潘佳亮
- 作品数:11 被引量:22H指数:3
- 供职机构:东北农业大学动物医学学院更多>>
- 发文基金:中央级公益性科研院所基本科研业务费专项国家科技支撑计划公益性行业(农业)科研专项更多>>
- 相关领域:农业科学更多>>
- 非洲马瘟病毒VP7蛋白的原核表达及其间接ELISA方法的建立被引量:5
- 2013年
- 为了建立可特异性地检测血清中非洲马瘟病毒抗体的方法,优化并合成非洲马瘟病毒VP7蛋白基因,将其插入原核表达载体pET-30a(+)中,转化大肠杆菌Rosetta(DE3)中进行表达。SDS-PAGE和Western-blot分析结果显示,目的蛋白获得了高效表达,且有特异的免疫学活性。用纯化的重组蛋白作为检测抗原,建立了检测血清中非洲马瘟病毒抗体的间接ELISA方法,并对该间接ELISA的抗原包被量、血清稀释度、封闭液的选择等反应条件进行了优化。所建立的间接ELISA方法可以鉴别血清中的非洲马瘟病毒抗体,具有良好的特异性和灵敏性,与标准竞争ELISA试剂盒的符合率达100%。表明本研究建立的检测血清中非洲马瘟病毒抗体的间接ELISA方法具有良好的特异性和灵敏性。
- 潘佳亮高利相文华戚亭郭巍
- 关键词:非洲马瘟病毒VP7蛋白间接酶联免疫吸附试验
- 抗马动脉炎病毒N蛋白单克隆抗体的制备被引量:1
- 2012年
- 为制备抗马动脉炎病毒(EAV)衣壳蛋白(N)的单克隆抗体(MAb),本研究通过原核表达重组N蛋白,纯化后免疫6周龄雌性BALB/c小鼠,细胞融合后经间接ELISA筛选获得两株能够稳定分泌抗EAV N蛋白的杂交瘤细胞株,MAbs亚型鉴定为IgG1,轻链为κ链。Western blot结果显示,这两株杂交瘤细胞分泌的MAb均能够识别EAV。EAV N蛋白MAb的制备,为EAV血清学检测方法的建立奠定了基础。
- 赵世华戚亭郭巍李红梅王贵宾刘翠云仇铮田志革王征卢刚潘佳亮相文华
- 关键词:马动脉炎病毒核衣壳蛋白单克隆抗体
- 非洲马瘟病毒VP7蛋白的原核表达及其间接ELISA方法的建立
- 本研究用原核系统成功表达了非洲马瘟病毒(African horse sickness virus,AHSV)群特异性蛋白AHSV-VP7,并建立了一种可快速检测非洲马瘟病毒9个血清型的间接ELISA方法,该方法特异、灵敏...
- 潘佳亮
- 关键词:非洲马瘟病毒VP7蛋白间接酶联免疫吸附试验检测试剂盒
- 文献传递
- 低聚果糖诱导的马急性蹄叶炎模型中三种相关酶质量浓度的变化
- 2015年
- 为探讨基质金属蛋白酶-1(MMP-1)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)和集硅酶-1在低聚果糖诱导的马急性蹄叶炎中发挥的作用,将24匹蒙古马随机分为试验组和对照组,每组12匹。试验组灌服低聚果糖,从灌服后第0到72小时,每隔4h采集1次颈静脉血(5mL),3 000r/min离心10min后用ELISA检测血浆中MMP-1、MMP-9和集硅酶-1的质量浓度。结果显示,MMP-1、MMP-9和集硅酶-1的质量浓度分别在灌服后第24、28和48小时达到峰值,峰值分别为37.96ng/mL±4.91ng/mL、199.37ng/mL±25.39ng/mL和15.11ng/mL±1.50ng/mL,与对照组差异性显著(P<0.05)。结果表明,MMP-1、MMP-9和集硅酶-1的质量浓度随时间发生较大变化,可能在急性蹄叶炎的发展过程中起到重要作用,其中MMP-9可能是关键的分子指标。
- 李欣然姜仁礼王冠颖李玥范晓静刘旭王晶璐潘佳亮陈希马云峰赵洋张宇吴越张建涛于文会高利
- 关键词:低聚果糖基质金属蛋白酶-1基质金属蛋白酶-9
- 不同程度奶牛乳腺炎血清中微量元素含量变化的试验被引量:3
- 2012年
- 为探讨奶牛乳腺炎血清中相关微量元素的变化是否与发病程度之间存在相关性,本试验采用原子吸收分光光度法对健康奶牛、轻度隐性乳腺炎奶牛、重度隐性乳腺炎奶牛和临床型乳腺炎奶牛血清中Zn、Cu、Fe等微量元素的含量进行测定,结果患有乳腺炎奶牛血清中Zn含量低于健康奶牛,并随炎症程度的加剧呈负相关性;Cu和Fe含量高于健康奶牛,含量随炎症程度的加剧呈正相关性。提示奶牛血清中微量元素含量的变化与乳腺炎的发病程度存在着一定的相关性。
- 刘平平潘佳亮刘本君高利
- 关键词:乳腺炎微量元素ZNFECU
- 马急性滑膜炎模型关节液中MMP-3和MMP-13含量变化的研究被引量:1
- 2016年
- 关节滑膜炎是骨关节疾病发病的基本病理过程,试验通过研究马急性滑膜炎关节液中基质金属蛋白酶-3(MMP-3)和基质金属蛋白酶-13(MMP-13)含量的变化,进而研究马滑膜炎机理。试验选用8匹马,在马右侧中间腕关节内注入0.5 ng大肠杆菌脂多糖(LPS)诱导滑膜炎,同时在对侧关节内注入等量的PBS作为对照,于注射药物前和注射药物后的8、24 h和168 h,采马关节液.用ELISA检测马关节液中MMP-3和MMP-13的含量。结果注入LPS的关节液中MMP-3和MMP-13的量在注射后的24 h内持续升高,在24 h达到最大量10.01 ng/mL和6.08 ng/mL,与对照组比较差异性显著,24 h后开始下降,168 h时含量恢复到对照水平。试验结果表明,12'S诱导的滑膜炎模型为一过性的.在急性滑膜炎过程中,MMP-3和MMP-13的表达和释放增加,并且这两种酶在滑膜炎过程中起到重要作用。
- 王冠颖姜仁礼李欣然范晓静李玥刘旭王晶璐潘佳亮陈希马云峰赵洋魏成威韩光高利
- 关键词:滑膜炎基质金属蛋白酶-3基质金属蛋白酶-13
- 奶牛隐性乳房炎敏感性中草药组方随机区组筛选试验被引量:5
- 2012年
- 为了选取效果最佳的中草药组方,试验采用水提醇沉法制备7组以红花、黄连、紫花地丁、蒲公英、连翘、野菊花、浙贝母、当归、柴胡、黄芪、黄柏、黄芩、金银花等中草药为基础的制剂,用7组中草药组方制剂对大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、停乳链球菌进行体外最低抑菌浓度(MIC)、最低杀菌浓度(MBC)试验。结果表明:中草药组方Ⅱ对大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、停乳链球菌的抑菌及杀菌效果最好,与其他中草药组方相比差异显著(P<0.05)。说明中草药组方Ⅱ(黄连、红花、连翘、黄芩)是防治奶牛隐性乳房炎的最佳中草药组方。
- 潘佳亮刘平平魏成威高利
- 关键词:乳房炎中草药组方随机区组试验
- 检测马疱疹病毒4型抗体间接ELISA方法的建立及应用被引量:1
- 2014年
- 为建立检测马疱疹病毒4型(EHV4)抗体的间接ELISA方法,本研究以原核表达的具有型特异性抗原表位的gG蛋白为检测抗原,经条件优化,成功建立检测EHV4抗体的间接ELISA方法,对该方法进行特异性及重复性试验。结果表明,重组4型gG蛋白仅与EHV4阳性血清发生反应,不与马疱疹病毒1型(EHV1)阳性血清发生反应;组内及组间变异系数均小于10%。采用建立的方法与进口试剂盒对不同省份送检的马血清进行检测比较,两者阳性和阴性符合率均在90%以上。本研究建立的间接ELISA方法为检测EHV4抗体及流行病学调查奠定基础。
- 田志革郭巍赵世华潘佳亮冉多良相文华曲娟娟
- 关键词:间接ELISA
- 马急性滑膜炎模型关节液中MMP-2和MMP-9质量浓度变化的研究
- 2015年
- 为探索基质金属蛋白酶-2(MMP-2)和基质金属蛋白酶-9(MMP-9)在马急性滑膜炎模型中的作用,选用13匹蒙古马,将其随机分为试验组(n=8)和对照组(n=5)。在试验组马右侧腕关节内注入0.5ng/mL大肠杆菌脂多糖1mL,建立马滑膜炎模型;在对照组马右侧腕关节注射1mL磷酸盐缓冲液。注射后第0、8、24和168小时各采集关节液1次,用ELISA检测马关节液中MMP-2和MMP-9的质量浓度。结果显示,试验组马在注射后第8小时关节液中MMP-2、MMP-9质量浓度显著增加并达到最高,分别为18.05ng/mL±0.49ng/mL和19.64ng/mL±0.59ng/mL,与对照组比较差异显著。注射后第24小时MMP-2、MMP-9质量浓度下降,第168小时质量浓度恢复到对照组水平。结果表明,MMP-2和MMP-9在滑膜炎的急性期起到重要作用;MMP-2和MMP-9可以作为检测马滑膜炎的指标。
- 范晓静王冠颖姜仁礼李欣然李玥刘旭王晶璐潘佳亮陈希郑宇陈蕊曹馨方马云峰赵洋高利
- 关键词:急性滑膜炎脂多糖基质金属蛋白酶-2基质金属蛋白酶-9
- 马疱疹病毒1型抗体间接ELISA检测方法的建立
- 2013年
- 以原核表达的具有型特异性抗原表位的马疱疹病毒1型(EHV1)gG蛋白作为检测抗原,经条件优化,成功建立了检测EHV1抗体的间接ELISA方法,并对该方法进行了特异性及重复性试验。结果表明:重组EHV1gG蛋白仅与EHV1阳性血清发生反应,不与EHV4阳性血清发生反应;组内及组间变异系数均小于10%。采用建立的方法与进口试剂盒对不同省份送检的马血清进行检测结果比较,两者的阳性和阴性符合率均达到90%以上。表明,建立的间接ELISA方法可以用于检测EHV1抗体。
- 田志革郭巍赵世华潘佳亮冉多良相文华曲娟娟
- 关键词:间接ELISA