徐春雷
- 作品数：5 被引量：44H指数：3
- 供职机构：华中农业大学植物科学技术学院更多>>
- 发文基金：湖北省自然科学基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 油菜油体钙蛋白基因BnClo1的克隆和表达被引量：14
- 2008年
- 应用同源序列克隆法设计同源简并引物,结合RT-PCR和RACE-PCR技术,从甘蓝型油菜中分离克隆了编码28.1kD油体钙蛋白(caleosin)的基因BnClo1。其全长1058bp的BnClo1 mRNA(GenBank中序列号为AY966447)包含完整的开放阅读框和3′末端Poly(A)尾巴结构,染色体DNA结构上含6个外显子和5个内含子。Northern杂交结果表明,油菜中BnClo1在种子形成中期开始丰富表达,在种子形成后期,即种子开始脱水成熟时期,高量稳定地表达。半定量PCR结果显示,BnClo1在油菜种子吸水膨胀后前2d的茎中明显表达。证明在油菜种子发育期间,BnClo1对mRNA的转录表达是由胚胎发育来调控的,具有显著的时空特性,并与油体的形成和积累密切有关。推测的caleosin蛋白为245个氨基酸残基(GenBank中序列号为AAY40837)组成的两性蛋白质,主要含3个结构域即由N末端1～16位氨基酸残基组成的α-螺旋和17～61位氨基酸残基组成的强亲水性的随机卷曲构成的N-末端亲水性结构域;由80～120位氨基酸残基组成的中间疏水性结构域和C-末端亲水性结构域。N-末端亲水性结构域包含一个潜在的结合Ca2+的EF-手结构。中间疏水性结构域包含一个潜在的脯氨酸-结(proline-knot)模体,在92～114位氨基酸残基组成的α-螺旋跨膜区域,推测在caleosin蛋白与单层磷脂层和油体锚定结合上及增加种子油体的稳定性上起着重要的作用。
- 丁勇陈庆波徐春雷常玮甘莉
- 关键词：RACE基因克隆NORTHERN杂交
- 植物油体及其相关蛋白的研究进展被引量：15
- 2008年
- 油体是植物种子贮脂的亚细胞颗粒,作为植物体中最小的细胞器贮存脂类(主要为三酰甘油),为随后的生命活动及活跃的代谢过程提供能量。油体结合蛋白是依附于油体表面的一类蛋白质,包括油质蛋白、油体钙蛋白、油体固醇蛋白-A和油体固醇蛋白-B。本文综述了植物油体的亚细胞结构、化学组成、大小及其类型,油体结合蛋白的结构特征与功能及其编码基因的表达调控等的研究进展。讨论了植物油体作为一种新型植物生物反应器在生物工程上的应用前景和存在的问题。
- 丁勇徐春雷甘莉
- 甘蓝型油菜steroleosin基因的克隆与表达
- 油体固醇蛋白/(steroleosin/)是油体膜结合的一种微量的固醇结合脱氢还原酶,根据其分子量分为固醇蛋白A和B。甘蓝型油菜steroleosin-A和steroleosin-B基因cDNAmRNA序列登陆GenBa...
- 徐春雷
- 关键词：甘蓝型油菜基因克隆与表达
- 文献传递
- 菌核病菌诱导甘蓝型油菜差异表达Rsk基因的初步分析
- 本文以抗(耐)菌核病显著强于中油821的中 R-888作供体亲本,中油821作受体亲本和回交亲本所创建的甘蓝型油菜近等基因系为材料,克隆了菌核病菌诱导差异表达基因的全长,分析了近等基因系之间在不同生长时期以及不同部位间该...
- 张玉张成桂丁勇徐春雷杨鸯鸯甘莉
- 关键词：甘蓝型油菜近等基因系
- 文献传递
- 甘蓝型油菜Cu/ZnSOD和FeSOD基因的克隆及菌核病菌诱导表达被引量：19
- 2009年
- 依据拟南芥、芥菜型油菜和白菜已知超氧化物歧化酶(SOD)保守序列设计引物,用同源序列法和RT-RACE技术克隆甘蓝型油菜Cu/ZnSOD和FeSOD基因,经序列分析和基因片段拼接,得到Cu/ZnSOD和FeSOD基因的全长cDNA,分别为756 bp(GenBank登录号AY970822)和1 037 bp(GenBank登录号EF634058)。以cDNA序列设计引物,获得1 322 bp的Cu/ZnSOD基因组DNA(GenBank登录号DQ431853)和1 659 bp的FeSOD基因组DNA(GenBank登录号EF634057)。生物信息学分析表明,Cu/ZnSOD基因ORF框长459 bp,编码152个氨基酸残基的蛋白质,在基因组序列结构上具有7个外显子和6个内含子。而FeSOD基因ORF框长792 bp,编码263个氨基酸残基的蛋白质,在基因组序列结构上具有8个外显子和7个内含子。二者外显子和内含子交接处完全符合GT/AG规则。利用获得的Cu/ZnSOD的cDNA片段作探针,对菌核病菌诱导甘蓝型油菜叶片的mRNA进行Northern blot分析,结果显示在同一品种(系)中菌核病菌诱导后Cu/ZnSOD mRNA表达量比诱导前升高,抗(耐)型油菜Cu/ZnSOD mRNA表达量明显高于感病型。油菜叶片SOD酶活性分析结果也获得了完全一致的结果。以上结果表明,甘蓝型油菜SOD基因与菌核病抗性相关。
- 杨鸯鸯李云丁勇徐春雷张成桂刘英甘莉
- 关键词：甘蓝型油菜菌核病菌基因表达分析
