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排序方式：

人血小板内皮舒张因子合酶互补脱氧核糖核酸克隆: 1996年; 目的：建立人血小板互补脱氧核糖核酸（ｃＤＮＡ）文库，筛选出血小板内皮舒张因子合酶（ＮＯＳ）ｃＤ－ＮＡ克隆。方法：用新鲜血小板悬液纯化血小板，提取总核糖核酸（ＲＮＡ），以ＲＮＡ为模板合成ｃＤＮＡ，将ｃＤＮＡ连接λｇｔ１１臂，用噬菌体包装蛋白包装，然后转染宿主菌Ｙ１０９０建库。用地高辛标记探针进行杂交，挑出阳性克隆，扩增后纯化脱氧核糖核酸（ＤＮＡ）。将重组ＤＮＡ用ＥｃｏＲＩ酶解，电泳，并将插入片段切下，纯化得到内皮舒张因子合酶ｃＤＮＡ。结果：从血小板中获得ＲＮＡ约１．５ｍｇ，ＲＮＡ变性电泳可见较清晰的１８Ｓ和２８Ｓ条带且无ＲＮＡ降解。第一条ｃＤＮＡ链产量为１．８２μｇ，第二条链为３．７９μｇ，放射性自显影显示双链ｃＤＮＡ分子大小范围在０．５～５．０ｋｂ，大部分位于１．０～４．０ｋｂ之间。人血小板内皮舒张因子合酶ｃＤＮＡ克隆约３．０ｋｂ左右。结论：人血小板内皮舒张因子合酶ｃＤＮＡ克隆约３．０ｋｂ，与其它组织的相似。; 王华梁龚兰生孔宪涛蔡伟箐于金德戚文航吴春芳王海英赵函芳陈诗书程枫王亚新卢健; 关键词：血小板内皮舒张因子合酶 DNA 克隆

人血小板cDNA文库的建立被引量：4: 1996年; 为建立人血小板ｃＤＮＡ文库，作者用人新鲜血小板悬液纯化血小板，加入变性液作匀浆，经苯酚、氯仿、异丙醇等抽提ＲＮＡ，以所得ＲＮＡ为模板合成ｃＤＮＡ，并将其连接λｇｔ１１臂，用噬菌体包装蛋白“包装”，再进行连续稀释，然后将不同稀释度的噬菌体转染宿主菌Ｙ１０９０。结果：从纯化血小板２．８×１０１２中获得约１．５ｍｇＲＮＡ，其Ａ（吸光度，曾称光密度ＯＤ）２６０ｎｍ／Ａ２８０ｎｍ为１．７２１，ＲＮＡ变性电泳可见１８ｓ和２８ｓ条带，且无ＲＮＡ降解。由该ＲＮＡ合成的第一条ｃＤＮＡ链产量为１．８２μｇ，第二条ｃＤＮＡ链产量为３．７９μｇ，放射自显影显示双链ｃＤＮＡ分子大小范围在０．５～５．０ｋｂ，大部分位于１．０～４．０ｋｂ之间。基因库效价为：总效价１．５２×１０８，重组子效价１．３８×１０８，重组百分比８３．１％；克隆效率６．９０×１０８。; 王华梁龚兰生孔宪涛蔡伟箐于金德戚文航吴春芳王海英赵函芳陈诗书程枫王亚新卢健; 关键词：血小板 CDNA 基因库

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赵函芳