邓敏
- 作品数:39 被引量:269H指数:10
- 供职机构:中山大学更多>>
- 发文基金:广东省自然科学基金国家自然科学基金国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域:农业科学文化科学生物学政治法律更多>>
- 鳜鱼传染性脾肾坏死病毒基因诊断试剂盒及检测方法
- 本发明提供一种鳜鱼传染性脾肾坏死病毒(ISKNV,Infectious Spleen and Kidney Necrosis Virus)的基因诊断试剂盒及检测方法。该试剂盒及检测方法是以根据鳜鱼传染性脾肾坏死病毒基因保...
- 何建国邓敏翁少萍黄志坚吕玲
- 文献传递
- 鳜传染性脾肾坏死病毒的纯化和酶切分析被引量:11
- 2001年
- 鳜传染性脾肾坏死病毒(ISKNV)是近年来危害广东地区鳜养殖业的主要病原。本文用回接感染健康鳜获得病毒原料,分离纯化了大量高纯度的ISKNV病毒粒子,电镜下可见病毒粒子为二十面体,直径平均为150nm。抽提病毒核酸,对其基因组DNA进行酶切分析,病毒基因组为双链DNA分子,表现脊椎动物虹彩病毒基因组的特点即其胞嘧啶5’端高度甲基化。以限制性内切酶EcoRI、BamHI、HindIII、KpnI和PstI酶切ISKNV基因组DNA,经电泳分离后,分别得到1、8、9、18、22条清晰的酶切片段,并根据酶切片段算得基因组的大小超过108.7kbp。
- 邓敏何建国翁少萍曾征龙綮新
- 关键词:鳜鱼传染性脾肾坏死病毒纯化酶切分析
- 鳜传染性脾肾坏死病毒ICR489基因序列分析被引量:3
- 2002年
- 报道了鳜鱼传染性脾肾坏死病毒 (ISKNV)的ICR489基因结构及其序列分析。对ISKNVDNAKpnⅠB酶切片段的序列分析结果发现该序列中含有完整的ICR489基因。ISKNVICR489基因完整读码框为 10 11bp ,GC含量为 5 6 97% ,等电点为 6 82 ,编码一个长为 337aa、相对分子质量为 382 70的推定蛋白。结构分析发现该基因起始密码子上游具有启动子元件TATAbox,有反向重复序列可形成茎环 ,并有一段回文序列。ISKNV与其它 3种虹彩病毒 (FV3、RRV和LCDV_1)的ICR489基因氨基酸序列具有一定的同源性 ,但ISKNV与它们的同源性不高 。
- 邓敏何建国翁少萍吕玲何华虹
- 关键词:虹彩病毒传染性脾肾坏死病毒系统进化鳜鱼基因结构
- 蛙病毒核糖核酸酶Ⅲ基因结构及其序列分析被引量:1
- 2002年
- 对蛙病毒 (TFV)核糖核酸酶Ⅲ基因序列进行分析。TFV基因组中含有完整的核糖核酸酶Ⅲ基因序列 ,全长为 1113bp ,GC含量为 5 6 .6 3%。其推定蛋白质的分子量为 4 0 .4 7kD ,等电点为7.99。序列结构分析发现在编码区的下游有可形成茎环的反向重复序列和形成发夹结构的回文序列。与其它物种相比 ,TFV与虹彩病毒的LCDV 1和CIV的核糖核酸酶Ⅲ基因的氨基酸序列同源性较高 ,与酵母。
- 吕玲何建国何华虹邓敏翁少萍王晓红
- 关键词:基因结构
- 鳜鱼传染性脾肾坏死病毒的胞嘧啶5-甲基转移酶基因结构及其序列分析被引量:12
- 2001年
- 对鳜鱼传染性脾肾坏死病毒 (infectiousspleenandkidneynecrosisvirus,ISKNV)的胞嘧啶 5 -甲基转移酶(MTase)基因的结构及序列进行了分析。序列比较分析表明 ,ISKNVMTase编码区全长 6 84bp ,编码长 2 2 7个氨基酸的蛋白质 ,推测分子量为 2 5 85 5D。与一些细菌的MTase比较 ,ISKNVMTase也含有负责转移甲基的 4个保守区 ,但缺乏识别靶序列的保守区。比较ISKNV与其它 6种脊椎动物虹彩病毒的MTase序列并建立系统树 ,ISKNV显著不同于蛙病毒属和淋巴囊肿病毒属。 7种脊椎动物虹彩病毒MTase具有高度保守区 ,可以此设计引物用PCR方法鉴定脊椎动物虹彩病毒。
- 何华虹邓敏何建国翁少萍
- 关键词:鳜鱼传染性脾肾坏死病毒基因结构
- 1个白斑综合症病毒基因的克隆及其在大肠杆菌M15中的表达被引量:3
- 2003年
- 根据对虾白斑综合症病毒(whitespotsyndromevirus,WSSV)1个可能编码蛋白的开放读码框(openreadingframe,ORF)的序列(WSSVA基因),结合pQE30载体的多克隆位点,设计1对引物进行PCR,扩增出大小为0.28kb的A基因片段。把目的片段克隆到pGEM-TEasy载体上,构建出重组质粒pGT-A,再用引物两端酶酶切出目的片段,并按正确的读码框顺序插入到pQE30表达载体上的乳糖操纵子中,构建出带有目的片段的重组质粒pQE30-A,然后将重组质粒转化大肠杆菌M15细胞,经IPTG诱导,SDS-PAGE和Westernblot显示有与A基因预期大小11kD相吻合的融合蛋白带。结果表明,来源于WSSV的这一ORF是1个可表达的基因。
- 江世贵何建国张欣强邓敏余建秀
- 关键词:白斑综合症基因克隆白斑综合症病毒融合蛋白基因表达对虾
- 白斑综合症杆状病毒的感染途径和宿主种类被引量:125
- 1999年
- 利用生物检测、PCR、组织病理和电镜技术,通过投喂和浸泡感染方式,结果表明口和消化道是斑节对虾感染白斑综合症杆状病毒(WSBV)的主要途径;宿主经口摄食携带WSBV媒介生物是WSBV传播的主要途径;确定了21种较大型的WSBV宿主种类,其中以虾蟹为主;
- 何建国周化民姚伯杨晓明邓敏
- 关键词:白斑综合症杆状病毒宿主对虾WSBV
- 对虾白斑综合症病毒基因诊断试剂盒及检测方法
- 本发明提供一种对虾白斑综合症病毒(WSSV,White Spot Syndrome Virus)的基因诊断试剂盒及检测方法。该试剂盒及检测方法是以根据白斑综合症病毒基因保守区序列设计的两对引物为主体而设计的。本发明采用聚...
- 何建国邓敏黄志坚吕玲翁少萍
- 文献传递
- 斑节对虾白斑综合症杆状病毒检测方法及其应用被引量:9
- 1996年
- 对白斑和红体带白斑斑节对虾光镜和电镜观察,对虾白斑综合症杆状病毒(WSBV)感染外胚层和中胚层组织器官.应用WSBVPCR检测技术证实一种WSBV感染鳃、甲壳表皮、神经和肌肉,在肝胰腺、消化管(含胃)、心脏和血液中未检测到,其结果与组织学观察有出入.PCR检测WSBV最佳取材部位是对虾甲壳表皮和肌肉.PCR方法可应用于WSBV的提纯,实验用健康虾的筛选,实验感染WSBV的跟踪,以及流行病学研究.通过PCR方法和电镜观察结合证实红体病斑节对虾(不带白斑者)不是WSBV所致,修正了前人的观点.
- 何建国邓敏龙綮新
- 关键词:白斑综合症杆状病毒多聚酶链式反应
- 斑节对虾白斑病病原与病理被引量:14
- 1996年
- 斑节对虾白斑病是白斑综合症杯状病毒所致,根据病毒形态结构大小和寄生部位分为3个种株,2个种株为细胞核杆状病毒,1个种株为细胞质杯状病毒.细胞核杆状病毒第1种类型其完整病毒粒子为杆状纺锤形,偶见双粒包埋病毒粒子;细胞核杆状病毒第2种类型其完整病毒粒子为杆状细长形,两端钝圆.细胞质杆状病毒在宿主细胞质中复制、装配和成熟,多数为细长形,一端较细,另一端较粗.白斑综合症杆状病毒对外胚层和中胚层来源的组织器官造成广泛性的坏死,尤以鳃、甲壳表皮和造血组织为甚.
- 何建国翁少萍邓敏王晓红
- 关键词:斑节对虾白斑病杆状病毒