崔杰锋
- 作品数：7 被引量：12H指数：2
- 供职机构：复旦大学附属中山医院肝癌研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划广西壮族自治区自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 醛酮还原酶1B10基因沉默对MHCC97H细胞生长和基因表达的影响被引量：6
- 2010年
- 目的 探讨醛酮还原酶1B10（AKR1B10）基因在肝癌发生和发展过程中的作用及其机制.方法 化学合成AKR1B10序列特异性小干扰RNA,用脂质体LipofectaminrTM2000介导转染人肝癌细胞系MHCC97H,设实验组转染AKR1B10-小干扰RNA,设阴性对照组转染非编码序列双链小RNA,设空白对照组不作转染.用实时定量PCR、Western blot和酶活性检测法检测AKR1B10 mRNA和蛋白的表达情况,用细胞计数试剂盒CCK-8检测转染细胞的生长增殖变化,用流式细胞仪检测膜联蛋白V/碘化丙啶双标记的凋亡细胞变化,并用实时定量PCR检测c myc、c-fos、N-ras、ki-67、caspas 3、bax肿瘤相关基因的表达变化.用析因设计的方差分析和完全随机方差分析进行组间比较,LSD法进行多重比较.结果 转染24、48 h和72 h后,AKR1B10 mRNA的相对表达量在实验组分别为0.382±0.048、0.098±0.008和0.257±0.032;阴性对照组分别为0.797±0.092、0.742±0.086和0.794＋0.105;空白对照组分别为0.808±0.118、0.716±0.083和0.706±0.067.不同转染时间和不同实验组中AKR1B10 mRNA的表达比较,F值分别为11.650和566.971,P值均＜0.01,差异均有统计学意义.转染24、48 h和72 h后,实验组的AKR1B10mRNA表达较空白对照组被明显抑制,抑制率分别为52.7%±5.6%、86.3%±4.4%和63.7%±6.1%,以转染48 h的抑制率最高（t=80.68,P＜0.01）;阴性对照组的表达水平接近空白对照组（P＞0.05）.Western blot结果显示,转染24、48 h和72 h后,实验组的AKR1B10蛋白表达水平均有下降,其中以转染72 h的降低幅度最大;阴性对照组的表达水平接近空白对照组.转染24、48、72h和96h后,实验组450nm处吸光度值分别为1.465±0.040、1.724±0.106、1.934±0.069和2.377±0.163;阴性对照组分别为1.528±0.044、2.019±0.091、2.711±0.204、3.151±0.159;空白对照组分别为1.567＋0.057、2.102±0.099、2.642±0.198、3.069±0.180;不同转染时间和不同实验组间比较,F值分别为128.092、36.535,P值均＜0.0
- 韦薇梁宏洁崔杰锋郭坤康晓楠曹骥苏建家李瑗刘银坤
- 关键词：肝细胞基因转染RNA干扰
- 一种肿瘤标志物-血清蛋白指纹图谱的检测方法
- 本发明属生物技术领域，涉及一种肿瘤标志物-血清蛋白指纹图谱的检测方法。具体涉及血清蛋白质的表面增强激光解析离子化-飞行时间质谱测定和特异性蛋白峰比较识别的方法，包括血清样本的采集标准，化学芯片的选择、处理和阅读，测定条件...
- 刘银坤黄成崔杰锋樊嘉周俭汤钊猷
- 文献传递
- 一种肿瘤标志物－血清蛋白指纹图谱的检测方法
- 本发明属生物技术领域，涉及一种肿瘤标志物－血清蛋白指纹图谱的检测方法。具体涉及血清蛋白质的表面增强激光解析离子化－飞行时间质谱测定和特异性蛋白峰比较识别的方法，包括血清样本的采集标准，化学芯片的选择、处理和阅读，测定条件...
- 刘银坤黄成崔杰锋樊嘉周俭汤钊猷
- 文献传递
- 极低频电磁场作用下人胚胎眼巩膜成纤维细胞的分子病理改变被引量：6
- 2012年
- 背景极低频电磁辐射产生的热效应与人类癌症的关系及其对眼表的影响已有较多研究。但眼球暴露于极低频电磁场（ELF．EMFs）下是否会导致巩膜的病理改变，从而影响近视的发生、发展目前鲜见报道。目的研究ELF—EMFs作用下人胚胎眼巩膜成纤维细胞（HFSFs）的分子病理改变及其在近视发生发展中的可能机制。方法对HFSFs进行体外培养和传代，根据细胞是否暴露于50Hz电磁场分为暴露组和对照组，应用实时定量聚合酶链反应（real—timePCR）法检测不同磁场强度（0、0．1、0．2、0．5、1．0mT）、不同暴露时间（0、6、12、24、36、48h）下HFSFs中I型胶原蛋白（COL1A1）、基质金属蛋白酶2（MMP-2）的基因表达水平变化，同时应用CCK18法检测两组HFSFs的细胞增生情况，并以细胞免疫荧光法对HFSFs中COL1A1和MMP-2蛋白的表达进行确认。结果与对照组相比，暴露组在磁场强度0．2mT下作用6h可见HFSFs中COL1A1mRNA的表达下调，差异有统计学意义（对照组：0．099±0．008，暴露组：0．050±0．004；P=0．009），且表达量随着磁场强度的增加而减少；在磁场强度O．1mT下暴露24h，HFSFs细胞中的MMP-2mRNA表达上调，差异有统计学意义（对照组：0．009＋0．001，暴露组：0．018±0．003；P=0．038），并随着暴露时间的延长表达增强。磁场强度0．2mT下暴露24h，HFSFs细胞增生的吸光度（A450）值明显下降，差异有统计学意义（P=0．009）；免疫荧光分析也显示暴露组HFSFs细胞中COL1A1表达下调，MMP-2表达上调。结论ELF—EMFs暴露可在一定范围内影响体外培养的HFSFs的增生及COL1A1的合成，可能是诱导巩膜发生病理性重塑进而导致近视发生、发展的危险因素之一。
- 王洁崔杰锋朱煌赵立全冯婕妤叶胜龙
- 关键词：极低频电磁场I型胶原蛋白基质金属蛋白酶2
- 一种测定血清蛋白质指纹图谱的方法
- 本发明属生物技术领域，涉及应用血清蛋白质组学的方法测定血清蛋白质指纹图谱的方法。具体涉及血清蛋白质的表面增强激光解析离子化-飞行时间质谱测定和肝病的特异性蛋白峰比较识别的方法。经对查体各项指标正常的正常健康人，ELISA...
- 刘银坤崔杰锋康晓南汤钊猷
- 文献传递
- 一种测定血清蛋白质指纹图谱的方法
- 本发明属生物技术领域，涉及应用血清蛋白质组学的方法测定血清蛋白质指纹图谱的方法。具体涉及血清蛋白质的表面增强激光解析离子化－飞行时间质谱测定和肝病的特异性蛋白峰比较识别的方法。经对查体各项指标正常的正常健康人，ELISA...
- 刘银坤崔杰锋康晓南汤钊猷
- 文献传递
- 热休克蛋白27在制备血清学判别、诊断肝癌药物中的用途
- 本发明属生物技术领域，涉及一种热休克蛋白27的医用用途，本发明应用蛋白质组学的方法，对动物模型实验，结果表明HSP27高表达；免疫组织化学检测结果显示HSP27定位于肝细胞胞浆内，验证了其表达水平的高低与肝癌转移潜能相关...
- 刘银坤冯钜涛崔杰锋宋海燕汤钊猷杨芃原
- 文献传递
