蒋治武
- 作品数:8 被引量:10H指数:2
- 供职机构:汕头大学医学院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金国家教育部博士点基金广东省自然科学基金更多>>
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- 流感病毒诱导小鼠胶质细胞的细胞因子级联反应
- 目的:探讨流感病毒感染星形胶质细胞后释放的细胞因子是否会诱导正常胶质细胞趋化因子及促炎细胞因子转录水平的变化,从而产生细胞因子级联效应。方法:从新生小鼠大脑皮质分离培养神经胶质细胞,并进一步纯化星形胶质细胞,经纯度鉴定后...
- 周健祥王革非蒋治武曾俊苏芸李康生
- 关键词:星形胶质细胞小胶质细胞流感病毒
- 文献传递
- LPS预激神经胶质细胞培养上清对神经元的影响
- 2012年
- 目的探讨神经胶质细胞经过脂多糖(Lipopolyssacride,LPS)预激后,其培养上清对神经元功能的影响。方法体外培养神经元与神经胶质细胞,免疫荧光法进行纯度鉴定。神经胶质细胞分为4组:未刺激对照组、0.01μg/ml LPS单次刺激组、1μg/ml LPS单次刺激组、预刺激组(先采用0.01μg/ml LPS刺激18h后,再用1μg/mlLPS刺激24h)。经过相应处理后收获各组条件培养上清,分别加入到神经元中,与神经元共同孵育24h后收集细胞与培养上清。采用CCK-8试剂盒与ELISA法检测神经元的存活率和分泌TNF-α、IL-6水平。结果星形胶质细胞预刺激组条件培养上清作用于神经元后,细胞存活率下降,与0.01μg/ml、1μg/ml LPS单次刺激组比差异均具有统计学意义(P<0.05);小胶质细胞各组条件培养上清作用于神经元后,细胞存活率变化不明显(P均>0.05);在星形胶质细胞各刺激组上清作用下,神经元产生TNF-α的水平,各LPS处理组培养上清刺激下水平升高,其中1μg/ml LPS单次刺激组升高明显,与对照组和0.01μg/ml LPS单次刺激组比差异具有统计学意义(P均<0.05);产生IL-6的水平亦升高,与对照组比亦均具有统计学差异(P<0.05或P<0.01);并且,预刺激组较1μg/mlLPS单次刺激组上清作用后,产生IL-6水平较低(P<0.05)。各组小胶质细胞条件培养上清作用于神经元后,产生TNF-α的水平,预刺激组水平升高明显,与对照组比差异具有统计学意义(P<0.01);对于IL-6水平,变化趋势同TNF-α,但各组间差异无统计学意义(P>0.0.5)。结论 LPS预激参与重新调配了神经胶质细胞分泌活性介质的作用,培养上清中这些分子相互制约或是协同,对神经元产生有可能是保护或是损伤效应。
- 谢泽锋苏芸蒋治武许燕璇辛岗李康生
- 关键词:神经元脂多糖神经胶质细胞
- 流感病毒感染星型胶质细胞条件上清对正常胶质细胞的免疫生物学影响
- 本研究从新生小鼠大脑皮质分离培养神经胶质细胞,并进一步纯化星形胶质细胞和小胶质细胞,经纯度鉴定后,用感染复数为2的流感病毒H1N1和H3N2进行体外感染星型胶质细胞,分别于感染后6小时和24小时收获感染的条件培养上清,并...
- 周健祥王革非蒋治武曾俊苏芸李康生
- 关键词:流感病毒胶质细胞免疫生物学
- 文献传递
- 流感病毒感染神经胶质细胞条件培养上清对星形胶质细胞的免疫生物学影响被引量:2
- 2015年
- 目的利用人流感病毒H1N1和H3N2感染小鼠星形胶质细胞获得条件培养上清刺激正常星形胶质细胞,研究人流感病毒感染星形胶质细胞后释放的细胞因子,是否会诱导正常胶质细胞的免疫病理学变化。方法从新生小鼠大脑皮质分离纯化星形胶质细胞,经纯度鉴定后,用人流感病毒H1N1和H3N2体外感染,分别于感染早期(6 h)和感染中晚期(24 h)收获条件培养上清,刺激正常星形胶质细胞,CCK-8法检测细胞存活率,Western blotting法检测星形胶质细胞胶质纤维酸性蛋白(GFAP)表达状况,ELISA法检测细胞不同时间分泌的炎症因子TNF-α、IL-1β、IL-6水平变化。结果流感病毒感染星形胶质细胞的条件培养上清,可显著抑制正常胶质细胞的活性,诱导GFAP蛋白表达的上调,而炎症因子TNF-α、IL-1β、IL-6在不同时间点的蛋白表达水平发生不同程度改变,总体呈下降趋势。结论体外实验中,人流感病毒感染星形胶质细胞后释放的细胞因子会诱导正常胶质细胞发生较为明显的免疫病理学变化,但未见明显的细胞因子级联现象。
- 王革非李蕊周健祥蒋治武代剑平李康生
- 关键词:星形胶质细胞流感病毒
- 甲型流感病毒感染小鼠神经元及胶质细胞的免疫生物学效应
- 研究目的和意义: 流感病毒为分节段,有包膜负链RNA病毒,主要感染呼吸道上皮细胞,从而引起流感症状。与典型的嗜神经性病毒相比,流感病毒有时在流感相关脑病病人与流感病毒感染动物模型的大脑组织中被检测到。神经元为终末分化细...
- 蒋治武
- 关键词:甲型流感病毒神经元胶质细胞病理损伤
- 文献传递
- 流感病毒感染小鼠星形胶质细胞诱导GDNF转录水平上调被引量:1
- 2012年
- 目的探讨星形胶质细胞感染流感病毒后的神经保护效应,检测流感病毒H3N2和H9N2体外感染小鼠星形胶质细胞是否会诱导胶质细胞神经营养因子转录水平的改变。方法从新生小鼠大脑皮质分离培养神经胶质细胞,并进一步纯化星形胶质细胞,经纯度鉴定后,用感染复数为2的流感病毒H3N2和H9N2进行体外感染。在感染早期(6h)和感染中后期(24h)分别提取细胞RNA,real-time PCR检测神经营养因子转录水平的变化。结果病毒感染后的星形胶质细胞显著上调GDNF转录水平的表达,NGF,BDNF,NT-3转录水平变化不明显。H3N2和H9N2感染星形胶质细胞表达的细胞因子变化情况一致。结论流感病毒H3N2和H9N2感染星形胶质细胞可诱导神经营养因子GDNF转录水平的上调。
- 蒋治武王革非周健祥陈小璇许燕璇苏芸李康生
- 关键词:流感病毒神经营养因子GDNF
- 流感病毒在神经元细胞中的感染与复制研究被引量:1
- 2015年
- 目的:研究流感病毒在体外对神经元的感染及活性影响,检测流感病毒在神经元内的复制效率。方法:原代培养小鼠神经元细胞,β-tubulin III抗体进行免疫荧光鉴定小鼠神经元纯度,流感病毒吸附、培养;荧光定量PCR检测神经元内病毒载量;CCK-8检测流感病毒对神经元活性的影响。结果:免疫荧光结果表明,神经元纯度大于95%。CCK-8检测结果显示,流感病毒对神经元感染可显著抑制神经元细胞活性。荧光定量PCR结果表明,流感病毒可感染神经元并在其细胞内进行病毒复制。结论:流感病毒可在体外感染小鼠原代神经元进行病毒复制,并影响神经元活性。
- 王革非蒋治武李康生
- 关键词:流感病毒神经元
- 流感病毒诱导小鼠胶质细胞的细胞因子级联反应被引量:6
- 2012年
- 目的:探讨流感病毒感染星形胶质细胞后释放的细胞因子是否会诱导正常胶质细胞趋化因子及促炎细胞因子转录水平的变化,从而产生细胞因子级联效应。方法:从新生小鼠大脑皮质分离培养神经胶质细胞,并进一步纯化星形胶质细胞,经纯度鉴定后,用感染复数为2的流感病毒H1N1和H3N2进行体外感染星形胶质细胞,分别于6小时和24小时收获上清,采用超滤分子截留的方法,去除流感病毒颗粒。用不同时间点的条件上清,分别刺激星形胶质细胞和小胶质细胞,24小时后提取RNA并进行反转录,利用Real-Time PCR检测促炎因子TNF-α、IL-1β、IL-6,趋化因子IP-10、MCP-1、MIP-1转录水平的变化。结果:不同时间点的条件上清皆可诱导正常胶质细胞的促炎症因子TNF-α、IL-1β、IL-6和趋化因子IP-10、MCP-1、MIP-1的转录水平发生不同程度的上调,产生细胞因子级联效应。结论:流感病毒H1N1和H3N2感染星形胶质细胞后所引起的细胞因子风暴,可诱导正常胶质细胞的细胞因子转录水平显著上调,引发细胞因子级联反应,其可能与流感病毒感染中枢神经系统所引发的细胞因子风暴及免疫病理损伤存在一定关系。
- 周健祥王革非蒋治武曾俊苏芸李康生
- 关键词:星形胶质细胞小胶质细胞流感病毒