朱雅萍
- 作品数：67 被引量：472H指数：12
- 供职机构：上海交通大学医学院附属瑞金医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金上海市自然科学基金上海市科委医学引导类科技项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学农业科学动力工程及工程热物理更多>>
- 兔MSCs-PGA复合物在RCCS中的成骨潜能被引量：2
- 2002年
- 目的探讨联合应用兔骨髓基质干细胞 (MSCs)、聚乙醇酸 (PGA)支架材料和成骨诱导因子在旋转式细胞培养系统 (RCCS)中构建组织工程化骨的可行性。 方法利用密度梯度离心法分离培养兔骨髓基质干细胞 ,采用动力接种方法形成骨髓基质干细胞—PGA支架复合物 ,以成骨条件培养液为生长介质 ,在RCCS中进行培养。用趋骨性荧光素四环素标记、茜素红染色以及扫描电镜、透射电镜观察 ,研究细胞—PGA支架在RCCS中的成骨潜能。结果组织化学研究显示 ,兔骨髓基质干细胞—PGA支架结构在RCCS中培养第 7d时 ,茜素红钙质染色呈弱阳性反应 ,至第 2 1d及 2 8d时 ,茜素红钙质染色呈强阳性反应。荧光显微镜下 ,培养组织经趋骨性荧光素四环素标记呈现金黄色荧光 ,荧光亮度与分泌物堆积程度成正相关 ,与钙质染色阳性反应结果一致。超微结构观察 ,见骨髓基质干细胞合成分泌胶原纤维 ,释放基质小泡 ,并出现钙盐沉积 ,形成丛毛球状钙球 ,最终形成骨组织。 结论在旋转式细胞培养系统中 ,骨髓基质干细胞—PGA支架结构具有形成类似活体骨组织特征的组织工程化骨的潜能。
- 万超杨庆铭邓廉夫何川沈玮朱雅萍
- 关键词：骨形成骨髓基质干细胞聚乙醇酸
- IGF-1信号通路相关蛋白在大鼠髁突软骨细胞增殖分化中的表达被引量：5
- 2013年
- 目的:研究胰岛素样生长因子-1(IGF-1)信号转导通路在大鼠髁突软骨细胞增殖分化调控过程中相关基因的表达。方法:体外单层培养并鉴定出生后1、7、14、28 d共4组SD大鼠髁突软骨细胞。免疫组织化学方法检测细胞内IGF-1表达情况,Real-time PCR及Western印迹法检测细胞内IGF-1R、Bcl-2、Bax mRNA及蛋白表达。饥饿培养24 h后,实验组加入质量浓度为100 ng/mL的重组大鼠IGF-1细胞因子(rrIGF-1)继续培养24、48 h,CCK-8检测细胞增殖情况,Real-time PCR技术检测各组髁突软骨细胞内IGF-1R、IGF-2R、Raf1、GSK-3、IGFBP3、NF-κB、Bcl-2、Bax、integrin、TGF-βmRNA表达情况;对照组培养液不加rrIGF-1。结果:各鼠龄组SD大鼠髁突软骨细胞内IGF-1表达均阳性,IGF-1R mRNA及蛋白表达相对平稳,Bcl-2、Bax mRNA及蛋白表达逐渐增强,在出生14 d后表达下降(P<0.05)。加入100 ng/mL rrIGF-1后,髁突软骨细胞增殖速度显著增加,细胞凋亡减少,Real-time PCR结果显示实验组IGF-1R、GSK-3、Bax、integrin mRNA表达整体呈下降趋势;IGF-2R、Raf1、IGFBP3、NF-κB、Bcl-2、TGF-βmRNA表达水平总体呈上调趋势,差异有统计学意义。结论 :IGF-1介导的信号转导途径参与了髁突软骨细胞的增殖、分化以及软骨形成早期的调控,并可能与integrin、TGF-β等其他蛋白相互作用,共同参与髁突发育过程。
- 江莉婷魏立谢银银周琦朱雅萍高益鸣
- 关键词：胰岛素样生长因子-1髁突软骨细胞
- 皮肤成纤维细胞在体外培养中的成骨作用被引量：17
- 1994年
- 本实验采用新西兰家兔背部中厚皮片，通过组织培养获得成纤维细胞。成纤维细胞经传代培养８天时，发现标本中有不透光的骨小结节形成。培养３７天时，发现一些小结节扩大、延伸，形成骨小梁样结构；也有骨小片状结构形成。经四环素活体标记后，这些结节在蓝紫光荧光显微镜下显示金黄色荧光，表明它们是新生骨组织。该结构的钙盐染色、胶原染色也都呈阳性，充分反映骨结构中的钙及胶原成分，以及皮肤成纤维细胞在体外培养中的成骨作用。标本ＡＳ染色后，骨形成区可见均匀、散在分布，呈卵圆形，其直径约为１０μｍ，显示苦味酸着色的斑片状物。这种斑片状物在非骨形成区则不能见到。因此，这种能被苦味酸着色的斑片状物可能是皮肤上皮细胞（或／与内皮细胞），并诱导成纤维细胞形成骨组织。
- 徐荣辉饶寒敏朱雅萍柴本甫
- 关键词：细胞培养成骨成纤维细胞皮肤
- 大鼠髁突软骨细胞发育中差异蛋白的表达变化被引量：4
- 2013年
- 目的:初步建立大鼠髁突软骨细胞发育过程中蛋白表达差异谱,寻找并鉴定其差异表达蛋白。方法:体外培养出生后1、7、14、28 d共4组SD大鼠髁突软骨细胞,应用甲苯胺蓝染色、Ⅱ型胶原免疫组化染色鉴定软骨细胞。提取各组软骨细胞总蛋白,采用iTRAQ标记定量蛋白,2D nano-HPLC和基质辅助激光解吸/电离串联飞行时间质谱(MALDI-TOF-TOF)技术动态、定量观察出生后大鼠髁突软骨细胞发育过程中差异蛋白的表达及其量变情况,所得数据用MASCOT软件处理,筛选样本之间有意义的差异蛋白,运用GO法进行蛋白分类。结果:共鉴定500种差异蛋白,其中137种具有可信度表达,包括15种高可信度表达,相对分子量在7806.24～608459.2,主要功能为参与各类代谢及发育过程、细胞骨架结构、信号转导,响应各类刺激、免疫应答以及细胞间联系及运输等。结论:本研究获得了目前较为全面的大鼠髁突软骨细胞发育中差异蛋白表达谱,并运用质谱技术成功鉴定了差异表达蛋白,为进一步研究髁突软骨细胞内蛋白功能及在颞下颌关节疾病中的改变与作用奠定基础。
- 江莉婷谢银银魏立朱雅萍高益鸣
- 关键词：ITRAQ髁突软骨细胞蛋白质组学
- 接骨中药含药血清对成骨细胞生物功能的影响被引量：3
- 2004年
- 目的 比较伤科常用单味接骨中药含药血清对成骨细胞生物学功能的影响。方法 应用MTT法、对硝基苯磷酸盐法、茜素红染色方法和RT-PCR法,比较伤科常用单味中药当归、自然铜、骨碎补和续断对体外培养成骨细胞的增殖、碱性磷酸酶分泌、矿化结节形成和mRNA表达的影响。结果 单味中药当归对早期增殖期的成骨细胞有明显的促增殖和分化的作用;当归和自然铜能增加成骨细胞矿化期矿化结节的形成;当归和续断能上调BMP-2和IGF-I mRNA的表达。结论 单味接骨中药当归具有刺激体外培养成骨细胞增殖和分化的功能。
- 冯伟傅文彧张玥朱雅萍王君
- 关键词：含药血清成骨细胞生物功能体外培养
- 低氧对小鼠成骨细胞Cyr61/CCN1表达的影响被引量：1
- 2009年
- 目的探讨低氧环境对小鼠成骨细胞富含半胱氨酸61(Cyr61/CCN1)表达的影响。方法分别在氧浓度和去铁敏诱导的低氧环境下培养小鼠成骨细胞,Real-time PCR和Western blotting于不同时间点检测成骨细胞低氧诱导因子-1α(HIF-1α)、Cyr61/CCN1和血管内皮生长因子的表达。分别敲除小鼠成骨细胞中HIF-1α和VHL基因,检测细胞Cyr61/CCN1的表达。结果两种低氧环境下,小鼠成骨细胞HIF-1α通路被激活,Cyr61/CCN1 mRNA和蛋白表达均显著增加(P<0.05或P<0.01)。HIF-1α基因敲除小鼠成骨细胞Cyr61/CCN1 mRNA和蛋白表达均显著减少,VHL基因敲除成骨细胞Cyr61/CCN1 mRNA和蛋白表达均显著增加(P<0.05或P<0.01)。结论低氧环境通过激活HIF-1α通路来上调小鼠成骨细胞Cyr61/CCN1的表达。
- 崔论王君齐进朱雅萍许福平魏立张凤华邓廉夫
- 关键词：低氧低氧诱导因子-1Α成骨细胞血管内皮生长因子
- IGF-1、IGF-1R及Bcl-2,Bax在大鼠髁突软骨发育中的表达及作用被引量：3
- 2013年
- 目的探讨大鼠髁突软骨发育过程中IGF-1、IGF-1R及凋亡相关因子Bcl-2、Bax的表达、分布以及可能发挥的作用。方法获取出生后1、7、14、28d SD大鼠髁突,甲苯胺蓝染色观察软骨结构。免疫组化染色检测IGF-1、IGF-1R、Bcl-2、Bax在各年龄组SD大鼠髁突软骨的分布。Western blot及real-time PCR分别检测各年龄组软骨细胞内IGF-1、IGF-1R、Bcl-2、Bax蛋白及mRNA的表达。结果甲苯胺蓝染色结果显示随年龄递增,大鼠髁突软骨逐渐变薄,宽度增加。免疫组化染色显示IGF-1、IGF-1R、Bcl-2在增殖层至肥大软骨细胞浅层分布最明显,Bax主要表达在成熟层及肥大层。Real time PCR及Western blot结果表明出生后的IGF-1 mRNA的表达逐渐降低,至28d时表达开始增强,IGF-1R蛋白及mRNA出生后稍有波动但表达相对平稳,Bcl-2、Bax蛋白及mRNA表达逐渐增强,至出生14d时表达开始下降(P<0.05)。结论 IGF-1、IGF-1R及凋亡相关因子Bcl-2、Bax的表达及分布相关,共同参与调控髁突软骨的发育。
- 周琦江莉婷魏立朱雅萍高益鸣
- 关键词：胰岛素样生长因子-1受体髁突软骨
- 肿瘤坏死因子-α和骨形态发生蛋白-2诱导成纤维细胞表达成骨表型的协同作用机制被引量：1
- 2001年
- 目的:探讨肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和骨形态发生蛋白-2(BMP-2)诱导成纤维细胞表达成骨表型的可能机制。方法:分离、纯化人真皮成纤维细胞,使其生长在分别含一定浓度的TNF-α、BMP-2和TNF-α与BMP-2联合培养液的干预条件下,采用MTT和RT-PCR技术,检测成纤维细胞增殖和C-myc、BMP-2、BMP-4mRNA表达状况的变化。结果:单独应用TNF-α和联合应用TNF-α与BMP-2可刺激成纤维细胞增殖;TNF-α诱导成纤维细胞表达C-myc mRNA和BMP-2 mRNA;TNF-α与BMP-2联合应用可诱导成纤维细胞表达BMP-4 mRNA。结论:TNF-α可诱导成纤维细胞转化,并赋予其新的生物特征;外源性BMP-2和内源性BMP-2、BMP-4的协同效应是成纤维细胞表达成骨表型的机制之一。
- 邓廉夫冯伟张玥朱雅萍
- 关键词：成纤维细胞成骨表型肿瘤坏死因子-Α骨形态发生蛋白2
- 成人成骨细胞体外培养被引量：45
- 2000年
- 目的 改良成人成骨细胞消化培养方法 ,以满足在细胞学水平进行骨代谢性疾病研究的需要。 方法 取无菌骨碎片 ,先用胰蛋白酶消化多次 ,以去除血细胞和成纤维细胞 ;骨片经短期培养后 ,再次使用胰蛋白酶消化 ,得到大量纯净成骨细胞。细胞长至汇合后生成黑色结节。分别采用NPP底物法、12 5I标记放射免疫 (RIA)法和Ⅰ、Ⅲ型胶原顺序沉淀抽提、SDS -PAGE还原电泳法测定细胞上清中成骨细胞主要特征性分泌物 :大量碱性磷酸酶 (AKP)、骨钙素 (OCN)和Ⅰ型胶原。 结果 黑色结节经四环素染色 ,荧光显微镜下观察为骨结节特征性的金黄色。成骨细胞上清中AKP分泌量为 (2 76± 0 5 6 )IU/ml、OCN分泌量为 (1 875± 0 5 49)ng/ml,明显高于成纤维细胞 (P <0 0 1)。可检测到Ⅰ型胶原而无Ⅲ型胶原。 结论 此改良方法可以在短期内得到大量性状稳定成骨细胞 ,同时避免成纤维细胞混入。
- 张兴凯杨庆铭邓廉夫朱雅萍
- 关键词：成骨细胞碱性磷酸酶骨钙素胶原体外培养
- 接骨中药对培养成骨细胞增殖、分化和矿化功能的影响被引量：9
- 2004年
- 目的 :为比较常用接骨单味中药对体外培养成骨细胞的作用。方法 :应用MTT法、对硝基苯磷酸盐法及茜素红染色方法观察常用接骨单味中药对体外培养成骨细胞的增殖、ALP表达及矿化结节形成的影响。 结果 :这 8个单味中药对早期增殖期的成骨细胞除当归外均无明显的促增殖和分化的作用 ;而当归组和自然铜能增加成骨细胞矿化期矿化结节的形成。结论 :单味接骨中药当归具有刺激体外培养成骨细胞增殖及分化的功能。
- 冯伟傅文彧朱雅萍张凤华
- 关键词：成骨细胞增殖分化细胞培养
