王进
- 作品数：3 被引量：11H指数：2
- 供职机构：长春生物制品研究所更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生农业科学更多>>
- 狂犬病毒融合糖蛋白DNA疫苗及免疫效果的研究被引量：2
- 2005年
- 目的:构建含两种狂犬病毒疫苗株的融合糖蛋白基因DNA疫苗并对小鼠的免疫效果进行评价.方法:用RT-PCR法分别扩增和分离出SRV9株和CTN株的狂犬病毒糖蛋白部分表位的基因(SRV9毒株的1～252氨基酸和CTN毒株253～524氨基酸),构建含融合G蛋白基因的DNA疫苗质粒VR1055-SRV9CTN.碱裂解法大量提取重组质粒并经Sepharose 4FF柱层析纯化后直接肌肉注射免疫NIH小鼠,用ELISA法和淋巴细胞转化实验分别检测质粒DNA疫苗诱导小鼠产生抗狂犬病毒的体液免疫和细胞免疫效果.CTLL-2依赖细胞株/MTT比色法进行IL-2活性测定.结果:VR1055-SRV9CTN DNA疫苗具有较好的诱生狂犬病毒抗体能力.诱导细胞免疫方面,质粒VR1055-SRV9CTN DNA疫苗和空载体对照组的ConA刺激指数存在显著性差异(t=7.201,P=0.000).小鼠血清中的IL-2活性测定表明DNA疫苗组显著高于空载体组(t=21.616,P=0.000).CVS株RV脑内攻击保护实验中,疫苗组和对照组小鼠存活率分别为63%、25%,二者间差异具有显著性(t=7.065,P=0.008).结论:含狂犬病毒糖蛋白基因VR1055-SRV9CTN DNA疫苗既能诱导体液免疫又能诱导细胞免疫,具有较好的免疫保护效果.
- 李宇辉谷丽萍崔颖杰代长海袁彦宝郭岩周明岩胡晓明王进于洪涛
- 关键词：狂犬病病毒糖蛋白DNA疫苗体液免疫
- 狂犬病毒糖蛋白DNA疫苗的构建及免疫效果的研究
- 2005年
- 目的构建狂犬病毒糖蛋白基因DNA疫苗,并检测其免疫小鼠的免疫应答。方法用RT-PCR法扩增和分离CTN株狂犬病毒糖蛋白基因,测序后克隆入VR1055载体中,构建重组质粒VR1055-CTN,经碱裂解法提取质粒,并经Sepharose4FF柱层析纯化后免疫NIH小鼠,用ELISA法检测体液抗体,用MTT法检细胞免疫,并进行常规效力试验。结果VR1055-CTNDNA疫苗具有较好的诱导狂犬病毒抗体的能力,在诱导细胞免疫中,刺激脾淋巴细胞转化指数和小鼠血清中的IL-2活性均高于空白载体对照,差异有显著意义(P=0.000)。效力试验的小鼠存活率分别为73%和25%。结论该疫苗既能诱导体液免疫,又能诱导细胞免疫,并具有较好的免疫保护效果。
- 代长海李宇辉袁彦宝郭岩周明岩张莹胡晓明王进于洪涛
- 关键词：DNA疫苗狂犬病毒免疫效果病毒糖蛋白SEPHAROSE
- 用微载体系统培养Vero细胞生产高滴度狂犬病毒液被引量：9
- 2004年
- 目的 采用生物反应器微载体培养Vero细胞生产高滴度狂犬病毒液。方法 用 5L生物反应器培养Vero细胞 ,培养至 4d时接种CTN株狂犬病毒 ,在培养全程对细胞生长所消耗的营养物质及代谢产物进行监测及分析。结果 培养 4d后细胞浓度可达 1 2× 10 7cells ml,培养 3周后的病毒液经ELISA检测A值可达 0 2 1～1 0 6。病毒滴度达 10 - 6 0 ～ 10 - 8 0 LogLD50 ml。病毒液可连续收获 5次。结论 用微载体系统培养Vero细胞可生产高滴度的狂犬病毒液。
- 王树君代长海张莹王进李宇辉胡晓明李光谱于洪涛
- 关键词：VERO细胞
