PCR和Western blot法检测mRNA和蛋白水平的表达。应用CCK-8方法检测过表达mimecan后HUVEC增殖的变化,应用AnnexinⅤ-PE染色观察过表达mimecan后HUVEC凋亡的变化。结果构建了稳定过表达mimecan的HUVEC细胞株。过表达mimecan后,HUVEC增殖能力降低,凋亡率增加。结论过表达mimecan抑制HUVEC的增殖,促进其凋亡。
- 王晶沈琼娜张惠洁胡小磊陈凤玲
- 关键词：人脐静脉内皮细胞过表达增殖凋亡
- 小鼠OC-STAMP蛋白表达、纯化、抗体制备及鉴定被引量：4
- 2013年
- 目的 OC-STAMP蛋白是一种功能尚不明确的六次跨膜蛋白,通过制备多克隆抗体来为进一步研究其功能奠定基础。方法采用PCR技术扩增出目的基因,将其克隆到pGEX-4T-1原核表达载体中。经IPTG诱导后,重组质粒pGEX-4T-1/OC-STAMP表达含重组谷胱甘肽转移酶(GST)的融合蛋白GST-OC-STAMP。GST-OC-STAMP融合蛋白经纯化后免疫新西兰大白兔,制备多克隆抗体。此后应用ELISA及Westernblot方法鉴定该抗体。结果 pGEX-4T-1/OC-STAMP重组质粒构建成功,并通过原核表达获得达到免疫要求的融合蛋白。免疫所得抗体血清经间接ELISA法、Westernblot检测,确定获得了高效价的小鼠OC-STAMP多克隆抗体。结论成功制备了小鼠OC-STAMP抗体,为进一步研究基因功能奠定了基础。
- 胡其娴马晓文胡小磊沈琼娜王晶陈凤玲
- 关键词：GST融合蛋白多克隆抗体
