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纤维素酶高产菌的筛选鉴定及纤维素酶基因的克隆与表达被引量：6: 2012年; 为寻找新纤维素酶和纤维素酶基因资源,以羧甲基纤维素钠(CMC)改良的BHM培养基筛选菌株,经初筛和复筛筛选出目的菌株后,采用革兰氏染色法和16SrDNA基因片段比对法对筛选出的菌株进行鉴定;设计引物对P扩增其纤维素酶基因,连于pET-28a(+)载体构建原核表达载体并转入大肠杆菌BL21(DE3)进行表达,表达结果采用SDS-PAGE和测定表达产物活性的方法来检验。结果显示,本研究成功筛选出一株新的具有较高纤维素酶活的短小芽孢杆菌BY-1,该菌所产纤维素酶具有较好的热稳定性和酸碱稳定性,最适宜温度和pH分别为55℃和7.45,在此条件下最高酶活性为0.921 6μmol/(mL.min);此外,还成功克隆出1个1 851bp的纤维素酶新基因bglC-BY,具有GH9/CBM3纤维素酶结构,经IPTG诱导,SDS-PAGE图谱上于70ku有1个明显的蛋白条带,表达产物酶活性为0.541 3μmol/(mL.min)。本研究筛选出的短小芽孢杆菌内切纤维素酶活较高,具有一定的应用前景。; 刘海艳白龙赵海波杨明明曹斌云; 关键词：纤维分解菌纤维素酶基因克隆

藏猪食草机理的研究——藏猪肠道微生物的多样性分析被引量：10: 2013年; 采用PCR/DGGE技术和16SrDNA序列分析方法,对2种猪(普通猪、藏猪)肠道细菌优势菌群结构进行了比较分析。研究结果表明,从DGGE图谱中均可以发现2种猪肠道细菌具有一定的相似性,种内个体间相似性明显高于种间相似性。同时进行了部分优势细菌16SrDNA基因V6～V8区序列的系统发育分析发现,DGGE图谱中优势条带的16SrDNA基因序列中有7条克隆的序列与基因库最相似菌的相似性大于97%,其余的克隆序列相似性在90%～96%,其中有1条序列被鉴定为与纤维素分解菌产琥珀酸厌氧螺菌相似。本试验分析结果可为进一步研究藏猪及其肠道微生物的特性及其食草机理提供依据。; 肖文萍刘海艳赵海波白龙彭甲银刘雪青王建刚宋宇轩曹斌云; 关键词：藏猪 RDNA基因肠道微生物 DGGE

OSP-1启动子在奶山羊卵巢颗粒细胞中的转录活性: 2013年; 采用大鼠OSP-1启动子替换掉pcDNA3.1(+)中的CMV启动子,在其下游插入EGFP基因片段,构建载体pOSP-1-EGFP,脂质体转染不同细胞,利用荧光检测、RT-PCR以及相对定量PCR鉴定该启动子启动基因表达的活性。结果表明,在卵巢颗粒细胞、人卵巢癌细胞系HO-8910中可看到有绿色荧光;OSP-1片段只在卵巢颗粒细胞和人卵巢癌细胞系HO-8910有表达,并在人卵巢癌细胞系HO-8910中表达量较高,但是两者之间差异不显著。说明OSP-1启动子可调控外源基因在奶山羊卵巢颗粒细胞中特异性的表达。; 白龙刘海艳赵海波彭甲银曹斌云; 关键词：EGFP 卵巢颗粒细胞 RT-PCR

一株新的纤维分解菌的分离及纤维素酶的克隆与表达: 藏香猪（藏猪）是世界上独特的高原型草食猪种，终年放牧，以食草为主。长期的自然选择使其具有耐寒、抗病、耐粗饲、肉质芳香等优良特性。为了探讨藏香猪耐粗饲的机理，本试验以单胃动物藏猪新鲜粪便为试验材料，采用改良的BHM培养基筛...; 刘海艳; 关键词：短小芽孢杆菌纤维素酶; 文献传递

奶山羊催乳复合青贮苹果渣饲料的研制被引量：5: 2012年; 旨在开发奶山羊复合青贮苹果渣催乳饲料。选择混合菌型,添加到苹果渣中青贮30d,然后利用发酵苹果渣对奶山羊进行30d的饲喂试验。将33只奶山羊按照配对试验设计原则平均分成对照组、苹果渣发酵组(Ⅰ)和苹果渣发酵添加中草药组(Ⅱ)。测定发酵后苹果渣的粗纤维、脂肪和糖含量,发现它们分别下降22.89%、31.99%和96.69%;与对照组比较,Ⅰ组、Ⅱ组的乳成分(脂肪、非脂固形物、蛋白质、乳糖、灰分)极显著提高(P<0.01),产奶量显著提高(P<0.05),但Ⅰ组与Ⅱ组的产奶量和乳成分差异均不显著。在饲料中添加发酵苹果渣可以提高奶山羊的生产性能,而发酵苹果渣中添加中草药与前者的作用差异不显著。; 肖文萍宋社果刘海艳安小鹏侯金星刘雪青宋宇轩王建刚曹斌云; 关键词：苹果渣青贮乳成分

藏香猪屠宰特性及肉品质的分析被引量：26: 2011年; 按照随机抽样的原则,选择饲养条件基本一致的成年去势公猪9头,对其屠宰性能和肉品质进行测定。结果表明,藏香猪的平均屠宰率为75.75%,瘦肉率为46.88%,含脂率为29.48%。体组分分析表明,头、蹄、内脏占活体质量的百分比均比内地饲养的瘦肉型猪的体组分高。相关性分析表明:屠宰率和大肠质量之间相关性显著(r=0.995,P=0.05),藏香猪肌肉脂肪酸组成主要是C16和C18脂肪酸,以棕榈酸(C16∶0)、硬脂酸(C18∶0)、油酸(C18∶1)和亚油酸(C18∶2)为主,这4种脂肪酸的相对含量分别为23.22%、10.76%、46.39%、13.39%。粗蛋白平均含量为19.45%,每100g背最长肌中氨基酸总量、鲜味氨基酸量和必需氨基酸量分别为17.00、7.401、6.50g,鲜味氨基酸和必需氨基酸占氨基酸总量的比例分别为43.56%和38.22%。矿物质含量丰富,尤其是Fe和Ca(Fe含量为35.15mg/kg,Ca为36.65mg/kg)含量较高。; 宋社果安小鹏赵海波刘海艳曹斌云; 关键词：屠宰性能肉质品质藏香猪

一种芽孢杆菌及其应用: 本发明涉及一种新的芽孢杆菌，分类命名是短小芽孢杆菌(Bacillus pumilus)BY-1。该短小芽孢杆菌从藏猪新鲜粪便中分离，能产生纤维素酶，具有降解羧甲基纤维素钠的能力，在37℃，220rpm培养96h后羧甲基纤...; 曹斌云刘海艳杨明明肖文萍安小鹏王建刚宋宇轩; 文献传递

一种芽孢杆菌及其应用: 本发明涉及一种新的芽孢杆菌，分类命名是短小芽孢杆菌(Bacillus pumilus)BY-1。该短小芽孢杆菌从藏猪新鲜粪便中分离，能产生纤维素酶，具有降解羧甲基纤维素钠的能力，在37℃，220rpm培养96h后羧甲基纤...; 曹斌云刘海艳杨明明肖文萍安小鹏王建刚宋宇轩

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刘海艳