潘品良
- 作品数：74 被引量：392H指数：13
- 供职机构：中国疾病预防控制中心性病艾滋病预防控制中心更多>>
- 发文基金：国家科技重大专项中美艾滋病防治合作项目国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学农业科学更多>>
- 干血斑样本用于HIV-1基因序列测定和亚型分析的研究被引量：6
- 2006年
- 目的将干血斑样本用于HIV-1基因序列测定和亚型分析。方法采集20例静脉吸毒HIV-1感染者的EDTA抗凝静脉全血2 ml,80μl制备干血斑样本。QIAamp Blood Mini试剂盒,10％Chelex 100树脂分别提取全血和干血斑中细胞DNA。HIV-1 env基因Gp41区2对外侧和内侧引物,按照巢式PCR方法,扩增Gp41区,PCR产物用内侧正反向引物测序。MEGA 3．0等软件完成序列比对及亚型分析。结果18对符合要求的干血斑和全血样本进入研究。16对经序列分析归为中国流行的BC重组亚型,样本间的基因平均离散率为5．79％,与中国流行的BC重组亚型的基因离散率为4．91％,与C亚型代表序列基因离散率为8．89％,与其他几个国际亚型代表株的基因离散率在15％～20％之间。另2对样本分别归属于泰国B’亚型和欧美B亚型。结论干血斑样本与全血样本HIV-1 DNA PCR产物亚型分析一致,氨基酸序列比对同义和非同义替换比例、位置和类型基本一致,其易采集,便于运输,保存条件和生物危险性低,费用低廉的优点适合作为实验条件较差的偏远地区HIV-1分子流行病学研究的一种样本采集手段。
- 张麒潘品良邓红王临虹蒋岩
- 关键词：艾滋病病毒亚型分析干血斑
- 核酸定量检测试验应用于HIV-1感染实验室诊断的探讨被引量：5
- 2014年
- 目的:探讨核酸定量检测在HIV-1感染实验室诊断中的应用。方法:选取145例第四代抗原/抗体联合诊断筛查试验为阳性反应的血浆样本,分别用Western印迹和HIV-1核酸定量方法进行检测,综合对比分析2种方法检测结果。结果:Western印迹检出阳性样本120例,不确定样本17例,阴性样本8例;HIV-1核酸定量试验检出结果大于检测限样本131例,其中包括12例Western印迹不确定样本、2例Western印迹阴性样本;有3例Western印迹阳性样本用HIV-1核酸定量检测试验未能检出。结论:核酸定量检测试验对于HIV-1感染阳性样本是一种有效的实验室诊断方法;对HIV-1核酸定量检测结果为"TND"的样本,建议加做Western印迹或结合其他补充试验结果进行综合诊断。
- 李繁蒋岩张桂云蒲鑫潘品良
- 关键词：HIV-1核酸定量检测
- 不同人类免疫缺陷病毒2型检测方法的比较研究被引量：3
- 2006年
- 目的通过随访调查16例人类免疫缺陷病毒2型(HIV2)可疑感染者,初步评价HIV2的几种检测方法。方法从贵州省采集既往经HIV1/2免疫印迹(WB)试验检测出现HIV2指示带的16份受检者的全血样品,进行HIV2抗体和核酸检测。血浆中的抗体用HIV1/2ELISA初筛复检,其中阳性样品再分别用HIV1/2线性免疫试验(LIA)和HIV2WB检测。外周血单核细胞(PBMC)中的前病毒DNA用HIV2巢式PCR检测。结果16份血浆样品经HIV1/2ELISA筛查均为HIV抗体阳性;用HIV1/2LIA检测,全部为HIV1抗体阳性,15份为HIV2抗体阴性、1份不确定;用HIV2WB检测,有3份为HIV2抗体阳性、13份不确定。由于这批样品的采样时间距首次检测至少1年以上,可以排除窗口期感染,上述检测结果不确定的受检者均可判为HIV2抗体阴性。此外,用巢式PCR检测所有PBMC样品均为HIV2核酸阴性。结论16例受检者全部为HIV1而非HIV2感染,HIV1/2LIA的抗体检测结果与HIV2核酸检测结果基本相符,而HIV2WB则产生了大量的不确定甚至假阳性结果。
- 邱茂锋孙显光蒋岩潘品良龙小山裴丽健张辉邢文革
- 关键词：HIV-2免疫印迹法核酸检测HIV抗体阳性巢式PCR检测
- 两种HIV-1核酸定量检测试剂盒v2.0的对比研究被引量：9
- 2014年
- 目的比较罗氏COMBAS AmpliPrep/COMBAS TaqMan HIV-1Test version 2.0(简称TagMan v2.0试剂)和生物梅里埃NucliSENS EasyQ HIV-1v2.0(简称EasyQ v2.0试剂)两种试剂,检测艾滋病病毒Ⅰ型(HIV-1)病毒载量间的相关性和一致性。方法对40份血浆样本采用TaqMan EasyQ v2.0试剂和EasyQ v2.0试剂分别检测HIV-1病毒载量。统计学处理采用配对t检验、回归分析和Bland-Altman分析。结果 TaqMan v2.0和EasyQ v2.0试剂测得的病毒载量均值分别为(4.41±0.72)log10拷贝/mL和(3.75±0.75)log10拷贝/mL,差异有统计学意义(t=10.441,P<0.001)。对两种试剂的检测结果进行回归分析表明,两种试剂有较强的相关性(R2=0.817)。用Bland-Altman分析比较两种试剂检测结果的差异均值,结果具有较好的一致性。结论 TaqMan v2.0和EasyQ v2.0两种试剂盒在检测HIV-1病毒载量时具有较好的相关性和一致性。
- 李繁蒋岩屈然小尼玛潘品良
- 关键词：病毒载量
- HIV-1新发感染捕获酶联免疫试验重组抗原的研究被引量：2
- 2019年
- 目的构建、表达1型艾滋病病毒(HIV-1)重组蛋白,并尝试用于HIV-1新发感染捕获酶联免疫试验。方法设计、合成1种HIV-1重组蛋白(编号HIV-Ag-R03)的核酸序列,将它与pET30a-trx载体骨架连接、构建重组质粒。将重组质粒转化BL21(DE3)细胞,经异丙基硫代半乳糖苷诱导表达蛋白质。用重组蛋白包被酶标板,检测48份血浆样品(其中HIV-1抗体阳性、HIV阴性各24份),分析蛋白质的抗原性。将HIV-Ag-R03标记辣根过氧化物酶(HRP)后,取代BED捕获酶联免疫试验(BED CEIA)试剂盒中的BED肽及后续组分,比较2种方法检测18份HIV-1阳性样品的结果相关性。结果成功构建了HIV-Ag-R03的重组质粒,核酸序列确认无误。获得了包涵体表达的蛋白质,经十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳分析大小与预测值一致。使用包被HIV-Ag-R03的间接酶联免疫试验检测48份1∶101稀释血浆样品,结果HIV-1抗体阳性样品的吸光度(OD)值(1.513±0.991)显著高于HIV阴性样品的OD值(0.022±0.008),差异有统计学意义(t=7.336,P<0.01)。用HIV-Ag-R03-HRP取代BED CEIA试剂盒中的BED肽及后续组分,调试HIV-Ag-R03-HRP的最佳稀释度为1∶2 500,18份HIV-1阳性样品的检测结果ODn值与BED CEIA的ODn值相关性好(r=0.939,P<0.01)。结论获得了1种具有抗原性的重组蛋白并成功标记HRP,建立了检测HIV-1新发感染的新模式。
- 狄宇孟婷婷景滢滢刘兴旺段蕾静蒋岩潘品良邱茂锋
- 关键词：重组抗原
- Miseq高通量测序平台用于一起疑似经性传播HIV的溯源调查被引量：13
- 2014年
- 目的 建立分析HIV准种的Miseq高通量测序（简称Miseq测序）技术,并尝试用于一起疑似经性传播HIV的溯源调查.方法 采集疑似有传播关系的2例HIV感染者（编号P1、P2）血液样本,并以同一城市与他们无直接传播关系的2例HIV感染者（编号P3、P4）为对照.提取血浆中RNA,逆转录后进行HIV基因亚型分析和Miseq测序.根据测序结果分析样本中HIV的准种分布,比较使用优势准种数目由少到多（5、20、100、500、全部）时所得的基因离散率及系统进化树.结果 4份样本中HIV的基因亚型相同,均为HIV-1重组亚型（CRF） 01 _AE.采用Miseq测序,每份样本获得23 788～37 397条有效核酸序列,代表1 229～1 412个独特准种.P2与P1间的平均基因离散率（3.5％～4.5％）远小于与对照样本间（10.3％ ～ 19.6％,P＜0.01）.系统进化树结果显示,P1和P2的准种聚集在一起,而P3和P4的各自单独聚为一簇;当所用的优势准种数目为20或更多时,P1对P2存在并系关系,提示HIV的传播方向是从P1到P2.结论 Miseq测序在HIV感染溯源调查中可以推断传播关系和传播方向,其操作较简便、检测成本较低,具有较高的实用价值.
- 赵琦时丽丽蒋岩温玉洁潘品良张桂云邱茂锋
- 关键词：HIV分子流行病学疾病传播准种
- 影响血样样本中HIV-1病毒载量检测值的因素分析被引量：4
- 2006年
- 随着我国艾滋病(AIDS)病人治疗的人数逐年增加,全国艾滋病病毒(HIV)病毒载量检测需求迅速上升,HIV-1病毒载量的检测仪将在全国各省确认中心实验室和艾滋病定点医院得到广泛使用。病毒载量检测值的准确性受样品采集、分离、保存和检测方法等多种因素的影响,直接影响病人治疗效果的评价和监测分析感染阶段。该文综述了国内外有关从样本采集到保存的不同环节,对HIVRNA检测值造成影响的相关因素研究结果,以兹为相关临床检测或研究提供参考。
- 潘品良蒋岩
- 关键词：艾滋病病毒病毒载量检测值
- HIV口腔黏膜渗出液快速检测试剂的方法学评价被引量：1
- 2018年
- 目的构建艾滋病病毒（HIV）口腔黏膜渗出液（OMT）快速检测试剂（RDTs）评价盘,评价HIV OMT RDTs的质量。方法采集健康志愿者的口腔黏膜渗出液,用稀释液稀释HIV抗体阳性和阴性的血浆样本,分别构建实验室基础盘、实验室干扰盘、实验室线性稀释系列盘和实验室精密度盘。用6家HIV OMT RDTs（编号：试剂AF）分别检测构建的评价盘和HIV抗体口腔黏膜渗出液快速试剂的国家参考品,肉眼判读检测结果并测定GOD值。结果根据肉眼判读,试剂AF的敏感性、特异性、阳性参考品符合率、阴性参考品符合率均为100%,分析特异性≥95.12%（39/41）,分析灵敏度≥3/5;试剂D的批内精密度高于其他试剂,试剂F的线性范围为28214。根据GOD值,试剂AE的特异性,阴性参考品符合率均为100%,分析特异性≥95.12%（39/41）,敏感性≥92.50%（37/40）,阳性参考品符合率≥95.00%（19/20）,分析灵敏度≥3/5,线性范围分别为28216、27217、26216、26215、25212,批内精密度介于4.91%34.28%之间。结论试剂AF的敏感性、特异性、阳性参考品符合率、阴性参考品符合率、分析灵敏度、分析特异性较好,试剂BD的线性范围较宽,但饮食因素可能造成试剂D、E出现假反应性,试剂的批内精密度差别较大。
- 马仲慧宫赛赛裴丽健赫晓霞程焕义蒋岩肖瑶潘品良邢文革
- 关键词：艾滋病病毒快速检测试剂
- 检测HIV-1耐药株的异源双链泳动分析技术的建立及临床应用
- 2007年
- 目的探讨利用异源双链泳动分析技术(HMA)检测HIV-1耐药株的可行性和临床应用。方法从接受高效抗逆转录病毒治疗(HAART)的HIV-1感染者血浆中抽提RNA,采用套式RT-PCR方法扩增HIV-1的PR和RT基因片段,并对扩增的基因片段进行异源双链泳动分析。结果本方法对血清中HIV-1RNA含量2000copies/ml以上的样本都能有效扩增。在18例参加HAART治疗的HIV感染者中,17例的HMA结果在聚丙烯酰氨凝胶电泳上,没有出现有意义的异源双链泳动带。1例发现有异源双链二聚体,这1例后经序列测定证实,确定有耐药位点的基因变异。结论异源双链泳动分析技术能够及时、间接地反映HIV-1在治疗过程中耐药株的存在。该方法的建立能在临床上为临床医生制定治疗方法提供参考依据。
- 姚均张福杰赵红心潘品良冯鑫刘志英蒋岩
- 关键词：HIV-1耐药株高效抗逆转录病毒治疗
- Nuclisens EasyQ HIV-1和COBAS AMPLICOR HIV-1 MONITOR^(TM) Test检测集合在HIV-1“窗口期”诊断的比较应用被引量：3
- 2012年
- 目的将Nuclisens EasyQ HIV-1方法与COBAS AMPLICOR HIV-1MONITORTM Test方法检测集合的结果进行比较,并将集合HIV RNA Nuclisens EasyQ方法应用于艾滋病病毒Ⅰ型(HIV-1)"窗口期"的检测。方法采用50:1、10:1二级集合HIV RNA COBAS和EasyQ方法进行检测。结果 (1)两种方法在54份定值血清和质控血浆的阳性检出率均为100%,方法的一致性为94.44%,两方法之间具有显著相关性,相关系数为r=0.855。(2)检测感染者配偶、静脉吸毒者(IDU)及男男性行为人群(MSM)样本集合2 426人份,两种方法检测结果一致,发现3例"窗口期"感染者。结论集合HIV RNA Nuclisens EasyQ方法具有很好的实验性能,可应用于HIV高危人群的"窗口期"检测。
- 职建军潘品良沈圣江华洲郭天骅段松王继宝杨锦杨艳玲蒋岩
- 关键词：艾滋病病毒窗口期
