谢光蓉
- 作品数：10 被引量：16H指数：3
- 供职机构：中国药科大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金四川省自然科学基金更多>>
- 相关领域：轻工技术与工程化学工程医药卫生生物学更多>>
- 人尿酸氧化酶进化机制研究被引量：2
- 2014年
- 尿酸氧化酶(尿酸酶;EC1.7.3.3;UOX)是一种在嘌呤代谢途径中催化尿酸氧化生成尿囊素的酶。在灵长类动物漫长的进化过程中,人科动物尿酸氧化酶基因因突变失活,成为假基因。通过来源于10种不同生物尿酸氧化酶蛋白质序列比对,鉴别出发生在人科动物的共同祖先的尿酸氧化酶基因上的3个能够引起尿酸分解活性降低甚至丧失的初级突变位点以及发生在人尿酸氧化酶基因上的12个次级突变位点,同时运用定点突变技术对发生在人科动物共同祖先尿酸氧化酶基因上的初级突变位点进行了验证研究。根据这15个突变位点在人科动物尿酸氧化酶基因上出现的频率和灵长类动物的物种进化分支树,判断出上述突变位点在人尿酸氧化酶基因上发生的先后顺序,最终阐明了人尿酸氧化酶的进化轨迹。
- 谢光蓉赵百学王旻陈建华
- 关键词：假基因定点突变技术
- 具有催化活性的人猪嵌合尿酸氧化酶
- 本发明涉及具有催化活性的人猪嵌合尿酸氧化酶，编码它们的DNA序列，含有该DNA序列的表达载体，含有该表达载体的宿主细胞，以及采用该宿主细胞制备人猪嵌合尿酸氧化酶的方法。该人猪嵌合尿酸氧化酶的序列是将SEQ ID NO：1...
- 陈建华谢光蓉李苗苗
- 曲酸生产菌的复合诱变选育被引量：3
- 2013年
- 以生产菌株米曲霉(Aspergillus oryzae)w-56为出发菌株,经2次紫外线、2次60Co多重复合诱变处理,选育获得曲酸生产菌UR28,生产发酵周期由原来的130h缩短至65h,曲酸产量由原来的36g/L,提高到68g/L,比出发菌株提高了88.9%。实验证明采用复合诱变,能有效改变菌株对诱变因素的敏感性,提高突变率,逐步提高突变株的产酸水平。
- 谢光蓉
- 关键词：曲酸复合诱变紫外线诱变突变株
- 具有催化活性的人源尿酸氧化酶
- 本发明涉及一系列具有催化活性的人源尿酸氧化酶，编码它们的DNA序列，含有该DNA序列的表达载体，以及含有该表达载体的宿主细胞。该人源尿酸氧化酶具有以SEQ ID NO:17为基础进行具体位点氨基酸残基替换、或者进行外显子...
- 陈建华谢光蓉赵百学
- 重组枯草芽孢杆菌α-淀粉酶基因工程菌构建与表达被引量：5
- 2012年
- 根据GenBank枯草芽孢杆菌α-淀粉酶基因序列设计引物,以枯草芽孢杆菌基因组为模板,PCR克隆α-淀粉酶基因(amy),将α-淀粉酶基因插入穿梭表达载体pP43C,构建重组质粒pP43Camy。随后将重组质粒转化八种蛋白酶缺陷的宿主枯草芽孢杆菌WB800,经筛选获得重组枯草芽孢杆菌α-淀粉酶基因工程菌WB800/pP43Camy1026,工程菌摇瓶发酵酶活力达960U。性质研究表明,重组α-淀粉酶的最适作用温度为70℃,最适反应pH为6.0,具有良好的应用潜力。
- 谢光蓉乔代蓉曹毅
- 关键词：Α-淀粉酶枯草芽孢杆菌基因克隆基因表达
- 具有催化活性的人猪嵌合尿酸氧化酶
- 本发明涉及具有催化活性的人猪嵌合尿酸氧化酶，编码它们的DNA序列，含有该DNA序列的表达载体，含有该表达载体的宿主细胞，以及采用该宿主细胞制备人猪嵌合尿酸氧化酶的方法。该人猪嵌合尿酸氧化酶的序列是将SEQ ID NO：1...
- 陈建华谢光蓉李苗苗
- 文献传递
- HPLC检测发酵液中二羟基丙酮和甘油的含量被引量：3
- 2013年
- 应用高效液相色谱法检测发酵过程中发酵产物二羟基丙酮和底物甘油浓度。在流动相乙腈、纯净水的比例为85∶15(v∶v),流速为1mL/min,色谱柱为Hedera-NH2的条件下,用紫外检测器在271nm处检测DHA,用示差折光检测器检测甘油。高效液相色谱法检测DHA的线性范围为2.0-12.0mg/mL,相关系数(r)为0.9996,检测甘油的线性范围为0.1-1.0mg/mL,相关系数(r)为0.9998。该方法应用于二羟基丙酮发酵过程中底物和产物的检测,该方法不受培养基中不同碳源(葡萄糖、蔗糖、山梨醇、乳糖、甘油),不同氮源(蛋白胨、酵母膏、酵母粉、营养肉汤)以及菌体未完全利用的培养基成分、菌体生长过程中产生的其它代谢产物的影响,该方法具有较好的通用性。
- 谢光蓉
- 关键词：高效液相色谱法二羟基丙酮甘油
- 重组枯草芽孢杆菌猪尿酸氧化酶基因工程菌的构建和分泌表达被引量：1
- 2012年
- 目的构建重组枯草芽孢杆菌猪尿酸氧化酶基因工程菌及其目的蛋白的分泌表达,并对其酶活性进行测定。方法从pET-22b/pUOX重组质粒上PCR获得pUOX基因,然后通过重叠延伸PCR技术将pUOX与一段nprB信号肽基因相连,导入穿梭载体pP43X,构建重组载体pP43X/pUOX,运用化学转化法转化枯草芽孢杆菌WB800中。结果发酵表达后胞外分泌液经SDS-PAGE检测,在约34kD处有一清晰蛋白条带,这与预期分子量一致。发酵液中该重组蛋白的酶活力达2.322U/ml。结论成功构建重组枯草芽孢杆菌猪尿酸氧化酶基因工程菌,目的蛋白分泌表达并具有较高活性。
- 李辉陈思马娇颖戴君谢光蓉陈建华
- 关键词：芽孢杆菌尿酸氧化酶高尿酸血症分泌表达
- 具有催化活性的人源尿酸氧化酶
- 本发明涉及一系列具有催化活性的人源尿酸氧化酶，编码它们的DNA序列，含有该DNA序列的表达载体，以及含有该表达载体的宿主细胞。该人源尿酸氧化酶具有以SEQ ID NO:17为基础进行具体位点氨基酸残基替换、或者进行外显子...
- 陈建华谢光蓉赵百学
- 文献传递
- HPLC法测定猪尿酸酶活性被引量：2
- 2012年
- 建立了一种测定重组猪尿酸酶活性的高效液相色谱方法。将重组猪尿酸酶基因工程菌的粗酶液与尿酸溶液反应5min,加入高氯酸溶液终止,经超滤后以体系中尿酸浓度的降低值为指标,采用HPLC法[色谱条件:AgilentZorbax 300SB-C18色谱柱、流动相为磷酸-甲醇-双蒸水(3∶25∶472,体积比)、流速1.0mL·min-1、波长292nm]测定粗酶液活性。结果表明,尿酸在10～500μmol·L-1范围内线性关系良好,样品回收率在99%～104%之间。该方法不受杂质干扰、稳定、灵敏度高,适用于尿酸酶粗酶液活性的检测。
- 陈思李辉马娇颖谢光蓉陈建华
- 关键词：基因工程菌尿酸酶酶活性高效液相色谱
