朱明光
- 作品数：15 被引量：45H指数：4
- 供职机构：吉林大学白求恩医学院更多>>
- 发文基金：吉林省科技厅科研基金吉林省科技厅资助项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 基因沉默HMGA1调控肿瘤细胞生长与免疫抑制实验研究
- 朱明光
- 关键词：高迁移率族蛋白A1肿瘤免疫抑制
- 文献传递
- 肿瘤抑制基因WWOX真核表达载体的构建及其在A549细胞中的表达被引量：2
- 2007年
- 目的构建肿瘤抑制基因WWOX的真核表达载体,并观察其在人肺腺癌细胞A549中的表达。方法采用RT-PCR法,从正常人胚肾细胞HEK-293中钓取WWOX基因,将其克隆至pMD18-T载体上,测序后定向连接到真核表达载体pEGFP-C1中,构建真核表达载体pEGFP-C1-WWOX,并用脂质体转染至A549细胞中,采用共聚焦显微镜观察绿色荧光蛋白(GFP)与WWOX的融合蛋白在A549细胞中的表达。结果测序结果显示,RT-PCR法获得的WWOX全编码序列与GenBank中报道的序列一致。真核表达载体pEGFP-C1-WWOX转染A549细胞48h后,共聚焦显微镜观察到细胞中有绿色荧光呈现,RT-PCR观察到WWOX基因得到有效转录。结论已成功构建了肿瘤抑制基因WWOX真核表达载体pEGFP-C1-WWOX,并在A549细胞中表达了WWOX和GFP融合蛋白。
- 杨巍袁红艳朱明光常雅萍
- 关键词：肿瘤抑制基因真核表达A549细胞
- siRNA沉默RhoC表达诱导人肝癌BEL7402细胞凋亡被引量：1
- 2011年
- 目的:研究siRNA沉默RhoC基因表达对人肝癌细胞BEL7402凋亡的影响及其机制,为肝癌的基因治疗提供实验依据。方法:构建RhoC-siRNA真核表达载体pU6mRFPRhoC-siRNA,转染BEL7402细胞,激光共聚焦显微镜检测转染效率,RT-PCR和Western blotting鉴定RhoC基因沉默效果;流式细胞术、琼脂糖凝胶电泳和瑞氏染色检测BEL7402细胞凋亡,RT-PCR检测细胞凋亡相关基因Bcl-2和Bax的表达。结果:成功构建pU6mRFPRhoC-siRNA重组载体,转染BEL7402细胞的效率为70%,RT-PCR和Western blotting检测RhoC基因沉默效率分别为85%和82%。pU6mRFPRhoC-siRNA转染组BEL7402细胞凋亡显著高于未转染BEL7402细胞和pU6mRFP Scramble-siRNA转染组BEL7402细胞[(21.00±2.23)%vs(6.47±1.64)%、(4.63±0.47)%,P<0.01)],pU6mRFPRhoC-siRNA转染组BEL7402细胞DNA呈典型的"梯状"条带,瑞氏染色见转染组BEL7402细胞中有大量凋亡细胞。pU6mRFPRhoC-siRNA转染组BEL7402细胞Bcl-2基因水平显著低于、而Bax基因水平显著高于未转染BEL7402细胞和pU6mRFP Scramble-siRNA转染组BEL7402细胞(0.28±0.15vs0.96±0.21,1.03±0.24,P<0.05;1.09±0.21vs0.26±0.10,0.25±0.07,P<0.01)。结论:siRNA沉默RhoC基因可诱导人肝癌BEL7402细胞凋亡,其机制与下调Bcl-2基因、上调Bax基因表达有关。
- 谢淑丽王广义吕国悦朱明光
- 关键词：RHOC基因SIRNA肝肿瘤凋亡
- 靶向高迁移率族蛋白A1基因RNA干扰真核表达载体的构建被引量：4
- 2007年
- 目的构建针对人高迁移率族蛋白A1(HMGA1)基因的RNA干扰真核表达载体,为研究HMGA1基因在肿瘤细胞中的作用奠定实验基础。方法设计合成特异性针对人HMGA1基因的寡核苷酸序列,梯度退火后,与pU6mRFP载体连接,构建重组载体,转染人肝癌细胞SMMC-7721。通过激光共聚焦显微镜观察红色荧光,估测转染效率,RT-PCR法检测转染细胞HMGA1mRNA水平,流式细胞仪检测细胞凋亡和细胞周期。结果DNA测序证实,成功构建了特异性HMGA1siRNA真核表达载体,转染后72h,转染效率为40%左右。所构建的载体能够特异性沉默转染细胞HMGA1基因的表达。转染细胞HMGA1基因沉默后,细胞凋亡率(27·86%±2·44%)明显高于空载体对照组和SMMC-7721对照组(分别为2·82%±2·39%和2·04%±0·70%),G0-G1期细胞百分数(77·73%±1·78%)明显高于空载体对照组和SMMC-7721对照组(分别为42·19%±3·28%和39·23%±3·63%),G2-S期细胞百分数(22·27%±1·78%)明显低于空载体对照组和SMMC-7721对照组(分别为57·81%±3·28%和60·77%±3·63%)。结论成功构建了HMGA1的RNA干扰真核表达载体。
- 朱明光张鑫袁红艳杨巍常雅萍
- 关键词：RNA干扰高迁移率族蛋白A1真核表达
- 以HMGA1分子为靶点的肿瘤RNA干扰治疗研究
- 常雅萍朱明光袁红艳杨巍韩艳非王宇峰王艳春
- 项目来源： 吉林省科学技术厅项目（200505142）。 项目类别： 应用基础研究。 应用领域： 肿瘤基因治疗。 技术原理： 肿瘤分子生物学、分子免疫学。 本研究以HMGA1分子为靶点，通过转染HMGA1...
- 关键词：
- 关键词：肿瘤靶点基因肿瘤基因治疗
- RhoC高表达诱导人正常肝细胞迁移和侵袭的研究被引量：1
- 2014年
- 目的观察RhoC高表达诱导人正常肝细胞迁移和侵袭恶性转化。方法pcDNA3-RhoC转染HL7702细胞，划痕实验和Transwell小室检测细胞迁移和侵袭能力；明胶酶谱分析检测基质金属蛋白酶（MMPs）活性；逆转录一聚合酶链反应（RT—PCR）检测细胞迁移和侵袭相关基因表达；Westernblot检测相关蛋白水平；接种裸鼠检测活体成瘤率。结果转染RhoC细胞组与HL7702细胞组和空质粒转染细胞组比较获得了迁移和侵袭能力，相对迁移距离显著增大，分别为（63．33±10．07）％、（28．67±7．02）％和（28．33±6．66）％（P〈0．01）；穿过Transwell微孔滤膜细胞显著增多，分别为（65．33±6．80）％、（24．33±5．79）％和（23．33±5．73）％（P〈0．01），侵袭能力显著增强，分别为43．67±7．59、13．33±3．40和15．33±4．11（P〈0．01）；MMPs活力增强；迁移和侵袭相关基因MMP-2、MMP-9、血管内皮生长因子（VEGF）、P27RF．Rho和Survivin表达上调，基质金属蛋白酶组织抑制剂1（TIMP1）、TIMP2、p53和人第10号染色体缺失的磷酸酶及张力蛋白同源的基因（PTEN）表达水平下调；接种裸鼠成瘤率为40％。结论RhoC高表达诱导人正常肝细胞迁移和侵袭的恶性转化。
- 谢淑丽吕国悦朱明光陈国富金哲王广义
- 关键词：RHOC肝细胞恶性转化
- AG490阻断肝癌细胞Stat3信号通路逆转免疫抑制的实验研究被引量：6
- 2007年
- 目的:检测Stat3mRNA在肿瘤细胞中的表达,研究JAK酶抑制剂AG490阻断Stat3信号通路对免疫抑制因子基因表达的影响,探讨应用AG490阻断肿瘤细胞Stat3信号通路逆转免疫抑制的可行性。方法:RT-PCR法检测Stat3mRNA表达;动态检测AG490作用前后肝癌细胞Stat3mRNA表达以及VEGF、TGF-β和IL-10等免疫抑制因子基因的表达情况。结果:在所检测的人肿瘤细胞中5种有Stat3mRNA的表达;AG490阻断肝癌细胞Stat3通路后,免疫抑制因子VEGF、TGF-β和IL-10等的mRNA表达减弱甚至消失。结论:AG490可通过阻断Stat3信号转导通路逆转免疫抑制,发挥抗肿瘤效应。
- 王艳春黄进明朱明光常雅萍
- 关键词：STAT3AG490免疫抑制因子
- 高迁移率族蛋白B1的致炎细胞因子作用研究进展被引量：16
- 2006年
- 目前全身性炎症反应仍然是危重病人死亡的主要原因。近年来发现高迁移率族蛋白B1(HMGB1)这一传统DNA结合蛋白是强大的致炎细胞因子。HMGB1可由单核/巨噬细胞等固有免疫细胞在致炎细胞因子刺激下主动分泌,也可由坏死细胞被动释放。该分子刺激炎症细胞活化并向炎症部位聚集,促进炎症细胞因子分泌造成组织损伤。针对HMGB1的靶向治疗为临床救治感染危重病人拓展了治疗时机,因而具有很大的实际意义。HMGB1的致炎细胞因子作用是炎症损伤的研究热点之一。
- 朱明光常雅萍
- 关键词：HMGB1致炎细胞因子内毒素血症全身性炎症反应
- RNAi沉默HMGA1基因对肝癌细胞凋亡和细胞周期的影响被引量：5
- 2007年
- 目的:筛选HMGA1基因沉默稳定转染肝癌细胞株,检测沉默后肿瘤细胞凋亡、周期和增殖的变化。方法:靶向HMGA1的RNAi载体转染肝癌细胞,G418筛选得到稳定转染细胞株并鉴定;MTT法和FACS检测细胞增殖、凋亡及细胞周期。结果:成功建立基因沉默HMGA1稳定细胞株;HMGA1基因沉默后,细胞凋亡百分率(29.46±3.04%)明显高于质粒对照组和空白对照组(1.96±0.76%和2.04±0.70%,P<0.01);G0-G1期细胞百分率(75.21±2.35%)明显高于质粒对照组和空白对照组(37.98±3.02%和39.23±3.63%,P<0.01),G2-S期(24.79±2.35%)显著低于质粒对照组和空白对照组(62.03±3.01%和60.77±3.63%,P<0.01);MTT检测显示,HMGA1沉默细胞增殖与质粒对照组和空白对照组相比显著降低(P<0.01或0.05)。结论:基因沉默HMGA1可促进肿瘤细胞凋亡,抑制细胞增殖。
- 朱明光张鑫袁红艳杨巍常雅萍
- 关键词：RNAIHMGA1细胞凋亡细胞周期
- 人源阳离子抗菌肽hCAP-18真核表达载体的构建与表达被引量：2
- 2007年
- 目的构建人源性阳离子抗菌肽hCAP-18的真核表达载体pcDNA4/Myc-His-hCAP-18,转染真核细胞,并检测其表达。方法以正常人外周血中性粒细胞的总RNA为模板,用RT-PCR技术钓取hCAP-18编码序列的全长cDNA,并克隆至pcDNA4/Myc-His真核表达载体上,转染真核细胞株HeLa。RT-PCR及Western blot方法检测目的基因的表达。结果所构建的真核表达载体pcDNA4/Myc-His-hCAP-18,经酶切鉴定所释放片段大小与预期相符,基因序列与GenBank上登录的序列一致,目的基因在转染细胞中获得高水平表达。结论已成功构建真核表达载体pcDNA4/Myc-His-hCAP-18,并在转染细胞中高效表达。
- 袁红艳韩艳非朱明光杨巍常雅萍
- 关键词：抗菌肽基因转染真核表达
