李正欣
- 作品数：3 被引量：12H指数：1
- 供职机构：南通大学杏林学院更多>>
- 发文基金：江苏省高等学校大学生实践创新训练计划项目江苏省博士后科研资助计划项目江苏省高校自然科学研究项目更多>>
- 相关领域：医药卫生轻工技术与工程更多>>
- 基因熔解曲线谱型图技术分析肺结核患者CD4^+T细胞受体β链可变区基因多态性
- 2013年
- 目的利用荧光定量PCR结合基因熔解曲线谱型图(gene melting curve spectratyping,GMCS)技术分析肺结核病患者外周血CD4+T细胞中T细胞受体(TCR)β链可变区(BV)基因多态性。方法提取15例健康人和30例肺结核患者外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cell,PBMC)中的总RNA,反转录成cDNA,以26个人TCRBV基因家族设计上游引物,共同的TCRβ链恒定区(BC)基因设计下游引物,荧光定量PCR扩增26个TCRBV基因家族谱系,样品谱系用荧光定量PCR中的DNA熔解曲线进行分析。结果在15例健康人外周血T细胞TCRβ链中,同一BV位点PCR产物的熔解曲线谱型相同。但是与健康人相比,30例肺结核患者的外周血TCRβ链26个BV位点熔解曲线谱型存在差异,差异比率为6.7%~33.3%,差异具有显著性(P<0.05,P<0.01)。此外,26个位点中有13个位点熔解曲线谱型差异比率≥20%。结论荧光定量PCR结合GMCS技术分析TCRBV基因家族谱系情况,方法稳定、简便,能较好地监测肺结核患者外周血T细胞TCR的β链谱型。
- 张冬梅孙晓雷段义农汤伟周鸣鸣李正欣张菊张洁
- 关键词：CD4阳性T淋巴细胞遗传多态现象肺结核
- 曲古菌素A联合细胞因子体外诱导小鼠胚胎干细胞分化为肝细胞被引量：1
- 2015年
- 目的:建立细胞因子和曲古菌素A(trichostatin A,TSA)联合诱导小鼠胚胎干细胞(embryonic stem cell,ESC)向肝细胞分化的3步法.方法:ESC在含激活素A的不含白血病抑制因子的培液中培养3 d分化为定形内胚层细胞;然后加入酸性成纤维细胞生长因子和T S A联合诱导5 d,再加入肝细胞生长因子(hepatocyte growth factor,HGF)等诱导因子培养5 d,向肝细胞方向分化,最后以致瘤素M、地塞米松继续培养5 d形成成熟肝细胞.自发分化组做阴性对照组不加上述因子,不含白血病抑制因子(leukemia inhibitory factor,LIF)的培养液进行自发分化培养.结果:诱导分化18 d后,用光镜、免疫荧光、RT-PCR检测显示诱导18 d后,出现了大量类肝脏细胞表型的上皮细胞,RT-PCR检测显示这些细胞表达成体肝脏细胞特异标记如酪氨酸转氨酶、白蛋白(albumin,ALB)、天冬氨酸转氨酶、甲状腺激素结合蛋白等.细胞免疫荧光也显示为甲胎蛋白、ALB、细胞角蛋白18阳性,分化细胞具有成熟肝脏细胞所具有的糖原储存、吲哚菁绿摄取和释放功能.其分化效率用ALB阳性率表示,诱导分化率可达57.38%.结论:组蛋白去乙酰化酶抑制剂TSA联合细胞因子体外诱导ESC可以成功分化为肝细胞,从而为体外获得大量肝细胞对肝病的临床细胞移植治疗及其研究提供理论和实践基础.
- 朱小波李正欣顾欣欣雷卓张洁李海涛周鸣鸣
- 关键词：胚胎干细胞肝样细胞诱导分化
- 龙虾壳红色素抗疲劳耐缺氧作用的试验研究被引量：11
- 2015年
- 通过灌服龙虾壳红色素研究其对小鼠抗疲劳、耐缺氧能力的影响。正常对照组小鼠灌胃蒸馏水,低剂量组、中剂量组和高剂量组分别以龙虾壳红色素1,2和4 g/(kg·d)剂量连续灌胃30 d。分别测定小鼠负重游泳时间和血乳酸(LA)、血尿素氮(BUN)、肝糖原和肌糖原含量;常压耐缺氧时间及耗氧量。结果:中、高剂量组小鼠负重游泳时间及血清中LA含量及肝糖原含量明显高于正常对照组(p<0.05),高剂量组小鼠BUN含量明显低于正常对照组(p<0.05)。高剂量组常压耐缺氧存活时间、耗氧量明显高于空白组(p<0.05)。龙虾壳红色素能明显提高小鼠抗疲劳、耐缺氧的能力,具有非常明显的保健作用。
- 张冬梅李正欣王顺关亚博张洁周鸣鸣
- 关键词：抗疲劳耐缺氧小鼠
