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DcR3-RNAi-SW480结肠癌稳转细胞模型的建立及方法优化被引量：4: 2012年; 目的建立靶向沉默诱骗受体3(decoy receptor 3,DcR3)基因表达的DcR3-RNAi-SW480稳转细胞系,并对其条件及方法进行优化。方法构建靶向沉默DcR3基因的siRNA质粒表达载体,转染SW480细胞,并以G418及流式细胞仪筛选稳转细胞。实验分为3组:DcR3-RNAi稳转组、阴性对照组、空白对照组。蛋白质印记法(Western-blot)检测DcR3蛋白沉默情况。分别应用琼脂糖凝胶电泳、甲基噻唑基四唑(MTT)比色法、流式细胞术等方法对脂质体与质粒的比例、G418的筛选浓度、筛选的最佳方式等进行优化。结果 DcR3-RNAi稳转细胞组DcR3表达水平较对照组明显降低;在本实验室条件下,脂质体(μl)与DcR3-siRNA质粒(μg)最佳比例为3.5∶1;G418筛选浓度为800mg/L;G418联合流式细胞仪双筛的稳转细胞比例明显高于仅用G418单筛。结论成功建立特异性沉默DcR3基因表达的稳转DcR3-RNAi-SW480细胞系;G418联合流式是筛选稳转细胞较高效的方法;对转染及筛选的条件及方法进行优化,可提高转染与筛选效率。; 于玮何平陶莹李洋李晶吴涛伍冀湘戴洁; 关键词：结肠肿瘤 TNF相关凋亡诱导配体 RNA干扰

建立结肠癌SW480细胞原位移植瘤模型的实验研究被引量：1: 2013年; 目的建立接近于临床表现的结肠癌动物模型，以便了解结肠癌生长及形态学变化。方法选SPF级Balb／c品系裸鼠，皮下接种SW480细胞，4周后取出瘤体，种植于裸鼠结肠系膜根部，建立结肠癌外科原位手术移植动物模型，4周后取出结肠原位肿瘤，应用病理学方法对结肠癌原位移植动物模型进行评价和鉴定。结果5只裸鼠皮下接种SW480细胞后4周，皮下成瘤3只；10只裸鼠结肠原位移植肿瘤，8只结肠成瘤，显微镜下可见肿瘤浸润肠壁。结论实验成功建立了结肠癌SW480细胞动物结肠原位移植瘤模型，为结肠癌相关实验提供临床研究动物模型。; 李洋于玮何平许英晨陶莹吴涛戴洁伍冀湘; 关键词：结肠肿瘤 SW480细胞原位移植模型裸鼠

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吴涛