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人酪酪肽及其衍生物的克隆、表达及活性测定: 2011年; 酪酪肽(peptide tyrosine tyrosine,PYY)是存在于机体肠道的肽类激素,有PYY1-36和PYY3-36两种形式,后者可以降低个体食欲并减少食物摄入。分别通过人工合成基因和PCR定点突变的方法,得到PYY3-36衍生物PYY3-36-G ly37及PYY3-36的基因,然后克隆到pET32a(+)表达载体中,转化大肠杆菌并进行诱导表达。通过亲和层析得到融合蛋白,经肠激酶酶切和二次亲和层析得到目的多肽。在昆明鼠体内检测二者生物活性,结果显示剂量为800μg/kg时PYY3-36及PYY3-36-G ly37均可抑制昆明鼠的摄食,且抑制作用可达9h,而PYY3-36-G ly37组的平均抑制率可达50%,明显高于PYY3-36。; 王小溪李娟劳勋张洪丹黄静吴自荣; 关键词：酪酪肽原核表达生物活性

一种小分子γ-聚谷氨酸或其Na+形式γ-聚谷氨酸盐的阻垢用途: 本发明涉及一种新型生物可降解型阻垢剂小分子γ－聚谷氨酸或其Na+形式γ－聚谷氨酸盐阻止金属离子Ca2+、Mg2+或Ba2+等在物体表...; 孙昭吴自荣黄静马骁骏杨燕张洪丹; 文献传递

重组人GIP衍生物的克隆、表达、纯化及活性研究被引量：2: 2010年; 葡萄糖依赖性促胰岛素释放肽(glucose-dependent insulinotropic polypeptide,GIP)具有促胰岛素分泌的作用,但因体内半衰期短而限制了其应用。对二肽酶4(dipeptidase IV,DPP IV)识别位点等氨基酸进行改造可有效延长其半衰期。通过人工合成基因或PCR定点突变的方法合成GIP不同突变体基因,将其克隆到大肠杆菌表达载体pET32a(+)中进行诱导表达,通过亲和层析,纯化获得各对应的多肽。经肠激酶酶切后,分别在昆明鼠及糖尿病模型鼠体内研究其生物活性。结果显示突变体mGIP243在昆明鼠体内具有显著的降血糖活性,当给药剂量为48nmol/kg时,其体内降血糖活性可延长至90分钟,相对于将第二位上的丙氨酸突变成丝氨酸的mGIP2和天然GIP半衰期显著延长。GIP类似物mGIP243在2型糖尿病模型鼠中也有降血糖活性,使其可能成为治疗糖尿病的候选药物。; 宋文程金明飞李冬青赵丽芬张洪丹黄静吴自荣; 关键词：原核表达血糖

PACAP及其衍生物的克隆、表达、纯化和生物学活性研究: 垂体腺苷酸环化酶激活多肽(pituitary adenylate cyclase-activating polypeptide，PACAP)是血管活性肠肽(vasoactive intestinal polypeptid...; 张洪丹; 关键词：垂体腺苷酸环化酶激活多肽长期给药降血糖

一种新型脂肽的分离纯化及其生物学活性: 2010年; 目的从表皮葡萄球菌发酵液中分离纯化脂肽粗提物,并分析其生物学活性。方法通过酸沉淀分离和有机溶剂抽提的方法,从表皮葡萄球菌1457发酵液中得到脂肽粗提物。利用排油圈试验和薄层色谱(TLC)分析脂肽粗提物的性质,HPLC分析其纯度。小鼠皮下注射脂肽粗提物后,再经皮肤感染金黄葡萄球菌,检测其对小鼠体内白细胞的影响及抑菌作用;实时定量PCR检测其对小鼠体内β防御素14(mBD14)表达的影响。结果所得脂肽粗提物F2的排油活性大于F1;TLC分析显示,F2中存在性质相近的脂肽类同系物,纯度>60%;脂肽粗提物能减缓小鼠因感染金黄葡萄球菌引起的急性炎症,降低由感染引起的白细胞增多,并通过上调mBD14的表达抑制细菌在皮肤内的增殖。结论已从表皮葡萄球菌发酵液中成功获得了具有生物学活性的新型脂肽粗提物。; 杨燕张洪丹王小溪蒋子威黄静赖玉平吴自荣; 关键词：脂肽 Β防御素

Exendin-4衍生物的复合物及其制备方法和应用: 本发明公开一种Exendin-4衍生物的复合物及其制备方法和应用，该Exendin-4衍生物的复合物是由Exendin-4衍生物与经马来酰亚胺活化的单甲氧基聚乙二醇组成，该Exendin-4衍生物的复合物的生物稳定性高，...; 杨燕黄静张洪丹蒋子威劳勋吴自荣; 文献传递

垂体腺苷酸环化酶激活多肽38及其衍生物的表达、纯化和活性: 2011年; 目的提高垂体腺苷酸环化酶激活多肽38(Pituitary adenylate cyclase-activating polypeptide 38,PACAP38)的体内稳定性、延长其生物学活性。方法对PACAP38的氨基酸序列进行改造(命名为PACAP38衍生物cPACAP38),并根据大肠杆菌密码偏爱性设计并合成PACAP38及其衍生物的基因片段;分别将两基因片段克隆至表达载体pET-32a(+)中,转化大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导表达;表达的融合蛋白经镍离子亲和层析纯化,肠激酶切割获得目的多肽;通过小鼠饮食抑制试验比较两多肽的体内活性;长期给药观察小鼠腹腔糖耐量及小鼠血清甘油三酯、HDL、LDL和胆固醇的变化。结果两种融合蛋白Trx-PACAP38和Trx-cPACAP38的表达量分别占菌体总蛋白的22%和25%,为可溶性表达,纯化后纯度分别为90%和98%;PACAP38及cPACAP38均有抑制小鼠饮食的作用,cPACAP-38的效果优于PACAP38;连续给药10 d后,小鼠腹腔糖耐量、血清甘油三酯、HDL、LDL、胆固醇均无明显变化。结论已成功获得体内活性更稳定的PACAP38衍生物,为PACAP38的基础研究及应用奠定了基础。; 张洪丹肖磊赵丽芬王小溪黄静吴自荣; 关键词：垂体腺苷酸环化酶激活多肽长期给药葡糖耐量试验

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张洪丹