农微
- 作品数：21 被引量：33H指数：4
- 供职机构：广西中医药大学更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划国家自然科学基金广西壮族自治区自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生生物学更多>>
- 广西瑶山亚种树鼩原代肝细胞的分离、纯化、培养及鉴定
- 2017年
- 为了探讨瑶山亚种树原代肝细胞分离、培养及鉴定方法,试验对传统的两步原位胶原酶灌注法进行了优化,先将持续灌注法改为间断夹闭下腔静脉快速灌注法,再通过严格控制胶原酶的消化时间来分离提取树肝细胞,最后应用percoll分离液梯度低速离心纯化树肝细胞,采用PAS染色法和免疫细胞化学方法对树肝细胞进行综合鉴定。结果表明:分离得到的树肝细胞产量高、活力好;经PAS染色鉴定,发现树肝细胞内糖原被染成紫红色颗粒或片状;免疫细胞化学染色观察到树肝细胞胞浆内被染成棕黄色。说明成功分离培养树鼩肝细胞并对其进行鉴定,可用于进一步研究。
- 刘金花农微黄正团运晨霞夏钰淇冷静
- 关键词：树鼩纯化PAS染色免疫细胞化学
- 广西巴马小型猪Lin28基因的克隆与序列分析
- 据Gene Bank中公布的人、猪等物种的Lin28核苷酸序列设计合成一对引物,以广西巴马小型猪肠道组织总RNA为模板,采用RT-PCR法,扩增出Lin28成熟蛋白编码cDNA序列,将此扩增产物克隆入pMD18-T载体,...
- 农微蒋钦扬郭亚芬兰干球蒋和生
- 关键词：广西巴马小型猪诱导多功能干细胞
- 文献传递
- 金花茶抑制氧化低密度脂蛋白诱导的血管内膜下单核细胞迁移与泡沫细胞衍变的分子机制
- 农微温如燕陈柏承曹颖颖程永芳程梅
- 采用乙醇回流提取获得金花茶叶提取物并探讨其安全剂量范围。接着以ox-LDL孵育人脐静脉内皮细胞(HUVEC)成功诱导HUVEC过表达ICAM-1、VCAM-1、MCP-1、P-selectin;以ox-LDL孵育巨噬细胞...
- 关键词：
- 关键词：化学合成药物
- 五脏温阳化瘀汤对SAMP8小鼠Tau蛋白过磷酸化与神经纤维缠结的抑制作用被引量：2
- 2019年
- 目的:探讨五脏温阳化瘀汤对SAMP8小鼠神经组织Tau蛋白过磷酸化与神经纤维缠结的抑制作用。方法:50只SAMP8小鼠随机分为正常对照组、模型对照组、多奈哌齐组(0.4 mg·kg-1·d-1)与五脏温阳化瘀汤高、低剂量组(5、1.25 g·kg-1·d-1),连续灌胃给药4周。Morris水迷宫测试定位航行与空间探索能力,WB检测神经组织Tau蛋白磷酸化水平与蛋白激酶A(PKA)催化亚基,银染法检测神经组织神经纤维缠结,透射电子显微镜观察神经纤维微管超微结构。结果:五脏温阳化瘀汤显著降低PKA催化亚基水平,抑制Tau蛋白过磷酸化与神经纤维缠结,维持神经纤维微管超微结构完整,缩短小鼠定位航行潜伏期并改善空间探索能力。结论:五脏温阳化瘀汤改善认知能力可能与其减少PKA催化亚基从而抑制Tau蛋白过磷酸化、神经纤维缠结有关。
- 卫智权农微莫雪妮吴林唐农
- 关键词：痴呆蛋白激酶A神经纤维缠结
- 稳定表达牛催乳素蛋白的乳腺上皮细胞的构建方法
- 本发明公开了一种稳定表达牛催乳素蛋白的乳腺上皮细胞的构建方法，该法主要利用Crispr/Cas9技术将牛催乳素基因和报告基因绿色荧光蛋白基因定点整合到小鼠β‑casein基因座上。研究表明，本发明所得中靶细胞株可稳定表达...
- 农微谢体三陈柏承
- 人胚胎干细胞外泌体的分离与生物学功能鉴定被引量：1
- 2020年
- 本研究采用超高速离心法从人胚胎干细胞培养液上清分离提纯出外泌体,应用透射电镜、免疫印记和RT-PCR方法检测其生物学特性。结果表明,在透射电镜下观察到人胚胎干细胞外泌体呈茶盏状,大小不均匀,直径30~100 nm,有完整的膜结构,内含低密度物质;人胚胎干细胞外泌体表达外泌体标志抗原CD63、TSG101和多能性转录因子OCT4、SOX2、NANOG、KLF4;干细胞外泌体呈剂量性依赖方式促进小鼠胚胎成纤维细胞增殖。本研究为进一步研究人胚胎干细胞外泌体的生物学特征和功能提供有价值的生物学信息。
- 农微吴剑婷吴青萍朱思燃谢婉谢体三
- 关键词：外泌体干细胞生物学特性细胞增殖
- 水牛抑制素α亚基基因的克隆与原核表达被引量：5
- 2009年
- 采用RT-PCR方法从水牛卵巢总RNA中扩增抑制素α亚基基因,并克隆入pMD18-T载体,进行PCR、双酶切及测序鉴定。序列分析结果表明:水牛抑制素α亚基基因编码序列长为1083 bp,编码360个氨基酸,与牛、人、猪抑制素α亚基基因CDS成熟蛋白氨基酸的同源性分别为96%、80%、87%,表明抑制素α亚基是一组在进化上高度保守的蛋白质。将水牛抑制素α亚基基因CDS克隆到pET-30a表达载体中,转化宿主菌BL21(DE3)进行原核表达。在1 mmol/L IPTG中,37℃诱导表达4 h后抑制素α亚基基因重组蛋白可成功获得表达。将表达产物进行SDS-PAGE分析,结果表达产物主要以包涵体形式存在,分子质量约为40 ku。
- 谢体三农微张新民黄雅琼崔奎青石德顺
- 关键词：水牛原核表达
- 诱导多潜能性干细胞的研究进展
- 诱导多能干细胞(Induced Pluripotent Stem Cells，iPSCs)是应用生物学方法使分化的体细胞发生重编程，从而获得的可不断自我更新并具有多向分化潜能的细胞。iPSCs既具有向多种细胞或组织分化的...
- 农微郭亚芬卢安根莫建光蒋钦杨兰干球蒋和生
- 关键词：诱导多能干细胞重编程
- 文献传递
- 水牛ghrelin基因原核表达载体构建与蛋白表达
- 2016年
- 为了研究水牛ghrelin基因的结构与功能,本试验对水牛ghrelin基因进行原核表达载体构建与融合蛋白表达条件的优化。采用RT-PCR方法从水牛胃组织的总RNA中扩增出ghrelin编码区,连接到pRSET-a载体中,转化大肠杆菌BL21(DE3),挑取阳性克隆子,用IPTG进行诱导表达条件的优化。结果表明,成功构建原核表达载体pRSET-a-ghrelin,在2 mmol/L IPTG,37℃的条件下诱导表达4 h,水牛ghrelin重组蛋白可成功获得表达,经SDS-PAGE鉴定发现,ghrelin融合蛋白主要以包涵体形式存在,分子量约为20 ku,其表达量占总菌体蛋白量的35%。本试验结果为进一步研究水牛ghrelin基因的结构和功能提供有价值的生物学信息。
- 农微谢婉朱思燃秦津崔月明李爱友谢体三
- 关键词：GHRELIN水牛原核表达
- 五脏温阳化瘀汤抑制周期蛋白依赖激酶-5过表达对SAMP8小鼠脑神经纤维缠结的影响被引量：2
- 2019年
- 目的:探讨五脏温阳化瘀汤改善SAMP8小鼠认知能力的周期蛋白依赖性激酶-5(CDK-5)相关脑神经纤维缠结机制。方法:10只SAMR1小鼠为正常组,40只SAMP8小鼠随机分为模型组,多奈哌齐组(0.4 mg·kg^(-1)·d^(-1)),五脏温阳化瘀汤高、低剂量组(5,1.25 g·kg^(-1)·d^(-1)),连续灌胃给药4周。Morris水迷宫测试定位航行与空间探索能力;实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测脑神经组织CDK-5 mRNA表达水平;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测脑神经组织CDK-5蛋白表达与Tau蛋白磷酸化水平;银染法检测脑神经纤维缠结。结果:与正常组比较,模型组脑神经组织CDK-5与Tau蛋白磷酸化表达水平均显著升高(P<0.01),脑神经纤维缠结明显增多,定位航行与空间探索能力显著减弱(P<0.01);与模型组比较,五脏温阳化瘀汤高、低剂量组脑神经组织CDK-5与Tau蛋白磷酸化表达水平均明显降低(P<0.05,P<0.01),脑神经纤维缠结减少,小鼠定位航行并空间探索能力明显改善(P<0.05,P<0.01)。结论:五脏温阳化瘀汤可显著改善SAMP8小鼠认知能力,可能与其抑制CDK-5过表达进而抑制Tau蛋白过磷酸化导致脑神经纤维缠结减少有关。
- 农微卫智权莫雪妮吴林唐农
- 关键词：桂枝加附子汤神经纤维缠结
