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王冬冬: 作品数：16 被引量：31H指数：3; 供职机构：青岛农业大学动物科技学院更多>>; 发文基金：现代农业产业技术体山东省现代农业产业技术体系创新团队建设专项资金系建设专项资金山东省自然科学基金国家自然科学基金更多>>; 相关领域：农业科学轻工技术与工程更多>>

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不同致病性H9N2亚型禽流感病毒诱导鸡TLR-7和Mx表达的研究: 本试验研究不同致病性H9N2 亚型禽流感病毒诱导SPF 鸡、SPF 鸡胚和鸡胚成纤维细胞中TLR-7 和Mx 表达的动态变化,为不同致病性H9N2 亚型禽流感病毒诱导IFN-I 产生差异的机制提供依据.150 只6 周龄...; 王建琳曹志伟王冬冬王守春尹燕博

犬链球菌和犬源巴氏链球菌的分离鉴定被引量：2: 2017年; 为确诊4例送检的表现为咳嗽吐血、猝死犬的病因,采集严重病变的肺脏通过PCR检测犬细小病毒、犬瘟热、犬副流感病毒以及犬腺病毒4种常见病毒;并进行细菌分离,对分离菌进行形态特征观察、染色镜检、生化试验、药敏试验以及16S rRNA基因序列分析。结果显示:病毒检测结果均为阴性,分离到2株犬链球菌及2株巴氏链球菌,2种细菌通过小鼠分别进行人工发病试验,复制出与病死犬相似的病理变化,且从小鼠体内再次分离到这2种细菌,由此确定犬链球菌和巴氏链球菌分离物均为致病菌。养殖场结合药敏试验成功对该病进行了控制。; 杨宗统李超姜世浩于鹏孙强孙军昌王冬冬罗宁王森黄凯王守春尹燕博; 关键词：比格犬

我国北方家禽养殖场H9N2亚型禽流感流行情况及对策: H9N2亚型禽流感已对养禽业造成巨大损失,近年来临床中又出现鸡感染H9N2AIV死亡病例.鸡源N9N2病毒为2013年出现的新型H7N9流感病毒提供所有的6个内部基因,严重威胁公共卫生安全.家禽养殖环境中H9N2流感病毒...; 王冬冬王建琳尹燕博张毅刘琳琳范丹丹曹志伟朱梅胜齐娟陆伟徐守振; 关键词：鸡禽流感流行病学饲养管理免疫预防; 文献传递

比格犬α7干扰素成熟肽基因的原核表达及表达产物活性的分析被引量：1: 2014年; 从比格犬的脾中提取基因组DNA,采用RT-PCR方法扩增比格犬α7干扰素成熟肽基因。将纯化的PCR产物克隆至pMD19-T载体,转化入感受态细胞DH5α中,PCR检测及测序鉴定结果表明,克隆的目的基因为比格犬α7干扰素成熟肽,与GenBank中登录的犬干扰素序列(NM001006654)的同源性达到100%。在此基础上构建重组原核表达质粒pET-32a-CaIFN-α7,并转化至表达宿主BL21(DE3)中。该工程菌在37℃经IPTG诱导后进行SDS-PAGE电泳,结果在分子质量约38.4ku处出现了目的蛋白条带,表达产物主要以包涵体形式存在。经Bandscan软件分析,表达产物约占菌体总蛋白的48.5%。用Protein Refolding Kit对包涵体进行纯化复性,重组CaIFN-α7在犬肾细胞(MDCK)上具有较高的抗病毒活性。; 潘福星朱梅胜冯培祥王冬冬范丹丹齐娟王祖荣尹燕博; 关键词：比格犬克隆原核表达抗病毒活性

猪6种常见病毒多重PCR检测方法的建立及应用被引量：4: 2016年; 旨在建立一种可同时检测猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪瘟病毒(CSFV)、猪伪狂犬病病毒(PRV)、猪圆环病毒2型(PCV-2)、猪细小病毒(PPV)和猪巨细胞病毒(PCMV)的多重PCR检测方法。参考相关文献及序列比对结果设计6对特异性引物,建立了可同时检测以上6种病毒的多重PCR方法并应用此方法对临床病例进行了检测。结果表明,所建立的多重PCR方法灵敏度高,对6种病毒的最低核酸检测量分别为12.8pg(PRRSV)、46pg(CSFV)、16pg(PRV)、23.5pg(PCV-2)、72pg(PPV)、8.6pg(PCMV),对猪流感病毒(SIV)、猪乙型脑炎病毒(JEV)、猪流行性腹泻病毒(PEDV)、猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)和猪轮状病毒(PoRV)无特异性扩增。应用该方法对临床145份样品进行检测,总阳性率为83.45%,2种以上病毒混合感染阳性率为69.66%。说明所建立的多重PCR检测方法敏感,可用于猪群中上述6种猪病病原的单一感染或混合感染的鉴别诊断。; 罗宁王冬冬杨宗统孙举徐守振王守春尹燕博徐彪; 关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒猪瘟病毒猪伪狂犬病病毒猪圆环病毒2型猪细小病毒

鸵鸟Ⅰ群禽腺病毒的分离鉴定、血清型鉴定以及Hexon蛋白基因序列分析被引量：9: 2016年; 对3份来自不同地方的病死鸵鸟进行病理剖检、病原分离鉴定,确诊为Ⅰ群禽腺病毒感染,并成功分离到3株鸵鸟FAV-Ⅰ。采用PCR方法成功扩增2株临床分离株的Hexon基因,分别克隆于p MD20-T载体,对其进行了核苷酸序列测定、同源性比较及遗传进化分析。并运用Ⅰ群禽腺病毒12个标准毒阳性血清对其中2株毒进行了血清型鉴定。结果显示,分离株2014.07.10-HBHD-TN、2014.07.19-HBHS-TN与12个标准株之间的同源性在72.5%~98.0%之间,其中与FAV-4的同源性最高是98.0%。在系统进化树中,这两个分离株均位于FAV-I的大分支中,且与FAV-4位于同一小分支。这2个分离株经血清学鉴定均为血清4型的毒株。; 李昌静王冬冬王建琳王守春郭妍妍尹燕博; 关键词：鸵鸟血清学鉴定

比格犬IFN-α和IFN-β mRNA SYBR GreenⅠ荧光定量RT-PCR检测方法的建立被引量：3: 2014年; 为检测比格犬α和β-干扰素(CaIFN-α和CaIFN-β),本研究根据GenBank中登录的IFN-α和IFN-β基因序列,分别设计合成特异性引物,以犬3-磷酸甘油脱氢酶(GAPDH)mRNA为内参,建立SYBR Green I荧光定量RT-PCR检测方法。通过RT-PCR分别扩增IFN-α、IFN-β和GAPDH的基因片段,并克隆于pMD19-T载体中制备标准品,建立荧光定量RT-PCR标准曲线。结果表明:IFN-α和IFN-β和GAPDH基因的Ct值与标准品稀释度在1×102拷贝/μL^1×108拷贝/μL内均呈良好的线性关系,相关系数均大于0.994。组内组间变异系数均小于3%,特异性和重复性较好。同时采用常规RT-PCR方法与本研究建立的方法对30份临床样品检测,结果显示IFN-α和IFN-β的阳性符合率分别为96.43%和96.55%。本研究建立的检测方法为比格犬IFN mRNA的定量分析提供了有效手段。; 潘福星王冬冬曹志伟冯培祥刘宏齐娟孙忠晟王祖荣尹燕博; 关键词：SYBR 比格犬 Β-干扰素

比格犬IFN-α和IFN-β mRNA SYBR GreenⅠ荧光定量RT-PCR检测方法的建立: 　　为检测比格犬α-和β-干扰素(CAIFN-α 和CAIFN-β)，本研究根据GENBANK 中登录的IFN-α和IFN-β 基因序列，分别设计合成特异性引物，以犬3-磷酸甘油脱氢酶(GAPDH)MRNA为内参，建立S...; 潘福星王冬冬曹志伟冯培祥刘宏齐娟孙忠晟王祖荣尹燕博; 关键词：实时荧光定量RT-PCR 比格犬 Β-干扰素

引起幼貂大量死亡的肺炎克雷伯菌的分离和鉴定被引量：5: 2015年; 采用西蒙式枸橼酸盐琼脂培养基从山东威海地区肺出血死亡幼貂的肺脏和肝脏中分离到1株细菌,对所分离的细菌进行形态特征、理化性质、16S rRNA测序鉴定,并对该分离菌进行了药敏试验和人工感染试验。结果显示,该菌16S rRNA序列与GeneBank登录号为CP006648的肺炎克雷伯菌16S rRNA序列同源性为95%,分离菌具有高度的耐药性,对小鼠具有较强致病作用,并可复制出与水貂类似的病理变化,由此推断肺炎克雷伯菌是导致幼貂大量死亡的主要致病菌。; 李超王玉英王冬冬范丹丹王平纪鸿翔尹燕博; 关键词：水貂肺炎克雷伯菌

不同致病性H9N2亚型禽流感病毒诱导鸡TLR-7和Mx表达的研究: 本试验研究不同致病性H9N2亚型禽流感病毒诱导SPF鸡、SPF鸡胚和鸡胚成纤维细胞中TLR-7和Mx表达的动态变化,为不同致病性H9N2亚型禽流感病毒诱导IFN-I产生差异的机制提供依据。150只6周龄SPF鸡随机分为3...; 王建琳曹志伟王冬冬王守春尹燕博

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