孙宏迪 作品数:10 被引量:32 H指数:3 供职机构: 中国检验检疫科学研究院 更多>> 发文基金: 艾滋病和病毒性肝炎等重大传染病防治专项 国家高技术研究发展计划 国家自然科学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 农业科学 更多>>
特异性等位基因PCR技术在昆虫抗药性研究中的应用 被引量:3 2011年 特异性等位基因PCR(PCR amplification of specific alleles,PASA)是一种快速检测DNA单个碱基突变的方法,也叫做等位基因特异扩增(allele-specific amplification,ASA)、等位基因特异性PCR(allele-specific PCR,ASPCR)和放大受阻突变体系(amplification refractory mutation system,ARMS)。 孙宏迪 曹晓梅 杨振洲关键词:等位基因特异性 PCR技术 抗药性 昆虫 碱基突变 O1群霍乱弧菌实时荧光定量PCR快速检测方法的建立 被引量:5 2010年 目的:建立针对O1群霍乱弧菌的实时荧光定量TaqMan PCR快速检测方法,并进行模拟粪便标本的检测评价。方法:根据O1群霍乱弧菌O抗原编码基因rfb的特异性序列设计引物和TaqMan探针,建立检测O1群霍乱弧菌的实时荧光定量TaqMan PCR快速检测方法,对所建立的方法分别进行实验室内的灵敏度及特异性评价;将O1群霍乱弧菌灭活菌株悬液倍比稀释后与健康成人新鲜粪便混匀,制备成模拟带菌者粪便标本,提取DNA,进行Taq-Man PCR检测,用以评价该方法。结果:建立了快速检测O1群霍乱弧菌的实时荧光定量TaqMan PCR方法,灵敏度为每反应体系104拷贝;该方法对其他14种肠道菌DNA没有扩增;该方法对模拟粪便标本的检测灵敏度为每反应体系102 CFU。结论:建立了一种快速、高效检测O1群霍乱弧菌的荧光定量PCR检测方法,该方法可用于O1群霍乱弧菌临床粪便标本的检测。 杜昕颖 孙宏迪 王玉飞 陈泽良 张伶 宋宏彬 孙岩松 黄留玉关键词:O1群霍乱弧菌 荧光定量PCR 上海世博安保早期军队“三防”医学救援人群心理健康现状调查研究 被引量:2 2011年 目的调查参与上海世博安保中军队"三防"医学救援人群在世博安保早期心理健康状况,探讨其原因,为建立世博安保中军队"三防"医学救援人群的心理健康教育方法提供数据支撑。方法采用SCL-90、SDS、SAS等量表对执行世博安保1个月内军队某部"三防"医学救援支队中技术组及士兵组进行整群抽样测试,将结果与军人常模进行比较,并通过人口学资料差异的比较探索影响心理健康的因素。结果技术组和士兵组SCL-90各因子得分明显好于军人常模,技术组好于士兵组(P<0.01),多重线性逐步回归分析结果发现,士兵组的心理状况与文化程度和队别密切相关。士兵组的焦虑、抑郁水平高于技术组。结论世博安保早期的军队"三防"医学救援人员的心理状况相对较好,不同的任务性质对技术组及士兵组心理健康影响较大,提示应开展针对性的心理干预。 石华 孙岩松 孙宏迪 熊鸿燕 杨振洲关键词:SCL-90 SDS SAS 副溶血弧菌实时荧光定量PCR快速检测方法的建立 被引量:8 2010年 目的建立一种快速检测副溶血弧菌的实时荧光定量PCR方法。方法根据副溶血弧菌tdh基因设计合成引物及TaqMan探针,利用阳性质粒和模拟标本建立副溶血弧菌实时荧光定量PCR检测方法。结果以副溶血弧菌DNA为模板克隆了tdh基因,得到阳性质粒。利用阳性质粒建立了定量PCR方法 ,得到标准曲线y=-4.9197x+58.72,决定系数(R2)为0.9864。此方法具有很好的特异性,在对15种肠道致病菌的检测中,只有副溶血弧菌基因组DNA的扩增结果为阳性。对粪便和食物模拟标本进行检测,敏感性均为102cfu/μl。此方法重复性较好,对4种浓度(105、104、103、102cfu/μl)的菌液各进行3次检测,结果均为阳性,且Ct值的变异系数<2%。结论建立了一种检测副溶血弧菌的荧光定量PCR方法 ,该法的敏感性和特异均较好,适用于快速、准确地检测食品和粪便中的沙门菌。 孙宏迪 杜昕颖 汪舟佳 王玉飞 宋宏彬 孙岩松 黄留玉 杨振洲 陈泽良关键词:实时定量聚合酶链反应 DNA探针 几种灭蟑毒饵的药效试验研究 目的:了解比较不同种类杀虫剂、不同有效成分灭蟑毒饵的药效情况。
方法:采用“农药登记·毒饵室内药效评价标准(GB/T17322.8-1998)”方法进行。
结果:所测样品致死时间来看,有机磷类与烟碱类... 黄清臻 韩华 史慧勤 石华 杨振洲 孙浩翔 孙宏迪关键词:药效试验 文献传递 家蝇对DDVP抗药性快速检测的方法及试剂盒 本发明公开了一种家蝇对DDVP抗药性快速检测的方法及试剂盒,该方法具体为:家蝇体内的乙酰胆碱酯酶AChE作为DDVP的作用靶标,AChE能够分解底物碘代硫化乙酰胆碱ATCh为乙酸和碘化硫代胆碱,利用该碘化硫代胆碱与巯基显... 曹晓梅 杨振洲 孙宏迪 张晓龙文献传递 布鲁菌抗原的快速克隆与高效表达 被引量:2 2010年 目的:通过Gateway技术构建布鲁菌抗原表达载体,并筛选出高效可溶性表达载体。方法:以山羊布鲁菌16M株染色体DNA为模板,扩增4个布鲁菌抗原基因BMEI2002、BMEI1069、BMEI1483和BMEI0748,利用GatewayBP反应将基因克隆到入门载体pDONR201中,构建重组质粒,然后用Gateway LR反应将基因重组到3种表达载体(pDEST17、pHXGWA、pHGGWA)中,构建相应的重组表达质粒,将重组质粒转化大肠杆菌ER2566(DE3)并诱导表达,分析利用3个不同载体所表达蛋白的表达量及表达形式。结果:利用BP反应构建了4个基因的重组质粒,用LR反应将这些基因分别克隆到表达载体,构建得到了相应的表达载体;诱导表达后的可溶性分析显示,含6×His和TRX标签的pHXGWA所表达的蛋白在表达量和可溶性方面均优于pDEST17和pHGGWA。结论:通过Gateway技术实现了布鲁菌抗原的快速克隆,筛选到的pHXGWA可作为后续大规模克隆表达载体,为布鲁菌抗原的大规模克隆表达和保护性抗原的筛选奠定了基础。 徐杰 于爽 付思美 钟志军 王玉飞 曲勍 汪舟佳 杜昕颖 孙宏迪 白耀霞 黄留玉 高岚 陈泽良关键词:GATEWAY 布鲁菌 蛋白表达 3种选育家蝇抗药性方法的比较 被引量:3 2011年 目的通过对家蝇进行抗药性选育,筛选能够快速提高抗药性水平的培育方法,为抗药性机制研究和抗药性治理提供技术支持。方法以敌敌畏为受试物,采用药膜法、点滴法和幼虫汰选法对实验室敏感品系家蝇进行抗药性选育,隔代测定半数致死剂量,计算抗性系数。结果采用药膜法培育家蝇抗药性6代后,抗性系数仅增长0.29倍;在此基础上改用点滴法继续选育5代,抗性系数为8.91;或改用幼虫汰选法选育5代,抗性系数为19.35,均明显高于单用药膜法继续选育5代的家蝇抗性系数(2.12)。结论幼虫汰选法能够快速高效提高家蝇抗药性水平,适宜作为抗药性家蝇的选育方法。 孙宏迪 史慧勤 杨振洲关键词:家蝇 抗药性 点滴法 疾病媒介蜱虫控制策略 被引量:8 2011年 蜱类是多种疾病的传播媒介兼贮存宿主。2010年在我国河南省发现了新型布尼亚病毒疾病,与蜱类关系密切。本文以蜱的生态为基础,简要阐述了蜱类综合控制的原则和方法,较为系统地介绍了有效的防治手段,旨在为蜱虫的防治提供参考。 杨振洲 陈国仕 李彦 孙宏迪关键词:昆虫媒介 家蝇M.domestica L.对敌敌畏抗药性选育及快速检测方法研究 背景家蝇Musca domestica Linnaeus (Housefly)是世界性分布的卫生害虫之一,可传播多种疾病,对人类危害极大。长期以来人们主要使用化学方法对家蝇进行防治,导致其对多种杀虫剂产生了抗药性,这严重... 孙宏迪关键词:家蝇 有机磷 抗药性 乙酰胆碱酯酶 ACE基因