孟仁
- 作品数：10 被引量：31H指数：3
- 供职机构：石河子大学动物科技学院更多>>
- 发文基金：国家重点基础研究发展计划国家自然科学基金国际科技合作与交流专项项目更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生生物学更多>>
- 犬瘟热病毒的分离与鉴定
- 2012年
- [目的]分离与鉴定犬瘟热病毒(CDV)的石河子流行株。[方法]对临床症状疑似犬瘟热和血清学(ELISA)检测为阳性的自然发病犬,取其淋巴结为病料,接种于非洲绿猴肾细胞系(Vero),进行病毒的分离;用RT-PCR检测感染CDV分离株特异性核酸。[结果]病料接种Vero细胞产生明显的细胞病变(CPE),用RT-PCR技术可扩增出CDV特异性核酸,扩增出的基因片段与预期设计的长度相同,所扩增的CDV分离株H基因片段与CDV C54标准强毒株核苷酸同源性为98.4%。[结论]该研究成功分离并鉴定了CDV石河子流行株,为犬瘟热(CD)的确诊提供了依据。
- 刘芳园乔军张银国倪伟孟仁于振兴
- 关键词：犬瘟热病毒
- 布鲁氏菌ery操纵子突变株生物学特性分析被引量：3
- 2013年
- 布鲁氏菌ery操纵子参与赤藓醇代谢.赤藓醇能够促进布鲁氏菌的生长.为进一步研究布鲁氏菌引发宿主流产的分子机制,采用基因重组技术构建布鲁氏菌ery操纵子启动子缺失株(△ery),通过体内外实验探讨布鲁氏菌ery操纵子的生物学功能.研究结果显示,获得了布鲁氏菌ery操纵子缺失株;布鲁氏菌ery操纵子缺失株侵染胚胎滋养层细胞脱落较亲本株明显下降;巨噬细胞CFU计数缺失株作用组和亲本株作用组差异显著(P<0.05).试管凝集和虎红平板实验结果显示均出现凝集现象;检测血清中细胞因子IL-10和TNF-α的表达水平,△ery诱导机体产生的IL-10和TNF-α明显低于亲本株(P<0.05).小鼠脾脏细菌CFU计数结果显示,△ery较亲本株毒力明显下降.本研究表明,布鲁氏菌ery操纵子启动子缺失株毒力较亲本株明显下降,为进一步揭示布鲁氏菌引起流产的致病机制提供了一定的理论依据.
- 桂丹张辉孟仁孟茹张豫孙志华蒋攀文李天森陈创夫
- 关键词：布鲁氏菌毒力
- 新疆羊口疮病毒分离鉴定及B2L基因分析与表达被引量：6
- 2013年
- 为研究新疆地区羊口疮(Orf)病毒(ORFV)的生物学特性及流行特征,本研究采集新疆地区疑似Orf的羔羊结痂病料,用MDBK传代细胞进行病毒分离培养及电镜观察,进行动物回归实验;对ORFV B2L基因进行PCR扩增,并构建B2L基因原核表达重组质粒pET-32a-B2L,转化至大肠杆菌BL21。将表达产物进行SDS-PAGE及western blot检测,结果证明所获得的分离株ORFV-shz为ORFV,与India 67/04分离株的亲缘关系最近,其重组B2L蛋白大小为60 ku,并具有良好反应原性。
- 李瑞芳李国华孟仁乔军张辉陈创夫
- 关键词：羊口疮病毒B2L基因原核表达反应原性
- RT-PCR诊断风疹及E1膜蛋白基因序列分析被引量：2
- 2002年
- 目的 应用RT -PCR方法扩增风疹病毒E1膜蛋白的核苷酸片段作为检测该病毒感染的靶目标。方法 对发疹后 4周 ,ELISA检测风疹病毒感染 (IgM阳性 )的病人血清样品提取RNA ,用RT -PCR方法扩增风疹病毒E1膜蛋白的 14 2bp核苷酸片段。测序并与英国代表株Thomas株的相应核苷酸序列进行比较。 结果 10份样品中 ,4份样品扩增到一条DNA片段。测序结果分析表明 3份样品扩增的风疹病毒E1膜蛋白的核苷酸片段序列与英国代表株Thomas株的相应核苷酸序列有 3个核苷酸的变异。一份样品扩增的风疹病毒E1膜蛋白的核苷酸片段序列与英国代表株Thomas株的相应核苷酸序列 4个核苷酸的差异。结论 该片段的核苷酸序列很稳定 ,适用于作为RT -PCR方法检测该病毒感染的靶目标。
- 白立石孟仁陶伟英David Brown
- 关键词：风疹病毒RT-PCRDNA序列分析风疹
- 布鲁氏菌S2308株ery启动子缺失株的构建及wboA抗原表位的分析验证
- 布鲁氏菌病（Brucellaabortus）是革兰氏阴性菌，专性细胞内寄生，可感染人类及多种动物引起发热、流产、不育、慢性关节炎及神经损伤等，导致世界范围严重的经济损失和公共卫生问题。目前尚没有有效的防治手段，疫苗接种是...
- 孟仁
- 关键词：布鲁氏菌病疫苗接种
- 文献传递
- 湖羊FecB基因在新疆细毛羊胎儿成纤维细胞中的表达被引量：4
- 2012年
- 为培育携带FecB多胎基因的高繁殖率新疆细毛羊,本研究提取了湖羊卵巢的总RNA,在此基础上反转录为cDNA,通过PCR扩增得到了湖羊的FecB基因,再与pMD19-T载体连接,构建了pMD19-T-FecB重组质粒。通过双酶切与真核表达载体pEGFP-N1连接,得到了pEGFP-N1-FecB真核表达载体。经测序与酶切证明,成功构建了pEGFP-N1-FecB真核表达载体,并转染新疆细毛羊胎儿成纤维细胞,通过药物筛选获得了表达湖羊FecB基因的阳性新疆细毛羊胎儿成纤维细胞,为培育高繁殖率的新疆细毛羊奠定基础。
- 于振兴贺志锐吾热力哈孜刘强孟仁姚建龙赛务加甫
- 关键词：FECB基因真核表达载体胎儿成纤维细胞湖羊新疆细毛羊
- 布鲁氏菌M5-90ΔWboA基因缺失株的构建及免疫效果的初步评价被引量：11
- 2011年
- 为获得毒力较弱并能区分自然感染和疫苗免疫的布鲁氏菌候选疫苗株,本研究用PCR方法扩增WboA基因的上下游同源臂序列,构建重组质粒pGEM-7zf-Δ WboA-Sac,电转化布鲁氏菌M5-90感受态细胞,筛选布鲁氏菌疫苗株M5-90的WboA基因缺失株,并对获得的M5-90Δ WboA遗传稳定性、毒力、免疫保护性、抗体水平等指标进行检测。实验结果表明M5-90Δ WboA株的毒力比M5-90株明显减弱,差异极显著(p<0.01),体液免疫和细胞免疫结果表明M5-90Δ WboA株与亲本M5-90株相比差异不显著(p<0.05),M5-90Δ WboA株和亲本株的保护率分别为10%和20%,表明M5-90Δ WboA株与M5-90株具有相似的保护性。凝集试验和western blot试验显示M5-90Δ WboA株免疫小鼠的血清反应结果为阴性。本研究构建的布鲁氏菌基因缺失株M5-90Δ WboA具有较好的遗传稳定性,毒力比亲本株更弱,免疫保护性与亲本株相当,并能以血清学检测方法区分野毒株感染和缺失疫苗株免疫的动物。
- 张艳陈创夫张辉张沾李志强张俊波孟仁王震
- 关键词：布鲁氏菌基因同源重组免疫原性
- 基质金属蛋白酶1体外释放试验对肺结核的诊断价值被引量：2
- 2012年
- 目的探讨测定基质金属蛋白酶1(MMP-1)水平对早期结核病的诊断价值。方法获取肺结核患者(20名)与健康人(20名)外周血淋巴细胞。分别用结核杆菌全菌与外周血淋巴细胞共培养12h,采用酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测培养上清液中MMP-1与IFN-γ浓度。结果结核组MMP-1与IFN-γ浓度明显高于健康对照组(P<0.001),检测敏感度与特异度分别为(88.9%,100%)和(85.7%,100%)。结论 MMP-1释放反应对结核病具有临床诊断价值。MMP-1与IFN-γ联合测定对早期结核病诊断具有临床意义,可用于早期结核的鉴别诊断。
- 鲁芝子陈创夫曹旭东郭飞孟仁
- 关键词：基质金属蛋白酶结核
- 布鲁氏菌2308ery基因启动子缺失株的构建及鉴定被引量：1
- 2012年
- 目的:构建布鲁氏菌2308株ery基因启动子缺失株。方法:用PCR方法从亲本株2308上扩增ery基因启动子侧翼序列,将该片段与pMD19-T连接,亚克隆为自杀载体pGEM-7zf-Δery-sacB。将自杀载体电转化布鲁氏菌感受态细胞中经同源重组后,分别用100 mg/L氨苄和7%蔗糖筛选。对获得的基因缺失株进行RT-PCR鉴定和遗传稳定性检测。结果:成功获得ery基因启动子缺失株,2308Δery基因启动子缺失株未扩增出eryA基因。并且该缺失株在10代以内未发生回复突变。结论:成功构建2308Δery基因启动子缺失株,为研究布鲁氏菌的毒力基因及其流产机制奠定基础。
- 孟仁陈创夫张辉王远志郭飞鲁芝子李瑞芳
- 关键词：布鲁氏菌基因缺失株反转录PCR
- 手足口病患儿EV71的检测及分离鉴定被引量：2
- 2011年
- 目的了解手足口病患儿感染EV71的情况,为科学防治疾病提供依据。方法采集手足口病患儿的咽拭子标本,接种于RD细胞,出现致细胞病变效应(CPE),运用RT-PCR方法,EV71引物检测样本和细胞培养物上清。结果标本直接用RT-PCR扩增,阳性率为30%(6/20),细胞培养后出现CPE的阳性率为45%(9/20),培养后经RT-PCR扩增阳性率为70%(14/20)。结论病毒分离和RT-PCR方法联合应用可以提高肠道病毒EV71的检出率,RT-PCR方法可以满足病毒流行期间同时处理大量样本的需要。
- 刘芳陈淑红陈露菲张静李冀宏孟仁
- 关键词：手足口病病毒分离
