杨坤
- 作品数：5 被引量：30H指数：3
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- 发文基金：河北省科技支撑计划项目石家庄市科学技术研究与发展计划更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 鸭梨肌动蛋白2基因克隆和表达分析被引量：4
- 2012年
- 根据其他植物肌动蛋白2基因(Actin2)的保守序列设计一对简并性引物,从鸭梨叶片中克隆到1个编码肌动蛋白的基因,命名为PbACT2。PbACT2基因cDNA全长为1 180bp,开放阅读框1 134bp,编码377个氨基酸。氨基酸比对分析表明,该基因编码的氨基酸与其他陆生植物肌动蛋白基因具有较高的同源性。研究证明,PbACT2在鸭梨不同器官和不同发育时期的表达基本一致,说明该基因的表达较为稳定。
- 闫洪波葛文雅杨坤程玉豆关军锋
- 关键词：鸭梨基因克隆半定量分析
- 不同黑皮病发病程度的‘五九香’梨生理生化差异被引量：3
- 2012年
- ‘五九香’梨冷藏后极易发生黑皮现象。为解释其发病机制,以不同程度患黑皮病的‘五九香’梨(Pyruscommunis L.‘Wujiuxiang’)为材料,分析了果实硬度、可溶性固形物含量(SSC),以及果皮中α-法尼烯、共轭三烯、H2O2、多酚氧化酶(PPO)以及总酚等指标的差异。结果表明:随着黑皮病发病程度加重,果皮α-法尼烯逐渐减少,而共轭三烯、H2O2和总酚含量逐渐增加,细胞膜透性上升,PPO活性下降。在(20±2)℃下贮藏3d后,发病果实的硬度、可溶性固形物含量、果皮α-法尼烯、共轭三烯以及总酚含量显著降低,而相对电导率、H2O2含量和PPO活性显著增加。说明‘五九香’梨黑皮病发生与果皮中共轭三烯、膜透性和H2O2含量增加密切相关。
- 董宇关军锋杨坤刘立芹张莹莹
- 关键词：黑皮病H2O2
- ‘鸭梨’钙调素基因的克隆与表达分析被引量：7
- 2016年
- 以‘鸭梨’为材料,用RT-PCR及RACE技术克隆CaM,并借助实时定量PCR技术分析‘鸭梨’花、叶及果实不同发育时期的表达模式,获得了2个长度为764和801bp的CaM cDNA序列,分别命名为PbCaM1和PbCaM2,二者均含有450bp完整开放阅读框,编码149个氨基酸,且氨基酸序列相同。‘鸭梨’CaM在系统进化上具有高度保守性,与苹果相比,两者氨基酸序列为100%一致性。PbCaM1和PbCaM2具有时空表达特异性,它们在成叶、盛花期花瓣和幼果期表达量较高。本研究表明CaM具有高度保守性,PbCaM1和PbCaM2在‘鸭梨’果实早期生长发育过程中起着非常重要的作用。
- 程玉豆葛文雅闫洪波杨坤关军锋
- 关键词：钙调素克隆基因表达
- 谷子SSR遗传连锁图谱的构建及主要农艺性状的QTL分析
- SSR标记图谱是功能基因定位和发掘的重要基础。本研究以青狗尾草"N10"和谷子品种"大青桔"杂交构建F2标记群体,通过双亲筛选在群体间表现多态性的引物,用多态性引物对F2群体扩增
- 杨坤马丽华李琳智慧李伟王永芳李海权何文亮尚忠林刁现民
- 文献传递
- 鸭梨PAL克隆及其在果实发育和机械伤害过程中的表达被引量：18
- 2014年
- 【目的】克隆鸭梨苯丙氨酸解氨酶基因(PAL)序列,并分析其在果实发育阶段和机械伤害时的表达模式,为研究鸭梨褐变机制提供理论依据。【方法】采用同源克隆方法,获得鸭梨PAL全长序列;利用在线生物信息学软件对其进行分析;采用MEGA 5.1软件构建PAL蛋白系统进化树;利用实时荧光定量PCR技术分析PAL在鸭梨果实发育阶段及受机械伤害过程中的表达。【结果】在鸭梨中获得了2个含完整CDS区的PAL,分别命名为PbPAL1和PbPAL2。PbPAL1 cDNA序列全长为2 232 bp,含2 160 bp完整开放阅读框、60 bp的5′非翻译区及12 bp的3′非翻译区,GenBank登录号为GU906268.1;PbPAL2 cDNA序列全长为2 387 bp,含2 163 bp完整开放阅读框、14 bp的5′非翻译区及210bp的3′非翻译区,GenBank登录号为GU906269.1。系统进化分析表明PbPAL1和PbPAL2位于分子进化树的不同分支,PbPAL1与西洋梨(Pyrus communis)的PAL同源性较高,而PbPAL2与桃(Prunus persica)的PAL同源性较高。定量PCR分析表明,随着鸭梨果实发育成熟,果皮、果肉和果心的PbPAL1和PbPAL2表达量各异,但均呈下降趋势;且果实发育早期果心中的PbPAL1和PbPAL2表达量显著高于果皮和果肉。损伤处理可迅速诱导鸭梨的果肉褐变,果皮褐变出现较晚;同时,损伤刺激果皮和果肉组织中PbPAL1和PbPAL2表达上调。果皮中PbPAL1表达量在损伤处理后6 h达到高峰,而PbPAL2在损伤处理后48 h才显著上升;果肉中PbPAL1在损伤处理后1 h表达量开始显著上升,而PbPAL2在损伤处理后12 h才显著上升。【结论】鸭梨PbPAL1和PbPAL2属于2个不同的PAL类型,其表达随果实发育呈下降趋势,机械损伤过程中,两基因表达显著上调,表明其参与了损伤引起的组织褐变过程。
- 闫洪波程玉豆何近刚葛文雅杨坤关军锋
- 关键词：鸭梨苯丙氨酸解氨酶褐变机械损伤果实发育
