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曹应龙: 作品数：21 被引量：114H指数：6; 供职机构：中国农业科学院油料作物研究所农业部油料作物生物学重点开放实验室更多>>; 发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划转基因生物新品种培育专项更多>>; 相关领域：农业科学生物学一般工业技术机械工程更多>>

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转基因大豆Mon89788基体标准物质协同实验研究被引量：5: 2011年; 对研制的3个含量水平的转基因大豆Mon89788基体标准物质进行多家实验室的验证研究。研究过程包括转基因大豆中基因组DNA的提取和转基因组分的定量PCR方法确认，标准物质的多家实验室协同实验，以及测最的不确定度评估。多家测定分析结果表明，转基因大豆Mon897883种不同外源基因／内源基因含量水平的标准物质参考值和扩展不确定度分别为0．35％±0．17％，0．61％±0．14％，3．17％±1．70％（k=2）。基体为大豆粉的该标准物质可用于转基因大豆含量的定量检测。; 张玲盛灵慧王晶曹应龙柳方方隋志伟卢长明; 关键词：计量学转基因大豆实时荧光定量PCR 基体标准物质

转基因油菜T45质粒分子标准物质协同实验研究被引量：1: 2011年; 对转基因油菜T45荧光定量PCR方法的关键参数进行了方法验证，结果表明该方法适合于标准物质协同实验。选择6家实验室采用经过验证的方法对转基因油菜T45质粒分子标准物质进行了协同实验研究。通过比较分析转基因油菜T45基因DNA与质粒分子DNA两者产生的标准曲线的斜率（扩增效率）、线性拟合度和截距，发现转基因油菜T45基因组DNA与质粒分子DNA具有相似的扩增效率和线性相关系数。经统计学分析各参与实验室的数据等精度，转基因油菜T45质粒分子标准物质的标准值和扩展不确定度为0．98±0．02（％=2）。; 董莲华余笑波宋贵文曹应龙李亮王晶卢长明; 关键词：计量学转基因油菜实时荧光定量PCR

植酸酶基因定性PCR检测方法及阳性质粒分子的构建被引量：5: 2012年; 植酸酶基因在农业生产中具有很高的应用价值,正被广泛用于农作物的基因工程研究。为了满足转植酸酶基因作物安全监管的需要,通过优化PCR检测条件,建立了植酸酶基因特异性定性PCR检测方法。该方法具有良好的扩增特异性和检测灵敏度,可以满足我国植酸酶转基因作物监管需要。此外,我们将6种主要农作物(小麦、水稻、棉花、大豆、玉米和油菜)的内标准基因和植酸酶基因克隆到同一载体上,构建成了阳性质粒分子pBS Endogenous-phytase。该质粒分子适用于这6种作物中植酸酶基因的筛查检测。本研究为转植酸酶基因作物的安全监管提供了阳性材料和检测方法。; 李俊刘信曹应龙武玉花厉建萌吴刚张丽卢长明; 关键词：转基因检测植酸酶基因

转基因水稻TT51－1转化事件外源载体整合位点全序列及其应用: 本发明公开了一种转基因水稻TT51－1转化事件外源载体整合位点全序列及其应用，涉及生物工程技术领域中转基因水稻的安全评估和检测。本发明以转基因抗虫水稻品种TT51－1为材料，提取基因组DNA为模板，分四段扩增出包含旁侧水...; 卢长明吴刚武玉花肖玲曹应龙李均; 文献传递

花生种子发育过程中脂肪酸累积模式研究被引量：40: 2009年; 通过对花生种子脂肪酸累积模式的研究,揭示花生脂肪酸组成的形成规律。研究结果显示,下针后10d内的花生种子可检测到9种脂肪酸,C16∶1和C18∶3在发育过程中由高到低,逐渐消失,其他7种脂肪酸含量则随着花生种子的发育逐渐积累增高。成熟的花生种子中油酸和亚油酸含量占脂肪酸总含量的81%左右。脂肪酸总量在接近成熟时有所下降。不同脂肪酸在累积过程中显示了高度相关性,C16∶1和C18∶3之间呈正相关,属于第一类;其余7种脂肪酸之间也均呈正相关,属于第二类。第一和第二类脂肪酸之间呈负相关。主成份分析表明,9种脂肪酸可以分成三类:C18∶1与C18∶2各为一类,其他7种脂肪酸为另一类,C18∶1与C18∶2之比是花生脂肪酸组成的决定性因素。综合分析表明,决定花生脂肪酸组成的关键基因主要是脂肪酸去饱和酶FAD2基因和SAD基因,有目的地对这两个基因的表达进行调控对于花生脂肪酸组成的改良有着重要的价值和意义。; 李晓丹曹应龙胡亚平肖玲武玉花吴刚卢长明; 关键词：花生种子发育

甘蓝型油菜BnKCS10基因的克隆和功能分析被引量：1: 2013年; 为探讨编码β-酮酰-辅酶A合成酶(β-ketoacyl coa synthase,KCS)基因家族成员之一的KCS10基因功能,本文通过基因组步移和RACE技术,从甘蓝型油菜中双9号中克隆了BnKCS10基因。甘蓝型油菜BnKCS10基因编码区长2 344bp,含有两个内含子,长度分别为527bp和167bp。BnKCS10基因在花蕾中的表达量最高,其次是柱头和受精后30d的角果,说明在生殖器官中的表达量明显高于营养器官。转BnKCS10基因的酵母能够正常合成预期的蛋白,但没有超长链脂肪酸的合成。; 赵娜邢素娜曹应龙卢长明; 关键词：甘蓝型油菜克隆表达谱酵母表达

油菜热休克蛋白基因HSP81.1启动子的克隆与功能验证: 2011年; 本研究从甘蓝型油菜(Brassica napus)基因组中扩增获得热休克蛋白基因启动子,并将其克隆至双元载体pBI121的GUS报告基因上游,构成双元表达载体pBI121 HSP GUS。通过农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)介导法转化烟草后获得转基因植株。对T1转基因植株研究表明,外源基因在42℃处理1h后开始表达,且即使用同样条件诱导,GUS基因的表达率和表达量在不同生长时期也有差异。在第50d左右的苗期,GUS基因的表达率和表达量高,但随植株老化而逐渐下降。研究显示,利用油菜的热休克蛋白启动子可以达到通过温度控制烟草基因表达的目的。; 陈桂敏吴刚曹应龙武玉花肖玲卢长明; 关键词：GUS报告基因油菜转基因烟草

转基因油菜筛查检测策略研究被引量：10: 2012年; 根据收集到的国内外已商业化转基因油菜品种的基因元件信息,构建了油菜转基因检测分子特征矩阵,在分析基因元件使用频率的基础上,建立了转基因油菜的筛查检测策略。研究发现,利用P-CaMV35S、P-FMV35S和bar这三个元件组合,对现有转基因油菜品种的筛查检出率可达100%。将P-CaMV35S、P-FMV35S、bar、CP4-EPSPS、PAT和T-NOS组合,每个转化事件可检出至少两次,增加了检测的可靠性。同时,分析了不同转化事件中同名基因元件的序列差异,进一步验证了分子特征矩阵筛查方法的可行性。; 张丽武玉花吴刚曹应龙李均卢长明; 关键词：转基因油菜转基因检测筛查方法矩阵分析 PCR

温度控制转基因植物外源基因表达的研究: 利用温度控制外源基因表达可以使转基因植物的外源基因按照人类的需要在特定的时间和空间发挥作用,它不但可以提高性状表达的准确性而且可以通过减少外源蛋白的积累,提高转基因生物的安全性。本研究的目的是探索利用油菜的热休克蛋白HS...; 陈桂敏吴刚曹应龙武玉花肖玲卢长明; 文献传递

甘蓝型油菜中KCS6基因的克隆和功能分析被引量：4: 2012年; 采用基因组步移和RACE(rapid amplification of cDNA ends)技术,从甘蓝型油菜中双9号中克隆到了KCS6基因。甘蓝型油菜中KCS6基因有两个拷贝:BnKCS6c(与甘蓝的mRNA 99%同源)和BnKCS6a(与白菜的mRNA 99%同源)。这两个拷贝的编码区长度均为1 494bp,含有2个外显子,一个长1 045bp,另一个449bp。种子发育初期KCS6基因在角果皮和种子中表达量高,随着种子成熟表达量迅速降低。两个KCS6的转基因都可以在酵母中正常表达,但不能合成超长链脂肪酸,表明酵母中异源表达的KCS6蛋白没有活性,或KCS6蛋白不能以酵母的脂肪酸作为催化底物合成超长链脂肪酸。; 武玉花曹应龙罗军玲邢素娜吴磊李晓飞卢长明; 关键词：甘蓝型油菜克隆表达谱转基因酵母表达

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