陈亚娟
- 作品数：24 被引量：52H指数：5
- 供职机构：北京农业生物技术研究中心更多>>
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- 毛白杨翻译起始因子基因PtoeIF5A2的克隆及其表达特性分析被引量：2
- 2014年
- 真核翻译起始因子5A(eIF5A)在植物生长发育和抗逆过程中发挥着重要作用。以2个月的毛白杨‘BJHR01’幼苗总RNA反转录的cDNA为模板,克隆得到PtoeIF5A2(GenBank登录号:HQ529480)基因全长cDNA序列。该基因包含483 bp开放读码框,编码160个氨基酸,预测蛋白分子质量为18 kDa,等电点为5.76。Real-Time qRT-PCR分析表明:PtoeIF5A2在6个月毛白杨幼苗叶片中的表达量最高,约为其在幼根中表达量的5倍。PtoeIF5A2响应了干旱、ABA(200μmol·L-1)、低温(4℃),尤其是NaCl(300 mmol·L-1)胁迫。在NaCl胁迫24 h后,PtoeIF5A2的表达量上调25倍,结合其启动子中含有6个病原体与高盐响应(GT-1 box)元件,推测该基因在响应高盐胁迫时起着重要作用。
- 管阳王宏芝张杰伟陈亚娟朱丹丁莉萍魏建华
- 关键词：毛白杨盐胁迫
- 毛白杨PtoeIF5A4的原核表达、纯化及鉴定
- 2014年
- 为获取大量高纯度的毛白杨PtoeIF5A4蛋白以便研究其特性和生物学功能,以pGEM-T Easy-PtoeIF5A4质粒为模板,PCR扩增毛白杨PtoeIF5A4基因的cDNA编码区,测序正确后,经酶切将其插入到原核表达载体pET28a上,然后将表达载体转入大肠杆菌表达菌株BL21(DE3),经不同浓度IPTG诱导培养后发现,0.1 mmol/L IPTG,28℃诱导4 h时目的蛋白最多,且该重组蛋白主要以可溶性的形式存在。采用亲和纯化从可溶性蛋白中纯化到大小为18 kD的蛋白条带。Western blotting分析发现亲和纯化所得蛋白可以与His单克隆抗体发生免疫交叉反应,表明纯化所得蛋白是PtoeIF5A4重组蛋白。
- 张杰伟管阳朱丹陈亚娟丁莉萍王宏芝魏建华
- 关键词：毛白杨原核表达蛋白纯化
- 一种便于组培操作的培养瓶
- 本实用新型公开了一种便于组培操作的培养瓶，包括瓶身和瓶盖，瓶身为三角瓶或一端开口的圆柱形，瓶身为透明材质，瓶盖可拆卸，瓶盖顶部设置通孔，通孔处覆盖有滤膜，滤膜孔径为0.2~0.5μm。本实用新型提供了一种开口、封口操作简...
- 丁莉萍魏建华王宏芝陈亚娟张杰伟
- 文献传递
- 毛果杨CBF/DREB1基因家族生物信息学分析被引量：6
- 2018年
- 【目的】为了对毛果杨CBF基因家族进行系统分析,利用毛果杨基因组数据库,通过生物信息学的方法,鉴定毛果杨CBF基因家族的染色体定位、编码蛋白和磷酸化位点预测。【方法】通过序列比对进行进化和分类分析。【结果】毛果杨含有6个CBF基因,均不含内显子,分布于毛果杨的5条染色体上。【结论】MEME保守基序分析显示,杨树CBF蛋白均含有2个保守的基序,他们共同构成AP2结构域。磷酸化位点预测分析表明毛果杨CBF蛋白均含有大量的磷酸化位点。以上结果将为今后揭示毛果杨CBF蛋白的功能提供重要的线索。
- 丁咚陈亚娟崔进荣魏建华张玉红张杰伟
- 关键词：杨树基因家族进化分析
- 双元细菌人工染色体基因组文库研究进展
- 2013年
- 酵母人工染色体(YAC)、细菌人工染色体(BAC)是伴随着人类基因组计划的实施而产生的,这些大片段基因克隆载体的应用推动了分子生物学、遗传学等学科的快速发展。以农杆菌介导的直接转化植物为代表的双元细菌人工染色体(BIBAC)载体的发展,加速植物基因组的研究,成为植物基因组分析、基因功能鉴定、染色体结构与功能关系研究的重要工具。介绍了人工染色体文库的发展史,根据建库经验,着重阐述了BIBAC文库的构建、鉴定与应用。
- 朱丹张杰伟陈亚娟张少斌魏建华
- 关键词：人工染色体基因组文库
- 木质部特异表达杨树PtoMYB148转录因子克隆与分析
- 2013年
- 作为植物中最大的转录因子家族之一,MYB转录因子在次生壁合成转录调控过程中发挥重要的作用。详细解析杨树不同MYB转录因子对次生细胞壁中纤维素、半纤维素和木质素等主要成分合成的调控作用,有利于在杨树定向生物技术育种中制定实用有效的分子设计策略。主要以毛白杨为材料,克隆了毛白杨PtoMYB148转录因子的全长cDNA。通过植物细胞显微切割结合荧光定量PCR技术检测基因转录表达水平,显示PtoMYB148在分化的木质部及成熟木质部高水平表达。系统进化分析表明,PtoMYB148与拟南芥AtMYB103、AtMYB050和AtMYB086转录因子相似性较高,其中AtMYB103已被证明参与次生细胞壁合成调控。亚细胞定位试验表明,PtoMYB148定位于细胞核内。PtoMYB148在酵母细胞中具有转录激活活性。PtoMYB148是具有活性的转录因子,可能在毛白杨次生细胞壁的合成中起重要作用。
- 程占超陈亚娟张杰伟王宏芝魏建华
- 关键词：转录因子转录激活亚细胞定位
- 一种植物诱导型启动子及其应用
- 本发明公开了一种植物诱导型启动子及其应用。通过染色体步移法从盐生植物野大麦基因组中获得了一段1750bp的<I>HbCIPK2</I>启动子序列，利用该启动子序列获得的拟南芥转<I>proHbCIPK2:</I><I>G...
- 李瑞芬陈亚娟魏建华王宏芝
- 文献传递
- 杨树PtoCIPK2基因的克隆和表达分析被引量：1
- 2013年
- 钙调磷酸酶B类似蛋白互作蛋白激酶(CIPKs)在植物生长发育和抗逆过程中发挥着重要作用。以2个月龄的杨树(Populus tomentosa Carr.cv‘BJHR01’)幼苗总RNA反转录的cDNA为模板,克隆得到PtoCIPK2(GeneBank登录号:KF225478)基因全长cDNA序列。该基因包含1 395 bp开放读码框,编码464个氨基酸,预测蛋白分子量为52.8 ku,等电点为9.19。蛋白质结构分析表明,PtoCIPK2具有保守的蛋白激酶结构域和NAF结构域。Real-Time qRT-PCR分析表明,PtoCIPK2在杨树幼苗主根、茎和叶片中均有表达,在叶片中的表达量最高,约为其在茎中表达量的4倍。PtoCIPK2响应了NaCl(300 mmol/L)、干旱和ABA(200μmol/L)的胁迫。在NaCl和干旱胁迫12 h后,PtoCIPK2的表达量分别上调了28和8倍,推测该基因在响应高盐和干旱胁迫时起重要作用。
- 张杰伟管阳李瑞芬陈亚娟朱丹魏建华
- 关键词：蛋白激酶杨树盐胁迫干旱胁迫
- 一种杨树NAC基因启动子及其应用
- 本发明公开了一种杨树NAC基因启动子及其应用。本发明提供了DNA片段，为如下1)‑3)中任一所述的DNA分子：1)编码区为序列表中序列1所示的DNA分子；2)在严格条件下与1)限定的DNA序列杂交且具有启动子功能的DNA...
- 陈亚娟魏建华王宏芝丁莉萍姚磊张杰伟
- 毛白杨PtoNAC157基因的克隆与表达分析被引量：3
- 2014年
- NAC是植物特有的一类转录因子,在植物生长发育和抗逆过程中有重要作用。本研究从毛白杨中克隆出一个NAC转录因子基因,并根据同源性分析将其命名为Pto NAC157,开放阅读框为942 bp,能编码一个由313个氨基酸残基组成的蛋白质,预测蛋白分子量为35.5 kDa,等电点为7.22。氨基酸同源性分析显示,该蛋白N-端具有保守的NAC结构域。实时荧光定量PCR结果表明:PtoNAC157在毛白杨幼根、茎和叶中均有表达,在茎中的表达量最高。PtoNAC157响应低温、NaCl(300mmol·L-1)、干旱和ABA(200μmol·L-1)胁迫。由此推测该基因在林木次生生长及响应胁迫信号转导过程中发挥作用。
- 张杰伟陈亚娟丁莉萍朱丹苗傲雪魏建华王宏芝
- 关键词：毛白杨胁迫
