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王迪

作品数:4 被引量:7H指数:2
供职机构:中国医科大学更多>>
发文基金:国家教育部博士点基金国家自然科学基金辽宁省高校创新团队支持计划更多>>
相关领域:生物学医药卫生更多>>

文献类型

  • 4篇中文期刊文章

领域

  • 3篇生物学
  • 1篇医药卫生

主题

  • 3篇蛋白
  • 3篇质粒
  • 2篇融合蛋白
  • 2篇重组蛋白
  • 2篇重组蛋白表达
  • 2篇组蛋白
  • 2篇细胞
  • 1篇蛋白纯化
  • 1篇原核
  • 1篇粘蛋白
  • 1篇真核
  • 1篇真核表达
  • 1篇真核表达质粒
  • 1篇质粒构建
  • 1篇乳腺
  • 1篇乳腺癌
  • 1篇乳腺癌细胞
  • 1篇乳腺癌细胞系
  • 1篇重组质粒
  • 1篇细胞系

机构

  • 4篇中国医科大学
  • 2篇辽宁省人民医...
  • 1篇杭州师范大学...

作者

  • 4篇张红艳
  • 4篇李彦姝
  • 4篇李丰
  • 4篇王迪
  • 4篇王春玉
  • 2篇姚远
  • 1篇柯强

传媒

  • 2篇东南大学学报...
  • 1篇解剖科学进展
  • 1篇吉林大学学报...

年份

  • 3篇2012
  • 1篇2011
4 条 记 录,以下是 1-4
排序方式:
乳腺癌细胞系中雌激素下调E-钙粘蛋白表达水平被引量:2
2012年
目的观察雌激素(E2)对乳腺癌MCF7细胞中E-钙粘蛋白基因(CDH)的调控。方法使用Western blot、Real Time PCR分别在蛋白和RNA水平上观察雌激素如何影响E-钙粘蛋白。使用双荧光素酶报告系统检测雌激素如何影响E-钙粘蛋白启动子活性。结果雌激素下调乳腺癌MCF7细胞中E-钙粘蛋白的蛋白和RNA水平,并且能够下调E-钙粘蛋白的启动子活性。结论雌激素下调乳腺癌细胞中E-钙粘蛋白基因,为进一步探讨乳腺癌发病机制提供有力证据。
张红艳李彦姝王春玉王迪柯强李丰
关键词:雌激素E-钙粘蛋白
pGEX-5X-1-hLMO4原核质粒构建及重组蛋白表达被引量:4
2012年
目的:构建hLMO4的原核表达载体并诱导、纯化和鉴定其表达。方法:hLMO4全长编码基因经BamHⅠ和XhoⅠ双酶切后,克隆至GST融合表达载体pGEX-5X-1,异丙基β-D硫代半乳糖苷(IPTG)在BL21大肠杆菌中诱导GST-hLMO4融合蛋白表达,利用Glutathione Sepharose 4B纯化诱导的融合蛋白,并经Western blot鉴定结果。结果:hLMO4编码序列克隆至pGEX-5X-1载体中,双酶切鉴定片段大小为500 bp,在E.coli BL21中IPTG诱导融合蛋白的表达,分子质量约为49 000 Da,成功纯化出GST及GST-hLMO4蛋白,Western blot检测到蛋白表达。结论:构建了hLMO4基因原核表达载体,鉴定了GST-hLMO4融合蛋白表达。
张红艳李彦姝姚远王春玉王迪李丰
关键词:蛋白纯化融合蛋白
3*Flag-hPAK4重组质粒的构建及其在COS7细胞中的表达与定位被引量:1
2011年
目的:构建3*Flag-hPAK4真核表达质粒,证实融合蛋白在细胞内的表达与定位,并纯化PAK4蛋白。方法:提取人乳腺癌细胞MCF-7 mRNA,反转录为cDNA。PCR扩增hPAK4全长编码基因,亚克隆至含有3*Flag标签的真核表达载体中。将构建的重组质粒测序并转染到非洲绿猴肾成纤维细胞COS7中,提取细胞蛋白进行Western blotting检测,同时利用共聚焦激光扫描显微镜观察3*Flag-hPAK4在COS7细胞内定位。使用免疫沉淀的方法纯化PAK4蛋白。结果:hPAK4全长基因序列克隆到了真核表达载体3*Flag中,酶切鉴定片段为1 800 bp。Western blotting检测到了融合蛋白3*Flag-hPAK4的表达,分子质量约为68 kDa,3*Flag-hPAK4在COS7细胞中表达定位在细胞浆中,成功纯化了PAK4蛋白。结论:成功地构建了3*Flag-hPAK4真核表达质粒,同时鉴定了3*Flag-hPAK4融合蛋白的表达,并纯化了PAK4蛋白。3*Flag-hPAK4蛋白主要定位在细胞浆中。
张红艳王春玉李彦姝王迪李丰
关键词:免疫沉淀
Smad2/3/4真核表达质粒的构建及重组蛋白表达
2012年
目的:构建pcDNA3.1myc-HisA-Smad2/3/4真核表达质粒,证实融合蛋白在细胞内表达。方法:以pcDNA3.1-Smad2/3和pGEX2T-Smad4质粒为模板,设计特异性引物,PCR扩增Smad2/3/4全长编码基因,亚克隆至含有pcDNA3.1myc-HisA标签的真核表达载体中。将构建的重组质粒测序并转染到人胚胎肾细胞HEK293中,提取细胞蛋白进行Western blotting检测。结果:Smad2/3/4全长基因序列克隆到真核表达载体pcDNA3.1myc-HisA中,酶切鉴定片段为1 401、1 275和1 656 bp。Western blotting检测到融合蛋白pcDNA3.1myc-HisA-Smad2/3/4的表达。结论:成功构建pcDNA3.1myc-HisA-Smad2/3/4真核表达质粒,同时鉴定其融合蛋白的表达。
张红艳王春玉姚远李彦姝王迪李丰
关键词:SMAD融合蛋白
共1页<1>
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