郑东
- 作品数：28 被引量：110H指数：6
- 供职机构：华中科技大学同济医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金湖北省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 计算机3D建模在个体化寰枢椎椎弓根钉最佳进钉方式的研究被引量：2
- 2015年
- 目的利用3D建模技术设计寰、枢椎椎弓根钉手术模拟系统,为迅速模拟置钉安全区、置钉方案及统一术前设计操作标准。方法从本院PACS系统14例健康成人（男7例,女7例;年龄30~68岁,平均45岁）的寰枢椎CT连续断层扫描数据导入Mimics 10.01软件,三维重建后利用.dwg文件导入3dmax2009。确定三维参照坐标和原点,导入标尺确定进钉点,导入原创设计阵列模型,寰椎以3.5 mm直径,长度为22 mm螺钉,枢椎以3.5 mm直径,长度为24 mm螺钉为研究对象,模拟安全区置钉区间内最佳置钉方案,记录最佳置钉数据,最后输入最佳置钉数据指导计算机模拟置钉,并在透视图中观察置钉效果。结果 185个元素符合寰椎进钉要求,枢椎395个元素符合进钉要求。通过透视图检查,其中寰椎27枚,枢椎25枚共53枚最佳角度模拟螺钉均准确位于椎弓根内。对双侧椎体左、右侧直径3.5 mm椎弓根螺钉最远距离进行比较,差异不具有显著差异（P〉0.05）。结论利用数字3D建模技术能建立标准、简化、精确地术前设计。
- 王玮琦覃涛王婷郑东
- 关键词：寰枢椎三维建模
- TGF-β3真核表达载体转染骨髓基质干细胞促进其向软骨分化的实验研究被引量：5
- 2007年
- [目的]构建生长转化因子(TGF-β3)含绿色加强绿色荧光蛋白的真核表达质粒pIRES2-EGFP-TGF-β3,然后用该质粒转染骨髓基质干细胞(Marrow stromal cells,MSCs)并促进MSCs向软骨方向分化。[方法]用RT-PCR法从大鼠的胚胎组织中提取TGF-β3的DNA全长,首先连接到pMDl8-T载体,扩增、纯化后经测序公司测序确定插入目的基因序列的正确性,然后再用带有EcoRI、PstI内切酶的引物,从pMD18-T将TGF-β3的全长再次扩增出来,最后将带有酶切位点的TGF-β3的全长插入到真核质粒pIRES2-EGFP中,构建真核表达载体pIRES2-EGFP-TGF-β3。体外培养大鼠MSCs,应用阳性脂质体将pIRES2-EGFP-TGF-β3转染到MSCs中,24h后在荧光显微镜下观察蛋白的表达,流式检测MSCs的转染效率;Westen Blot检测TGF-β3蛋白的表达;之后进行MSCs细胞球团培养,分别于第7、14、21、28d检测软骨基质胶原Ⅱ,胶原X和Aggrecan的表达,同时用甲苯胺蓝检测蛋白聚糖(proteoglycan)的表达。[结果]测序结果和酶切鉴定结果表明成功的构建了pIRES2-EGFP-TGF-β3质粒,转染MSCs之后,转染的效率达30%。Westen Blot结果表明TGF-β3获得了成功的表达,在接下来的细胞球团培养过程中,转染后MSCs被成功诱导向软骨分化。
- 郑东杨述华袁晓梅李进冯勇徐亮梅荣成
- 关键词：软骨分化软骨组织工程软骨修复
- 干细胞诱导、细胞系诱导和原代分离3种提取成骨细胞的方法比较被引量：3
- 2017年
- 背景:成骨细胞是骨组织构建的重要组织细胞之一。成骨细胞取材困难,不同方法获得的成骨细胞纯度及钙化能力不尽相同。目的:比较小鼠骨髓间充质干细胞成骨诱导、细胞系MC3T3-E1成骨诱导和小鼠颅骨原代细胞培养3种方法获得的成骨细胞的纯度及钙化能力。方法:采用贴壁纯化法分离出小鼠骨髓间充质干细胞,传至3代后用成骨诱导培养基诱导21 d;将前成骨细胞系MC3T3分别用成骨诱导培养液1和成骨诱导培养液2诱导21 d;使用Ⅰ型胶原酶消化法取得乳鼠颅骨原代成骨细胞。对3种方法获得的成骨细胞进行茜素红钙结节染色,观察其成骨特性。结果与结论:(1)骨髓间充质干细胞诱导后钙结节平均为16.3个/低倍镜视野;(2)前成骨细胞系MC3T3诱导培养液1组可观察到稀疏的钙结节,平均为1.7个/低倍镜视野,诱导培养液2组可观察到密集的钙结节,平均为44.6个/低倍镜视野,两种诱导液相比钙结节形成能力差异有显著性意义(P<0.01);(3)原代成骨细胞钙结节平均为0.6个/低倍镜视野;(4)除MC3T3诱导液1组与原代成骨细胞相比差异无显著性意义外,其余两两相比成骨能力差异均有显著性意义(P<0.01);(5)由于骨髓间充质干细胞分离培养具有更多不可控因素,因此MC3T3细胞用含有地塞米松的诱导培养液2进行成骨诱导方法较好。
- 邓享誉陈胜邵增务郑东
- 关键词：干细胞成骨细胞成骨诱导国家自然科学基金
- 颈椎微创术后椎间盘内压力与临床疗效关系的研究被引量：5
- 2011年
- 目的探讨颈椎间盘突出症的微创治疗术后椎间盘内压力与临床疗效的关系。方法应用射频消融髓核成形术治疗颈椎间盘突出症47例，测定术后椎间盘内压力，观察其与临床疗效改善率的相关性。结果所有患者均在压力监测下顺利完成手术。47例患者获得1～25个月随访，根据日本骨科协会（JOA）评分法，采用术后改善率（Hirabashi公式）评定疗效。优25例，良19例，好转3例，优良率为93．6％（44／47）。术后椎间盘内压力与术后改善率有显著相关性（P〈0．05）。结论射频消融髓核成形术是治疗颈椎间盘突出症安全、有效的微创技术，术后椎间盘内压力若在3kPa时，则效果更佳。
- 向选平王华杜远立李飞向春艳郑东杨述华
- 关键词：导管消融术椎间盘移位
- 同种异体脱钙骨基质作为骨组织工程载体的实验研究被引量：10
- 2005年
- 目的通过体外同种异体脱钙骨基质(DBM)和骨髓基质细胞(BMSC)的复合培养及体内异位成骨实验,研究DBM作为骨组织工程载体的生物相容性及成骨活性。方法参考Urist操作方法大量制备兔同种异体DBM。骨穿取兔骨髓单细胞悬液进行培养,将BMSC与同种异体DBM体外复合培养3～7d,相差显微镜、扫描电镜(SEM)和苏木精伊红染色后光镜下观察结果。将DBM和BMSC复合培养3d的复合物植入家兔一侧骶棘肌肌袋内,分别在1、2、4周活体取材,扫描电镜和苏木精伊红染色后光镜观察,对侧单纯植入DBM作为对照。结果体外培养发现BMSC在DBM中贴壁生长、增殖并有分泌活动。体内实验发现BMSC在DBM孔隙内均匀成骨,对照组则从DBM骨块的边缘到中心逐步成骨,成骨所需的时间长,而且成骨量要小于前者。结论DBM作为组织工程载体具有良好的生物相容性和成骨活性。
- 李进郑东杨述华
- 关键词：脱钙骨基质骨髓基质细胞生物相容性成骨活性
- 显微内窥镜椎间盘切除术和传统手术治疗老年人腰椎间盘突出症被引量：6
- 2008年
- 目的总结老年人腰椎间盘突出症的特点和手术方式的选择。方法175例老年腰椎间盘突出患者中,93例行显微内窥镜椎间盘切除术(MED),82例行传统手术,比较分析两组术后疗效。结果147例获得随访,时间2年1个月～7年5个月,根据改良Macnab评定标准进行分级,MED和传统手术优良率分别为89.5%和87.0%,经Ridit分析两组疗效相似。结论老年人腰椎间盘突出症应根据病理改变选择手术方式,单纯的局限型突出适合微创MED手术方式,有利于老年患者术后早期康复。
- 许伟华杨述华郑东肖宝钧李进杨操
- 关键词：椎板切除术椎间盘切除术显微外科手术
- 转化生长因子-β3融合蛋白促进骨髓基质干细胞向软骨分化的研究被引量：5
- 2010年
- 目的 构建潜在相关肽（LAP）为潜伏位点,基质金属蛋白酶（MMP）切位点为导向位点,转化生长因子（TGF）-β3活性部分（mTGF-β3）为治疗位点的具有靶向治疗作用的新型TGF-β3融合蛋白LAP-MMP-mTGF-β3,并转染大鼠来源的骨髓基质干细胞（MSCs）,并检验其特异性的靶向治疗作用.方法 将人工合成的编码MMP酶切位点氨基酸的正反义DNA序列经基因重组定向克隆插入真核表达载体pIRES-EGFP中,获得pIRES-EGFP-MMP重组体,用逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）从大鼠胚胎组织中获取TGF-β3的LAP（781 bp）段和TGF-β3的活性片段mTGF-β3（313bp）,分别插入pIRES-EGFP-MMP中MMP的上游和下游,获得pIRES-EGFP-LAP-MMP-mTGF-β3重组质粒.然后将其转染入大鼠来源的MSCs,将转染后的MSCs在有MMP-1和无MMP-1的条件下进行球团培养,分别于第7、14、21天检测胶原2（COLⅡ）,Aggrecan（Agc）和TIPM的表达.结果 经过测序和酶切鉴定,构建pIRES-EGFP-LAP-MMP-mTGF-β3质粒;转染MSCs后,我们成功获得了LAP-MMP-mTGF-β3融合蛋白（39 kDa）的表达,并验证了其只有在MMP酶环境中才能被激活生成具有生物学效应的特异性的mTGF-β3二聚体（22.2 kDa）;球团培养中,MMP酶存在的条件下第21天COLⅡ、Agc、TIPM的相对表达量分别为1.45±0.07、1.61±0.09、1.80±0.08,无MMP酶存在的条件下第21天COLⅡ、Agc、TIPM的相对表达量分别为0.42±0.09、0.38±0.15、0.27±0.07.结论 构建了一种新型具有靶向治疗作用的融合蛋白LAP-MMP-mTGF-β3.
- 郑东刘国辉杨述华许伟华冯勇李进叶树楠杨操傅德皓唐欣
- 关键词：软骨分化骨髓基质细胞
- 颈椎前路钢板和颈椎后路椎弓根钉治疗颈椎疾病的疗效分析
- 目的：研究颈椎前路钢板和颈椎弓根钉治疗脊髓性颈椎病的疗效并进行分析，为使用这两种方法治疗脊髓型颈椎病提供指导。方法：随访我科2005-2008年因各种病因导致脊髓型颈椎病的患者50例，他们分别采用前路钢板和颈椎弓根钉系统...
- 郑东杨述华许伟华叶树楠杨操李进肖宝均
- 骨髓基质干细胞的单克隆化培养和多向分化的实验研究被引量：1
- 2007年
- 目的通过对骨髓基质干细胞(marrow stromal cells,MSCs)的单克隆化培养、鉴定和扩增,获得从一个单细胞扩增出的大量均质MSCs,并研究其多向分化能力。方法无菌条件下获取大鼠骨髓细胞,在培养的过程中挑出相应的单细胞克隆。将挑出的单细胞克隆与饲养细胞混合培养,快速进行扩增和细胞表面标志的鉴定,并进一步行增殖和细胞分化实验。结果在含有特定饲养层细胞的培养条件下,单克隆来源的MSCs能在抑制分化的状态下大量扩增,并保持细胞的均质性;而且在这种培养条件下,MSCs的增殖能力明显增强,并能成功被诱导向软骨、神经样细胞分化。结论通过骨髓细胞的单克隆培养,获得了均质和多向分化潜能的MSCs,为进一步更精确的研究MSCs的生物学特性提供了基础。
- 郑东杨述华冯勇杨操李进梅荣成唐欣徐亮
- 关键词：骨髓基质干细胞横向分化
- 工程化生长转化因子β3促进软骨前体细胞向软骨分化的实验研究
- 目的：构建LAP(latency associated peptide in TGF-beta,LAP)为潜伏作用,MMP(matrix metalloproteinase,MMP)酶切位点为导向作用,TGF-β3活性部...
- 郑东杨述华邵增务杨操刘国辉许伟华李进刘先哲冯勇
- 关键词：基因克隆软骨分化软骨修复
