陈崇顺
- 作品数：37 被引量：243H指数：8
- 供职机构：南京师范大学生命科学学院江苏省生物多样性与生物技术重点实验室更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金江苏省自然科学基金国家基础科学人才培养基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生文化科学更多>>
- 农杆菌介导烟草抗真菌β-1,3-葡聚糖酶基因转化洋桔梗被引量：3
- 2016年
- 为获得洋桔梗抗真菌病害新品种,本研究将烟草抗真菌β-1,3-葡聚糖酶基因(Glu)与质粒p BI121重组,构建了植物表达载体p BI121-Glu,利用农杆菌介导法转化洋桔梗品种Double Mariachi Pink叶块,共获得21个卡那霉素抗性株系。对抗性株系进行PCR扩增,获得10个阳性株系。选取其中生长良好的5个株系进行RT-PCR检测,鉴定出3个株系(EG6、EG11和EG17)为转基因正常转录株系。EG6、EG11和EG17株系及非转基因对照株系的β-1,3-葡聚糖酶的平均活力分别为0.301 U、0.243 U、0.401 U及0.236 U,其中EG6和EG17株系的平均活力显著高于非转基因对照株系。洋桔梗离体叶片的抗灰霉病鉴定显示,EG17病斑面积(0.432 cm2)显著小于非转基因对照株系(2.156 cm2)。此外,EG17对灰霉病的抗性还表现为发病延迟、病斑面积扩大速度减慢等。
- 付晓佳张倩李琳乔宁宁王转梅陈崇顺
- 关键词：洋桔梗Β-1,3-葡聚糖酶基因农杆菌介导法
- 药用植物半枝莲的离体快繁被引量：6
- 2007年
- 以茎尖为外植体进行了离体快繁研究。利用6-BA×IBA和6-BA×NAA两种激素组合诱导丛生芽,6-BA×IBA激素组合的最佳增殖培养基是MS+6-BA0.5 mg/L+IBA0.1 mg/L,增殖系数可达6.5;6-BA×NAA激素组合的最佳增殖培养基是MS+6-BA0.5 mg/L+NAA0mg/L,增殖系数可达6.1;两种组合无显著性差异。在MS基本培养基上即可生根且长势良好,生根率为100%;诱导丛生芽试验中6-BA浓度不能超过0.5 mg/L,否则会有愈伤组织出现。
- 瞿大枞陈崇顺王轶杨燕燕曹伟杰
- 关键词：半枝莲离体快繁
- 洋桔梗品种遗传多样性的AFLP分析被引量：2
- 2014年
- 该研究以洋桔梗（Eustoma grandi florum）2个品种‘玛丽艾基粉色’和‘圣剑白底紫边’为试材,提取叶片DNA,经过EcoRI /Mse Ⅰ双酶切、连接、预扩增、选择性扩增,建立了洋桔梗的AFLP最佳反应体系;并以64个常用引物组合进行扩增,得到154个多态性条带,从中筛选出扩增条带较多且多态性较好的4个引物组合（E-ACA/M-CTC,E-ACC/M-CAC,E-AGC/M-CTT,E-ACT/M-CAG）,其多态位点百分率均值为24.36％.利用上述4个引物组合,以最佳反应体系为基础,构建了7个常见洋桔梗品种的AFLP指纹图谱,统计7个品种各4个引物组合在1 000～300 bp区间7个区段的扩增条带,并将各个品种的AFLP指纹图谱转换成各品种4组7位数构成的28位特异数字指纹,极大地方便了种质比较及鉴定;7个品种间的遗传相似系数介于0.683 5～0.860 8之间,平均值为0.774 6.研究结果为进一步进行洋桔梗的种质研究及利用奠定了基础.
- 王瑞鑫韦银凤李琳付晓佳李爽陈崇顺
- 关键词：洋桔梗最佳反应体系引物筛选遗传相似系数
- RNA干扰技术抑制洋桔梗ACC合酶基因的表达被引量：1
- 2017年
- 为了延长洋桔梗的花期,本研究通过农杆菌介导法,以ACC合酶(ACS)基因干扰表达载体,对Double Mariachi Pink洋桔梗(Eustoma grandiflorum)的叶片外植体进行了转化。经过再生芽的筛选增殖培养,在含有卡那霉素Km(15 mg/L)再生根筛选培养基中得到了46株抗性苗,其中11株经GFP基因PCR鉴定为阳性。经进一步的GFP基因RT-PCR鉴定,3株表达为阳性,并且其中2株经GFP荧光检测呈阳性。提取荧光阳性植株RNA,逆转录后,进行了ACS荧光定量PCR。结果表明,与未转基因对照植株相比,转基因植株ACS的相对表达量平均下降了63.17%。花期统计结果表明,ACS干扰表达载体转化的洋桔梗植株花期比未转基因植株对照延长了17 d。
- 张倩孙晶廖静陈崇顺
- 关键词：洋桔梗RNA干扰花期
- 月季离体培养植株高效再生体系的建立被引量：5
- 2008年
- 以月季品种红双喜为试材,以MS为基本培养基,研究不同6-BA与NAA浓度配比、不同芽龄对丛生芽增殖的影响,不同NAA浓度与培养基大量元素强度组合对芽苗再生根诱导的影响等。结果表明:月季品种红双喜丛生芽增殖的最佳培养基为MS+6-BA 2.0 mg/L+NAA 0.05 mg/L,增殖倍数可达5.0;芽龄在5周以上的腋芽丛生芽增殖倍数可达5.0以上;芽苗再生根诱导的最佳培养基为1/2MS+NAA 0.05 mg/L,再生根诱导率可达90%,平均再生根数为8.1条,瓶苗的移栽成活率高达100%。本研究成功建立了月季品种红双喜离体培养植株高效再生体系,为进一步开展月季基因工程研究奠定了基础。
- 曹伟杰陈崇顺王轶金凤王转梅
- 关键词：月季离体培养
- 农杆菌介导洋桔梗遗传转化影响因素的研究被引量：4
- 2010年
- 以洋桔梗品种Double Mariachi Pink叶片为外植体,研究了影响农杆菌介导遗传转化效率的几个重要因素。结果表明,叶片外植体与农杆菌合适的共培养时间为5 d;以新的切割方法——"刺孔法"切割叶片,每个叶块外植体再生不定芽平均15.22个,明显多于"三刀切"的11个;"刺孔法"的叶块转化率达到77.7%,每个叶块再生卡那霉素抗性苗平均0.64株,明显高于"三刀切"的57.7%和0.38株;在"刺孔法"处理中,与孔外边缘切口相比,分布均匀的孔内切口利于更多不定芽的再生和卡那霉素抗性苗的形成。
- 张娟曹伟杰陈崇顺马文晔王转梅岳敏
- 关键词：洋桔梗农杆菌介导法共培养
- 利用正交设计建立洋桔梗RAPD最佳反应体系被引量：5
- 2008年
- 利用正交设计法对影响洋桔梗RAPD反应的Mg2+、dNTPs、Taq DNA聚合酶、引物和模板等主要因素的作用进行了比较分析,建立了洋桔梗RAPD的最佳反应体系:即在25μL反应体积中,10×PCR buffer为2.5μL,Mg2+浓度为2.0 mmol/L,dNTPs浓度为0.4 mmol/L,引物浓度为0.2μmol/L,模板浓度为50 ng/μL,Taq DNA聚合酶用量为1.0 U;在此基础上,比较了不同退火温度对RAPD扩增产物的影响,退火温度经筛选选定为41℃;最后再将该反应体系应用于不同引物,结果表明该优化结果具有较好的稳定性和通用性。
- 王轶陈崇顺曹伟杰王转梅
- 关键词：洋桔梗RAPD正交设计
- 豇豆几丁质酶纯酶液对不同真菌的作用被引量：5
- 2000年
- 几丁质酶(EC 3.2.1.14)广泛存在于植物中,当受到病原菌侵染或其它诱导因子诱导时,植物体内几丁质酶活性显著提高。菜豆纯几丁质酶具抗Trichoderma viridae活性,转菜豆几丁质酶基因的烟草植株增强了对Rhizoctonia solani的抗性。作者研究了经诱导、提纯的豇豆几丁质酶对不同真菌的作用,为开展抗真菌病基因工程研究奠定了基础。 1
- 陈崇顺朱雪峰郁志芳
- 关键词：豇豆几丁质酶真菌
- 洋桔梗ISSR最佳反应体系的建立与品种遗传多样性检测被引量：7
- 2010年
- 利用正交设计,对影响洋桔梗ISSR反应的主要因素进行了优化,建立了洋桔梗ISSR的最佳反应体系。在25μL的PCR反应体系中,含2.5μL 10×PCR buffer、1.5 mmol/L Mg2+、0.3 mmol/L dNTPs、0.2μmol/L引物、30 ng/μL洋桔梗基因组DNA模板及2.0 U的TaqDNA聚合酶。试验结果表明,该反应体系具有良好的稳定性和通用性。8个不同基因型洋桔梗材料遗传多样性检测结果表明,该ISSR分子标记可有效地检测出其中4个不同品种之间、同一品种F1代及F2代之间的遗传多样性,但未能检测出同1个品种F1代2个株系之间或2个转基因株系之间的遗传多样性。
- 马文晔陈崇顺曹伟杰张娟王转梅岳敏
- 关键词：洋桔梗ISSR分子标记最佳反应体系
- 萝卜CMS不育系与保持系小孢子发生的细胞学研究被引量：21
- 2004年
- 研究了萝卜胞质雄性不育系A2 、A4及其相应保持系B2 、B4的小孢子发生与花药壁发育的细胞学特征。结果表明 ,不育系A2 的绒毡层细胞在四分体时期出现异常 ,小液泡增多 ,至单核期汇合形成大液泡 ,绒毡层细胞异常膨大 ;小孢子外壁染色浅 ,细胞壁受到破坏 ,最后与绒毡层一同降解。不育系A4在减数分裂期即表现出异常 ,绒毡层异常肥大 ;花药发育后期 ,小孢子外壁亦染色较浅 ;绒毡层细胞融合形成细胞团块侵入药室挤压小孢子 。
- 黄浩柳李旺陈崇顺龚义勤宋贤勇韦开余
- 关键词：萝卜胞质雄性不育小孢子发生细胞形态学
