张晨婷
- 作品数：21 被引量：27H指数：3
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- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 小型动物肺脏灌流固定装置的研制和应用被引量：1
- 2013年
- 目的建立控制简便、稳定且可规范化操作的适合小型实验动物肺脏灌注固定装置。方法该装置包括用于放置动物肺脏的工作台、用于盛放固定液的灌流容器、灌流管、带刻度的支撑杆和用于固定灌流容器的固定夹等，能有效实施小动物肺脏的灌注固定。应用该肺脏灌流固定装置分别对大鼠及小鼠肺脏进行灌注固定，石蜡包埋后进行切片，HE染色，与常规直接固定方法进行比较。结果该小型动物肺脏灌流固定装置可快速、便捷、标准化地对小鼠、大鼠肺脏进行固定，并且灌注固定的肺脏石蜡包埋切片后HE染色，肺脏组织、小血管及气管组织结构清晰，背景干净。结论研制的小型动物肺脏灌流固定装置应用方便，调节灵活，结构简单，成本低，易操作，能对小型动物肺脏有效进行固定，经灌注固定肺组织切片明显优于直接固定法。
- 陈豫钦付欣赵磊刘蓉江倩张科东张晨婷王健卢文菊
- 关键词：病理实验动物肺脏
- 瞬时受体电位阳离子通道蛋白6合成肽的设计与合成被引量：3
- 2011年
- 目的预测瞬时受体电位阳离子通道蛋白6(TRPC6)的抗原表位特性,筛选合适的TRPC6氨基酸序列合成多肽,用于制备抗TRPC6合成肽单克隆抗体。方法根据TRPC6氨基酸序列,采用IEDB分析及蛋白质软件(Lasergene710WinInstall)分析,预测TRPC6表面性、抗原性、亲水性及可能的二级结构性质,以此筛选合成多肽序列。结果确定合成多肽为TRPC6的胞外段565-579氨基酸序列,其表露性预测值1.000;柔韧性预测值1.008;β-转角预测值1.022;抗原性预测1.034;亲水性预测2.043。结论所确定的TRPC6多肽序列表位预测符合要求,为TRPC6合成肽制备抗单克隆抗体提供了一条有效的途径。
- 张萃梅俪凡卢文菊张晨婷刘晓波黄超贤
- 关键词：TRPC6合成肽计算机分析
- 小鼠远端肺动脉平滑肌细胞的原代培养方法及其功能学特性鉴定被引量：1
- 2017年
- 目的建立小鼠远端肺动脉平滑肌细胞（PASMCs）的体外分离及原代培养方法，并鉴定其功能学特性。
方法采用体视显微镜下分离纯化小鼠远端肺动脉平滑肌组织，并采用复合酶联合消化法消化后进行体外培养；倒置显微镜下观察小鼠原代远端PASMCs的生长特点；免疫荧光染色法对细胞进行鉴定；荧光显微镜下观察以Fura－2－AM荧光探针示踪的钙离子，检测细胞高钾反应及钙池操纵性钙内流反应，评价细胞活力。
结果原代小鼠远端PASMCs分离培养6 d时细胞生长融合度达80%，生长状态较好，呈典型的谷－峰状形态；细胞α－肌动蛋白（α－SMA）染色阳性率为95%以上。利用含钙高钾Krebs液（钾离子浓度为60 mmol/L）灌流原代小鼠远端PASMCs，1 min后95%以上PASMCs细胞内钙离子浓度迅速上升，细胞内钙离子浓度（Δ[Ca2＋]i）变化值〉50，证明原代小鼠远端PASMCs中电压依赖性钙通道（VDCC）具有良好的功能；利用含钙Krebs液灌流5 min、无钙环匹阿尼酸和Nif Krebs液灌流10 min、以含钙环匹阿尼酸和Nif Krebs液灌流10 min及含钙Krebs液灌流10 min检测原代小鼠远端PASMCs中基础钙及钙池操纵性钙内流（SOCE），结果显示原代小鼠远端PASMCs对灌流液反应良好，钙离子浓度出现双峰变化，表明细胞中钙池操纵性钙通道（SOCC）功能优良。
结论本实验通过复合酶消化法成功建立稳定可靠的原代小鼠肺动脉平滑肌体外培养方法，可获得纯度较高，功能良好的PASMCs，为肺血管疾病的研究提供了良好的细胞工具。
- 李美婵陈豫钦张晨婷江倩卢文菊王健
- 关键词：原代培养电压依赖性钙通道
- 骨形成蛋白4抑制脂多糖介导的气道炎症反应被引量：1
- 2015年
- 骨形成蛋白4（BMP4）属于TGF—β超家族，目前关于BMP4在成年人肺部炎症中的作用尚不明确，本研究主要探讨BMP4在脂多糖诱导的急、慢性气道炎症中的作用。
- 李征途王健王彦姜华徐小明张晨婷李德富徐楚毅张科东齐亚飞巩雪芳唐春钟南山卢文菊
- 关键词：骨形成蛋白4气道炎症反应脂多糖介导慢性气道炎症BMP4超家族
- 大鼠肺动脉和主动脉成纤维细胞的原代培养及生物学行为研究被引量：1
- 2017年
- 目的 建立大鼠肺动脉和主动脉外膜成纤维细胞的体外分离、培养及鉴定的方法,并对其细胞形态和成纤维细胞转化成肌成纤维细胞的特征进行观察。方法 通过精分肺动脉和主动脉, 剥取外膜,用10%的胎牛血清低糖 DMEM 培养基诱导细胞爬出生长。倒置显微镜下观察成纤维细胞形态,并对细胞进行免疫荧光鉴定。通过对α-平滑肌肌动蛋白 （α-SMA）表达的观察确定传代细胞是否转化为肌成纤维细胞。结果 成纤维细胞能够迅速从剥取的外膜中爬出生长,波形蛋白细胞免疫荧光染色为阳性。主动脉成纤维细胞和肺动脉成纤维细胞形态差别大,前者为铺路石状,后者呈细长梭形。2种成纤维细胞经传代皆能转化为肌成纤维细胞,免疫荧光染色可见α-SMA 大量表达,前者包围着细胞核呈条索状非定向分布,后者平行于细胞长轴呈细丝状表达。结论 该方法所获得的成纤维细胞纯度高,可在体外稳定培养。本研究首次发现了肺动脉和主动脉成纤维细胞形态学及生物行为上的差别,为细胞水平研究主动脉和肺动脉血管重塑,胶原沉积等相同或不同的病理机制提供了充足可靠的靶细胞模型。
- 张晨婷李美婵陈豫钦江倩云昕吴雄婷卢文菊王健
- 关键词：成纤维细胞Α-平滑肌肌动蛋白波形蛋白
- 钙池操纵性钙内流在非小细胞肺癌中的作用被引量：1
- 2015年
- 目的探讨钙池操纵性钙通道（store-operated calcium channel,SOCC）介导的钙池操纵性钙内流（storeoperated calcium entry,SOCE）在非小细胞肺癌中的作用。方法应用实时定量PCR方法和Western blot方法检测非小细胞肺癌组织和A549肺腺癌细胞中SOCC的mRNA和蛋白表达。应用Fura-2Am荧光素方法检测A549细胞的SOCE;经过不同浓度SOCE抑制剂处理A549细胞后,应用WST-1比色法和Transwell方法检测A549细胞的增殖和侵袭能力改变。结果在非小细胞肺癌组织和A549细胞中有STIM1、ORAI1～3的mRNA和STIM1、ORAI1的蛋白表达,分化差的肿瘤组织比分化好的高表达ORAI1 mRNA（P=0.028）;A549细胞中存在SOCE,并且SOCE抑制剂SKF-96365或Ni Cl2可抑制A549细胞的增殖和侵袭。结论非小细胞肺癌组织中表达STIM1和ORAI1～3。A549肺腺癌细胞存在SOCE,并且由SOCC介导的SOCE在肺癌细胞生长和转移过程中起着重要的作用。
- 杨海虹徐小明张晨婷邓秋华
- 关键词：钙通道钙肿瘤侵润
- 应用熏烟联合脂多糖方法建立慢性阻塞性肺疾病相关肺动脉高压小鼠模型被引量：5
- 2014年
- 目的建立一种慢性阻塞性肺疾病相关肺动脉高压（COPD—PAH）小鼠模型。方法模型组小鼠第1天和第14天鼻内滴注脂多糖（LPS），其余时间每天熏烟4h，上下午各2h，10支香烟／h，6d／周，持续熏烟3个月。对照组小鼠不做任何干预。建模期间监测小鼠体质量变化。建模结束后，检测以下指标：肺功能和右心压力；小鼠支气管肺泡灌洗液中炎症细胞总数和细胞类型；用EI，ISA方法检测肺组织中细胞因子KC和黏蛋白MucSac的水平。并观察气道和肺组织病理改变。结果与对照组相比，模型组小鼠体质量和动态肺顺应性显著降低，吸气阻力、右心室平均压和右心室重量／体质量比等显著增加。模型小鼠支气管肺泡灌洗液中自细胞总数升高，以巨噬细胞为主，并伴随中性粒细胞明显增加。肺组织KC和Muc5ac蛋白均较对照组明显增多。肺组织切片PAS染色显示模型组杯状细胞增生。此外，在模型组小鼠肺切片中观察到炎症浸润，气管壁和肺小血管壁平滑肌增厚，气管基底层下胶原沉积，提示气管和肺血管重塑的发生。结论用这种熏烟结合气道内滴注LPS的方法可以在短期内建立COPD-PAH小鼠模型。
- 李征途徐小明巩雪芳张科东张晨婷姜华陈豫钦王胜卢文菊王健
- 关键词：熏烟脂多糖
- 用于检测BMPR2基因突变的引物组、该引物组的用途及包含该引物组的试剂盒
- 本发明公开了用于检测BMPR2基因突变的引物组，至少包括BMPR2基因第1至第13外显子区、3’UTR、5’UTR和启动子中任一区域对应的PCR扩增引物组和PCR测序引物组。本发明还公开了所述引物组的用途、包含所述引物组...
- 卢文菊张晨婷王健
- 文献传递
- 用于检测ALK- 1基因突变的引物组、该引物组的用途及包含该引物组的试剂盒
- 本发明公开了用于检测ALK-1基因突变的引物组，至少包括ALK-1基因第1到第10外显子区，3’UTR和启动子中任一区域对应的PCR扩增引物组和PCR测序引物组。本发明还公开了所述引物组的用途、包含所述引物组的试剂盒以及...
- 卢文菊张晨婷王健
- 文献传递
- 一种熏烟小鼠慢性阻塞性肺疾病模型的建立及鉴定被引量：11
- 2012年
- 目的建立一种熏烟诱导的小鼠慢性阻塞性肺疾病（c0PD）模型。方法将小鼠随机分为COPD模型组和正常对照组，模型组小鼠每天熏烟两次，每次2h，每周熏烟6d，香烟剂量为9支／h。模型制备期间，每星期称量一次体质量，每个月检测一次小鼠肺功能。对照组小鼠不做任何干预。熏烟满6个月后，行肺功能检测，并检测小鼠支气管肺泡灌洗液（BALF）中炎症细胞数和黏蛋白MUC5AC水平，观察气道和肺组织病理改变等。结果与对照组相比，模型组小鼠体质量明显降低（P〈0．05），吸气阻力明显增加（P〈0．05），吸气峰流速、呼气峰流速和动态肺顺应性明显降低（P〈O．05）；肺泡灌洗液中白细胞总数，中性粒细胞、巨噬细胞和淋巴细胞分类计数与对照组相比，均明显增加；模型组小鼠肺切片HE染色显示炎症浸润，PAS染色显示气道上皮中出现大量黏液分化细胞，BALF中MUC5AC表达水平较正常组增加（P〈0．01）。结论用这种熏烟的方法所建立的小鼠COPD模型符合人类COPD的病理和功能改变，是建立小鼠COPD模型的理想方法。
- 张科东马冉李征途徐小明张晨婷巩雪芳齐亚飞陈豫钦姜华郑则广王健钟南山卢文菊
- 关键词：熏烟慢性阻塞性肺疾病模型
