毛明光
- 作品数：20 被引量：82H指数：5
- 供职机构：大连海洋大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划辽宁省教育厅高等学校科学研究项目更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生化学工程更多>>
- 太平洋鳕ISG基因的克隆及其早期表达分析
- 太平洋鳕(Gadus macrocephalus),又称大头鳕,具有较高的经济价值。近几年来,由于捕捞量剧增,导致其野生资源不断下降。本实验室的太平洋鳕人工繁育技术不断取得突破,但在早期会出现大量死亡的现象,推测可能是由...
- 毛明光李幸蒋洁兰姜志强
- 太平洋鳕Caspase家族蛋白的结构及发育早期表达规律
- 毛明光刘瑞婷顾杰蒋洁兰姜志强桂建芳
- 太平洋鳕ATG5基因的克隆及表达分析被引量：4
- 2015年
- ATG5(Autophagy related gene 5)基因是一种自噬相关基因,是形成自噬体的重要基因,ATG5基因的表达对自噬调控的成熟有重要作用。本研究中通过克隆,首次得到太平洋鳕Gadus macrocephalus ATG5c DNA部分序列,该序列长为895 bp,含有完整的开放阅读框(Open reading frame,ORF),编码275个氨基酸,其编码的蛋白质相对分子量约为32 200;经核苷酸序列比对发现,太平洋鳕ATG5核苷酸序列与半滑舌鳎Cynoglossus semilaevis、尼罗罗非鱼Oreochromis niloticus ATG5核苷酸序列的相似性均高达87.27%;利用太平洋鳕与其他物种ATG5核苷酸序列构建系统进化树,结果显示,ATG5核苷酸序列系统进化树反映的亲缘关系基本符合传统分类学观点;氨基酸序列分析结果显示,ATG5蛋白氨基酸序列具有较高的保守性;利用绝对荧光定量PCR方法对ATG5基因在太平洋鳕各组织中的转录水平进行检测,结果显示,肝、脾和肾中的表达量高于其他组织,鳃、肾、脾、脑、肝和肌肉各组织中的ATG5 mRNA拷贝数分别为11.617 08、20.449 25、19.706 87、4.839 84、27.434 97、2.954 75 copies/ng。本研究结果将为进一步研究太平洋鳕细胞吞噬机制奠定基础,也为太平洋鳕的免疫机理和相关研究提供基础数据。
- 孙航毛明光蒋洁兰姜志强李幸温施慧
- 关键词：克隆
- 郑州鲤养殖场鲤急性烂鳃病的症状与病原鉴定
- 2020年
- 2019年6月,河南郑州某鲤养殖场发生鲤急性烂鳃病,累计死亡率约40%。为研究发病病因和疾病流行规律,对病鱼解剖,进行细菌和寄生虫检测、组织病理学检测、PCR检测和系统进化分析。结果显示,病鱼体表黏液增多,眼球凹陷,头盖骨凹凸不平,鳃肿胀并伴有溃烂,肾脏肿大至鳔间隔。体视镜下可见病鱼鳃丝末端钝圆、呈棒状,鳃丝间充满大量黏液。组织病理学检查可见病鱼鳃丝和鳃小片组织结构严重受损,鳃丝上皮细胞增生、坏死脱落,鳃弓远端和近端鳃小片均有明显增生且相互融合。PCR方法从病鱼中检出鲤浮肿病毒(carp edema virus,CEV),而SVCV和KHV检测结果为阴性。另外,病鱼体表和鳃并未见任何寄生虫,细菌学检测也未分离到任何与鲤烂鳃病相关的病原菌。遗传进化分析表明,此次检出的CEV毒株属于Ⅱa基因亚型,且与中国分离株(AS1、WJ2016)及日本分离株(CyPP3)的同源性最高,约为98.8%。初步推断Ⅱa基因亚型CEV可能是引起此次郑州鲤急性烂鳃病的主要病因,后续养殖中需加强对该病进行防控。
- 吴玲梅温智清杨雪冰董国栋李旭东王飞郑晓聪刘荭贾鹏毛明光
- 关键词：症状病原鉴定
- 检测太平洋鳕神经坏死病毒用试剂盒
- 本发明公开一种检测太平洋鳕神经坏死病毒用试剂盒，有用于PCR反应的上游引物和下游引物，其特征在于：所述上游引物序列如SEQIDNO.1所示，所述下游引物序列如SEQIDNO.2所示，所述神经坏死病毒基因的质粒标准品含有如...
- 毛明光姜志强蒋洁兰温施慧李幸
- 文献传递
- 重组激活基因(RAGs)功能机制及其在鱼类早期发育中的作用
- 2013年
- 在B淋巴细胞和T淋巴细胞的发育过程中,BCR和TCR基因座(Igκ、Igλ、Igh、Tcrα、Tcrβ、Tcrγ、Tcrδ)的可变区(V)、多样区(D)、链接区(J)发生V(D)J重排,该重排过程是在重组激活蛋白(RAG-1和RAG-2)的作用下完成的,V(D)J重排机制使机体拥有庞大的抗体库,以应对自然界中多元的病原微生物。RAGs结构分为核心区和非核心区,核心区域发挥着重要的基因片段酶切功能,而非核心区域的九聚体序列(nonamer)、锌指等结构具有调节V(D)J重排的功能。RAGs的功能在转录水平、染色体水平以及蛋白水平受到严格的时间和空间调控,以保证B/T细胞的正常发育。随着国内外学者对哺乳动物RAGs基因的结构与功能机制的深入研究,RAGs也在淡水鱼和海水鱼中有了越来越多的报道。由于RAGs的功能特点以及在进化过程中的稳定性,其已成为研究鱼类免疫系统发育过程和系统进化的重要分子标记。本文在赤点石斑鱼(Epinephelus akaara)RAGs研究的基础上探讨了RAGs定位鱼类免疫系统的发生过程,旨在为鱼类人工繁殖技术的突破、鱼类疫苗的开发与研制以及鱼类免疫学研究等提供理论借鉴。
- 毛明光雷霁霖姜志强
- 关键词：免疫球蛋白T细胞受体早期发育
- 太平洋鳕RAG1和IgM基因荧光定量PCR方法的建立及初步应用被引量：2
- 2015年
- 为研究太平洋鳕发育早期特异免疫系统形成的机制,通过RAG1和Ig M基因的转录水平衡量特异免疫系统的发育特点。根据Gen Bank中RAG1和Ig M的序列信息,分别设计1对特异引物,从太平洋鳕头肾中扩增得到RAG1和Ig M的基因片段。将所获基因片段分别插入到克隆载体p MD18-T中,从而构建太平洋鳕RAG1和Ig M基因的质粒标准品。建立并优化太平洋鳕RAG1和Ig M基因绝对荧光定量PCR方法。为进一步验证该方法的可靠性,分别利用绝对定量和相对定量检验目的基因在太平洋鳕早期发育过程不同组织内的表达差异。以优化后的绝对荧光定量PCR方法检测不同发育时期太平洋鳕RAG1和Ig M的表达情况。结果显示,RAG1的回归方程为y=-3.266x+33.77,回归系数R2=0.996;Ig M的回归方程为y=-3.119x+27.61,回归系数R2=0.998。绝对定量和相对定量结果在基因转录趋势上显现出一致性,即RAG1基因在胸腺和头肾中表达,且在胸腺中的表达量显著高于头肾中的表达量,在肝脏和脾脏中无表达;Ig M基因在胸腺、头肾、肝脏和脾脏中均有表达,其中脾脏中表达量最高,其次是头肾。RAG1基因在太平洋鳕发育早期的表达水平很低,到61日龄(days posthatching,dph)至95 dph表达量显著提高;Ig M基因在早期表达水平同样很低,到33 dph至61 dph才有明显表达,在95 dph时表达量显著提高。研究表明,本实验方法可靠,特异性较强,可成功对目标基因转录水平进行检测。
- 李幸温施慧毛明光姜志强蒋洁兰
- 关键词：IGM
- 大头鳕TNFSF6基因的结构分析及其在发育早期和病毒暴发时的表达水平被引量：1
- 2019年
- 为揭示大头鳕TNFSF6基因的基本结构与功能及其在大头鳕发育和神经坏死病毒(Pacific cod nervous necrosis virus, PCNNV)暴发时的响应机制,本研究通过基因克隆获得TNFSF6 cDNA开放阅读框序列,并对序列进行生物信息学分析,运用相对荧光定量PCR(qRT-PCR)方法对TNFSF6在不同组织、孵化后不同日龄仔鱼和PCNNV感染前后仔稚鱼中的表达水平进行检测。结果显示,大头鳕TNFSF6 cDNA长1 388 bp,5′UTR占315bp,3′UTR占500 bp,ORF全长573 bp,编码190个氨基酸。qRT-PCR结果显示,TNFSF6在各组织均有表达,但在脾脏和鳃组织中的表达量较高;大头鳕孵化后15、20、37和40 d TNFSF6基因的转录水平分别是其在5 d转录水平的0.28、0.15、0.12和0.13倍。在24 d和46 d PCNNV暴发时,病鱼TNFSF6基因的转录水平高于对照组;在77 d PCNNV暴发时,病鱼TNFSF6转录水平则显著低于对照组。研究表明,TNFSF6基因在大头鳕发育早期和仔鱼暴发PCNNV时发挥了重要的作用。
- 刘瑞婷蒋洁兰毛明光姜志强姜志强矫志伟陈明康孙谦
- 关键词：肿瘤坏死因子发育神经坏死病毒
- 饲料脂肪水平对红鳍东方鲀幼鱼肝脏抗氧化酶活力及组织结构的影响被引量：9
- 2013年
- 以脂肪质量分数分别为5.77%、7.71%、8.93%、11.89%、13.75%、16.42%的饲料饲喂红鳍东方鲀(Takifugurubripe)幼鱼56 d,测定其肝脏抗氧化酶活力和总抗氧化能力,并对其肝脏、肠及肌肉进行组织学观察,研究不同饲料脂肪水平对红鳍东方鲀幼鱼肝脏抗氧化酶活力及组织结构的影响。结果表明,5.77%组过氧化氢酶(CAT)活力与其他各组间有显著性差异(P<0.05)。总抗氧化能力(T-AOC)活力的最高值出现在8.93%组,且显著高于其他各组(P<0.05)。饲料脂肪水平大于8.93%的实验组间超氧化物歧化酶(SOD)活力差异不显著(P>0.05),且显著低于8.93%组;5.77%、7.71%、8.93%组呈增加趋势,且各组间差异显著(P<0.05)。谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)活力的峰值出现在13.75%组,且显著高于其他各组(P<0.05),总体呈先增加后降低的趋势。组织学观察表明,5.77%、7.71%、8.93%组,虽然肝脏也有脂肪空泡存在,但是肝脏、肠和肌肉组织结构完整,无明显病变现象;11.89%、13.75%、16.42%组的肝脏、肠和肌肉均有不同程度的病变现象,各组间差别明显。由此认为,脂肪水平为8.93%组,抗氧化酶活力最高,该脂肪水平下的饲料对红鳍东方鲀幼鱼肝脏代谢最有利,组织结构完整无病变。
- 孙阳姜志强李艳秋毛明光吴洪宫雪
- 关键词：脂肪水平红鳍东方鲀肝脏抗氧化酶
- 红鳍东方鲀GPI基因对急性低盐胁迫的响应机制被引量：2
- 2019年
- 为了获得红鳍东方鲀Takifugu rubripes葡萄糖-6-磷酸异构酶(Glucose-6-Phosphate Isomerase,GPI)的基因信息及其表达特性,研究采用RT-PCR和实时荧光定量PCR (qPCR)技术进行了GPI基因的克隆、组织表达分析及其在急性低盐胁迫下的基因响应研究。结果显示,所获得的红鳍东方鲀GPI基因序列长1736 bp,包含一个完整的开放阅读框(Open Reading Frame,ORF)。ORF由1662个核苷酸组成,编码553个氨基酸;预测的氨基酸序列中有2个糖异构域(Sugar Isomerase Domains),不存在信号肽和跨膜结构域。多序列比对结果表明物种间GPI具有较高的保守性。qPCR结果表明: GPI基因mRNA在红鳍东方鲀鳃、肌肉、脑、肠、肝及肾等组织中均有表达,其中肌肉中表达量最高。在不同盐度胁迫下,在鳃中,各低盐组GPI mRNA相对表达量均呈现先升高后降低又回升的趋势;在肾中,各低盐组GPI mRNA相对表达量变化趋势各有不同。由此推测,GPI基因在红鳍东方鲀对急性低盐胁迫的响应中发挥一定作用。
- 毛明光孙心如蒋洁兰蒋洁兰顾杰姜志强姜志强
- 关键词：红鳍东方鲀葡萄糖-6-磷酸异构酶
