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K562细胞药物诱导性耐药的机制探讨被引量：1: 2009年; 在白血病细胞多药耐药（MDR）产生机制的研究中，mdr1基因编码的P糖蛋白（P—gp）高表达是研究最深入的机制之一。阿霉素是临床常用的化疗药物之一，属蒽环类，抗瘤谱广，它能抑制DNA和RNA的合成，属周期非特异性药物。临床工作中，化疗药物诱导的肿瘤细胞耐药时常发生，我们以阿霉素作用于人白血病细胞系K562细胞，观察阿霉素诱导细胞耐药产生的规律，初步探讨耐药形成的机制。; 许文林秦茹娟陈巧云方丽丽陈琛房新建沈慧玲; 关键词：白血病细胞多药耐药 K562细胞药物诱导性肿瘤细胞耐药化疗药物诱导人白血病细胞系

白血病细胞YB-1基因功能的初步研究被引量：1: 2009年; 目的探讨YB-1基因对白血病K562／A02细胞株基因表达谱及细胞生物学行为的影响。方法采用脂质体介导的方法将已构建的人YB—1基因特异性短发卡RNA（short hairpin RNA，shRNA）及随机片段HK的真核表达载体转染入K562／A02细胞中。采用基因芯片技术比较阳性转染组与对照组细胞的基因表达的差异，逆转录一PCR验证部分基凶表达的改变。应用甲基氮唑蓝比色法和细胞周期测定分析对白血病细胞增殖的影响，AnnexinV检测白血病细胞的凋亡程度。结果阳性转染的3组细胞YB-1基因和蛋白的表达量明显低于随机片段组和未转染细胞；芯片中共有表达差异的基因252条，其中143条表达下调，109条表达上调，包括转录调节、蛋白翻译合成、细胞增殖、细胞凋亡、细胞的免疫调节、细胞信号和传递蛋白表达等基因。逆转录PCR证实CARD8基因表达上调，RHOC基因表达下调，和芯片检测结果一致。生长曲线提示阳性转染组细胞生长缓慢，细胞周期动力学分析示阳性转染组G1期细胞增多，G2期与S期细胞显著减少；在小剂量三氧化二砷作用下，阳性转染组细胞的凋亡数量明显高于对照组细胞。结论YB-1基因下调可引起白血病K562／A02细胞株基因表达谱的改变，这些基因的改变可能对白血病细胞增殖、细胞周期和凋亡等生物学行为产生一定的影响。; 许文林周磊磊陈巧云陈琛方丽丽房新建沈慧玲; 关键词：RNA干扰基因芯片凋亡

YB-1蛋白对白血病细胞K562/A02生物学行为的影响: 2011年; 本研究探讨YB-1基因表达下调后对白血病细胞K562/A02生物学行为的影响及其机制。采用脂质体介导的方法将已构建的人YB-1基因特异性shRNA及随机片段HK的真核表达载体转染进白血病细胞K562/A02中,RT-PCR和免疫印迹反应检测YB-1 mRNA和蛋白表达量的改变;采用MTT法和细胞周期测定分析对白血病细胞增殖的影响;用AnnexinⅤ检测白血病细胞的凋亡程度;采用MTT法检测细胞IC50值变化;RT-PCR和流式细胞术检测基因转染前后细胞中的MDR1 mRNA和P-gp表达的变化。结果表明,阳性转染的3组细胞YB-1基因和蛋白的表达量明显低于随机片段组和未转染细胞;生长曲线提示阳性转染组细胞生长缓慢,细胞周期动力学分析显示阳性转染组G1期细胞增多,G2期与S期细胞显著减少;在小剂量As2O3作用下,阳性转染组细胞的凋亡数量明显高于对照组细胞;阳性转染细胞的阿霉素IC50明显低于随机片段组和阴性对照组;阳性转染细胞MDR1 mRNA水平明显降低,P-gp的峰值较对照组明显左移。结论:YB-1特异性shRNA能有效降低白血病细胞中YB-1的表达,减慢细胞生长,增加白血病细胞对化疗药物的敏感性,加速细胞凋亡。; 沈慧玲周磊磊陈巧云陈琛方丽丽房新建许文林; 关键词：YB-1蛋白白血病细胞细胞增殖细胞凋亡

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方丽丽

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