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山羊痘病毒A6L基因的克隆及序列分析被引量：2: 2015年; 为了分析山羊痘病毒A6蛋白的分子特征,本试验提取了山羊痘病毒古浪分离株的基因组DNA,设计引物进行PCR扩增,克隆A6L基因的DNA序列。将PCR产物连接到pGEM-T Easy载体后转化至大肠杆菌DH5α感受态细胞,筛选阳性克隆进行序列测定,利用生物信息学软件对A6L基因序列进行预测分析。结果显示,A6L基因序列含有1个由1 128个核苷酸组成的开放阅读框,编码375个氨基酸残基组成的多肽,蛋白质分子质量的理论值为43.68ku,理论等电点为7.50。该蛋白的二级结构中,α螺旋占53.30%,β折叠占10.24%,其余39.46%为无规则卷曲。多序列比对分析结果显示,不同羊痘病毒分离株A6L序列高度保守,同源性在97%以上。上述研究结果为进一步研究A6蛋白的生物学功能和羊痘病毒早期蛋白的分子相互作用奠定了基础。; 赵银龙吴国华朱海霞吴健颜新敏赵志荀李健吴娜穆晓峰张强; 关键词：山羊痘病毒基因克隆

靶向抑制羊痘病毒ORF095基因的siRNA序列: 本发明公开四个靶向抑制羊痘病毒ORF095基因的siRNA序列，以及这个序列的用途。本发明的四个靶向抑制羊痘病毒ORF095基因的序列分别是基因序列为SEQ.NO.1的siRNA-61，基因序列为SEQ.NO.2的siR...; 张强赵志荀吴国华颜新敏李健朱海霞崔立凡高顺平才学鹏; 文献传递

山羊痘病毒ORF014蛋白的结构预测及其真核表达被引量：1: 2014年; 以山羊痘病毒古浪株基因组DNA为模板,经PCR扩增,获得山羊痘病毒ORF014基因,将其克隆至真核表达载体pcDNA3.1(-)/Myc-His(-)B,通过脂质体法将重组质粒转入Vero细胞,Western-blot分析目的基因表达情况。使用WabLab、SWISS-MODEL和ExPASY等在线软件预测GTPV014蛋白的功能结构域和二、三级结构以及氨基酸组成,对其作为凋亡抑制蛋白的真实性、可靠性做出理论上的判断。结果显示,重组表达载体可以在Vero细胞中表达出大小约为20ku的重组融合蛋白,该蛋白具有与黏液瘤病毒M11L蛋白相似的一些结构特征。上述结果为GTPV014蛋白在山羊痘病毒感染过程中抑制凋亡的研究提供了一些理论依据。; 卢昌吴国华颜新敏赵志荀王曼吴娜朱海霞李健张强; 关键词：山羊痘病毒真核表达

山羊痘病毒A11R基因的克隆及生物信息学分析: 2016年; 为了分析绵羊痘病毒A11R蛋白质的分子特征,提取了山羊痘病毒古浪分离株(GL)的基因组DNA,设计引物进行PCR扩增,将PCR产物连接到p GEM-T Easy载体后转化至大肠杆菌DH5α感受态细胞,筛选阳性克隆进行序列测定,利用生物信息学软件对A11R基因序列进行预测分析。结果显示,A11R基因序列由954个核苷酸组成的开放阅读框,编码317个氨基酸残基组成的多肽,蛋白质分子质量的理论值为36 091.7,理论等电点为5.14。A11R蛋白质的二级结构中,α螺旋占29.02%,β折叠占10.41%,其余60.57%为无规则卷曲。多序列比对分析显示,不同羊痘病毒分离株A11R序列高度保守,同源性在98%以上。进化树分析结果显示,GL株与NK株、TU株以及SA株在一个分支,说明它们之间具有较近的亲缘关系,上述研究结果为进一步研究A11R蛋白质的生物学功能和羊痘病毒早期蛋白质分子间相互作用奠定了基础。; 吴健朱海霞赵志荀颜新敏赵银龙吴娜李健张志东张强李影吴国华; 关键词：羊痘病毒基因克隆生物信息学

抗羊痘病毒K3L蛋白的单克隆抗体及其应用: 本发明公开一株杂交瘤细胞株K3L25，其在中国典型培养物保藏中心的保藏编号为CCTCC No：C2015222。本发明的杂交瘤细胞株K3L25及所分泌的单克隆抗体表现出良好的免疫原性，可在制备早期诊断试剂或早期检测羊痘病...; 赵志荀朱学亮张强张志东吴国华颜新敏李健朱海霞吴娜; 文献传递

一种敲降HS3ST5基因的sgRNA及其敲降载体和应用: 本发明提供了一种敲降HS3ST5基因的sgRNA及其敲降载体和应用，本发明属于基因敲除技术领域。本发明利用靶向HS3ST5基因的sgRNA构建敲降HS3ST5的重组载体，经过慢病毒包装后，感染BHK‑21细胞系，得到敲降...; 袁红白兴文卢曾军黄磊宫晓华刘在新孙普李平花包慧芳李冬马雪青陈应理曹轶梅付元芳赵志荀张婧王健

蛋白质互作研究技术被引量：2: 2016年; 蛋白质在生物体的机制中是必不可少的,担任着生物系统内启动以及执行的任务。生物体的每一个生物过程,从遗传物质复制到细胞衰老与死亡,依赖于几种甚至几百种蛋白质之间的功能协调。蛋白质的功能,结构的改变会破坏这种平衡,导致疾病的发生,通常这种情况是由于蛋白间的相互作用引起的。目前有很多蛋白质的结构功能是未知的,所以蛋白质组学发展的也尤为迅速。论文主要综述了双向电泳、噬菌体展示技术、GST pull-down、酵母双杂交、串联亲和纯化、双分子荧光互补技术、蛋白质芯片、Far Western blot、免疫共沉淀9个蛋白质组学相关研究技术,并简单介绍了近几年这些技术在生物学中的应用。; 吴健朱海霞赵志荀颜新敏赵银龙吴娜李健张志东张强李影吴国华; 关键词：蛋白质相互作用生物信息学

一种水疱性病检测试剂盒: 本发明公开一种可同时用于口蹄疫（A型、O型和Asia 1型）、猪水泡病和水疱性口炎检测的引物、由这些引物构成的试剂盒和制备方法，以及这种试剂盒非疾病诊断目的的使用方法。本发明的用于检测口蹄疫A型、O型和Asia 1型病毒...; 张强卢昌赵志荀吴国华颜新敏李应国岳华周晓黎李健朱海霞代雪玲田波芦晓立高顺平王曼; 文献传递

山羊痘病毒感染绵羊的诊断及其p32基因的分子分析被引量：7: 2011年; 采用细胞培养方法从发生羊痘的绵羊肺组织中分离到1株山羊痘病毒GPV/GSgulang/09,对分离株的p32基因进行了PCR-RFLP和序列比对分析。结果显示,GPV/GSgulang/09株p32基因的扩增产物被HinfⅠ酶切后出现山羊痘病毒(GPV)特征性的2条带;p32基因序列第166～168位缺失绵羊痘病毒(SPV)中编码天冬氨酸的3个碱基,与GenBank中其他SPV毒株的同源性为98.1%～98.3%,与GPV毒株的同源性达99.2%～99.9%,且在系统发生树上与GPV位于同一进化分支。结果表明,这是一起GPV感染绵羊的临床病例,为我国羊痘的流行病学研究提供了新的资料。; 颜新敏吴国华李健朱海霞赵志荀崔力凡朱彩珠张强; 关键词：山羊痘病毒绵羊 P32基因

一种用于保存反刍动物食道-咽部分泌物的药物组合物: 本发明公开一种用于保存动反刍动物食道‑咽部分泌物（O‑P液）药物。本发明的合物包括：磷酸二氢钾0.08g～0.24g、磷酸氢二钠、0.46g～1.44g、氯化钠2.7g～8.0g、氯化钾、0.05g～0.2g，和酚红0....; 张强赵志荀卢增军吴国华马维民何继军孙普李冬刘在新

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赵志荀