吕莉华
- 作品数：8 被引量：44H指数：4
- 供职机构：内蒙古农业大学动物科学与医学学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金博士科研启动基金更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 定量检测瘤胃纤维降解细菌的RT-PCR法被引量：4
- 2008年
- 【目的】建立一种适用于瘤胃主要纤维降解细菌的RT-PCR定量检测方法,通过培养技术监测瘤胃纤维降解细菌在不同环境下的数量变化,为深入研究反刍动物瘤胃发酵机理以及对纤维素资源的有效利用提供技术支持。【方法】分别以Fibrobacter succinogenes、Ruminococcus flavefaciens与Ruminococcus albus的16SrDNA为靶序列设计相应的引物,建立SYBRGreenⅠRT-PCR定量体系。【结果】本研究所采用的引物及相应的PCR反应体系具有较高的特异性和灵敏度,检测极限可达50拷贝。采用RT-PCR方法检测瘤胃纤维降解细菌的定量结果与传统计数结果具有一致的变化趋势,相关性较高(r2=0.9591,P<0.05),表明RT-PCR定量检测方法可以较为准确、迅速的检测绵羊瘤胃纤维降解菌群的数量随环境变化的情况。【结论】本研究所建立的RT-PCR检测方法能够较准确反映瘤胃纤维降解细菌数量的变化。
- 吕莉华侯先志王海荣王贞贞高爱武
- 关键词：RT-PCR
- 不同氮源对绵羊瘤胃内固液相纤维素酶活的影响被引量：9
- 2008年
- 本论文旨在研究不同氮源对绵羊瘤胃内固、液相纤维素酶活的影响。选择体况良好,体重50kg左右的苏尼特绵羊9只,随机分成3组,分别饲喂以鱼粉、棉粕和豆粕为主要氮源的日粮。试验分别用瘤胃内容物(液体部分)和瘤胃内容物经两层纱布过滤后的残渣(固相部分)制取酶液,采用DNS(3,5-二硝基水杨酸)还原糖法测定酶活。在39℃,pH6.8,反应1h,煮沸5min,冷却5min条件下,于530nm处比色测定瘤胃内CMC(羧甲基纤维素酶)、滤纸酶、果胶酶、葡萄糖苷酶和木聚糖酶的活性。结果表明:氮源对绵羊瘤胃固相纤维素酶活影响显著,Ⅱ组(棉粕)的滤纸酶、果胶酶、葡萄糖苷酶和木聚糖酶的活性显著高于Ⅰ组(鱼粉)(p<0.05)。固、液相部分来源的纤维素酶活差异很大,固相部分的纤维素酶活数值大概是液相部分的10倍。
- 王贞贞侯先志王海荣吕莉华
- 关键词：羧甲基纤维素酶果胶酶糖苷酶木聚糖酶
- 利用定量杂交法检测绵羊瘤胃纤维细菌的研究被引量：4
- 2006年
- 实验利用通用细菌探针和3株纤维分解菌的特异性探针,初步建立起对瘤胃细菌进行检测的16S rRNA定量杂交的方法。试验将提取的总RNA按浓度系列稀释后与通用细菌探针进行杂交,检测结果所做的回归分析表明,杂交信号与尼龙膜上的所点RNA的量具有明显线性关系。同时对几份瘤胃样品进行3种纤维分解菌的初步定量检测,结果显示3种纤维分解菌的相对丰度与前人报道相似,表明该方法能够对瘤胃细菌进行定量分析,可在后续相关研究中使用。
- 王海荣侯先志高爱武吕莉华郭媛
- 关键词：RRNA寡核苷酸探针瘤胃细菌
- 日粮纤维水平对绵羊消化道不同部位固相食糜流通速率和纤维消化的影响被引量：2
- 2009年
- 【目的】研究日粮纤维水平对绵羊消化道不同部位固相食糜流通速率和纤维类物质流通量及消化率的影响。【方法】选择9只体质量为(52.46±1.75)kg、装有瘤胃和十二指肠T型瘘管的苏尼特绵羊,随机均分为Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ3组,3组绵羊分别饲喂NDF含量为64.38%,54.59%和42.71%的日粮;试验以铬标记纤维作为固相食糜标记物,通过分析不同时间瘤胃、十二指肠和直肠样品中的铬浓度以及不同时间混合样品中的NDF、ADF、HC、CEL和DM含量,计算不同消化部位固相食糜的流通速率、纤维物质流通量及消化率。【结果】各处理组间绵羊消化道相同部位的固相食糜流通速率、纤维物质流通量及消化率差异均不显著(P>0.05)。处理Ⅲ组各消化部位的流通速率以及瘤胃和全消化道营养物质的消化率均较低,但在后肠部位纤维类物质(NDF、ADF、CEL和HC)的消化力增强。【结论】在进食能氮总量相似的情况下,日粮纤维水平对纤维类物质的消化无显著影响。
- 王海荣侯先志王贞贞吕莉华韩吉雨
- 关键词：绵羊日粮纤维水平消化道消化率
- 不同纤维水平日粮对绵羊瘤胃内环境的影响被引量：10
- 2008年
- 试验选用体况良好、体重50kg左右的苏尼特绵羊9只,随机分为3组,每组3只,Ⅰ组、Ⅱ组、Ⅲ组日粮NDF含量分别为64.38%、54.59%、42.71%。研究日粮纤维水平的变化对绵羊瘤胃内环境的影响,试验结果表明:随纤维水平的增加瘤胃pH显著增加(p(0.01);氨氮、和总挥发性脂肪酸浓度与之相反,Ⅲ组显著高于Ⅰ组和Ⅱ组(p(0.01);乙酸摩尔浓度百分比随纤维水平降低而显著降低(p(0.05),丙酸和丁酸摩尔浓度显著升高(p(0.05);高纤维日粮组的乙酸:丙酸比例显著高于其它两日粮组(p(0.01),日粮纤维水平的变化,改变了瘤胃发酵的模式。
- 王海荣侯先志王贞贞吕莉华曹平
- 关键词：绵羊日粮纤维瘤胃内环境
- 绵羊瘤胃微生物基因组DNA提取方法的探讨被引量：8
- 2008年
- 本研究针对瘤胃内容物成分复杂、微生物种类繁多,且难于培养和分离这一特点,本着为采用免培养技术研究瘤胃微生物提供前期样本这一目的,对现在常用的五种基因组DNA提取方法进行了比较。试验结果得出应用珠磨-SDS/CTAB/PVP法所提瘤胃微生物基因组DNA质量及纯度较好,总DNA长度大于20kb,OD260/OD280在1.7以上。同时对所提的DNA应用PCR方法进行了检测,可以成功扩增出瘤胃中的古细菌、真细菌和真菌16/18SrDNA片断,进一步证明了此方法的优越性及可行性,为后续一些分子生物学试验提供质量较高的DNA模板。
- 吕莉华侯先志王海荣王贞贞高爱武
- 关键词：瘤胃微生物基因组DNA
- 瘤胃纤维降解菌Real-Time PCR荧光定量方法的建立及其初步应用
- 对绵羊瘤胃主要的几株纤维降解菌如产琥珀酸拟杆菌Fibrobacter succinogenes、白色瘤胃球菌Rumincoccus albus、黄色瘤胃球菌Rumincoccus flavefaciens和瘤胃厌氧真菌的...
- 吕莉华
- 关键词：瘤胃厌氧真菌不同精粗比
- 文献传递
- 日粮不同蛋白源对绵羊瘤胃发酵功能的影响被引量：3
- 2009年
- 为了研究日粮中不同蛋白饲料来源对绵羊瘤胃发酵功能的影响。本试验选用12只体重50 kg左右的苏尼特绵羊,随机分为4组,每组3只,Ⅰ组、Ⅱ组、Ⅲ组、Ⅳ组分别饲喂氮源为葵粕+玉米蛋白粉、鱼粉、棉粕、豆粕的日粮。结果表明:Ⅲ组瘤胃pH显著高于Ⅳ组(P<0.05);瘤胃NH3-N浓度、总VFA和丁酸的浓度受氮源影响不显著(P>0.05),对乙酸、丙酸浓度和乙酸∶丙酸比例影响显著,Ⅱ组乙酸∶丙酸比例显著低于其它3组(P<0.05)。不同氮源日粮对固相食靡流通速率、纤维物质的动态降解率影响不显著(P>0.05),但Ⅲ组(棉粕)纤维物质降解率最高。表明日粮蛋白源的变化改变了瘤胃发酵模式。
- 王海荣侯先志王贞贞吕莉华曹平
- 关键词：绵羊瘤胃发酵纤维降解
