白天
- 作品数：12 被引量：32H指数：3
- 供职机构：中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划国家科技重大专项更多>>
- 相关领域：医药卫生农业科学生物学更多>>
- 多重RT-PCR结合反向杂交技术检测多种流感病毒方法的研究
- 2010年
- 目的 建立一种基于多重RT-PCR结合反向斑点杂交技术的多种流感病毒核酸快速检测方法.方法 对5种亚型流感病毒的HA基因序列进行比对分析,选择合适的保守区域设计引物序列,并在扩增产物序列内部选择高变区设计探针序列.首先,使用生物素标记的引物扩增出同样带标记的PCR产物;然后,产物与膜上的探针杂交,通过生物素-亲和素反应,最后以斑点显色的方式来检测和鉴别不同亚型的流感病毒.实验中还通过摸索不同的引物浓度和探针浓度来优化反应条件.结果 成功建立了一种基于多重RT-PCR结合反向斑点杂交技术的检测方法,该方法能够成功检测和鉴别5种不同亚型的流感病毒,检测灵敏度比传统的RT-PCR方法高100～1000倍.结论 成功建立了一种可高通量快速检测多种流感病毒的多重RT-PCR结合反向斑点杂交技术的检测方法.
- 杨亮张晓梅张晓光马晶王敏温乐英王大燕白天舒跃龙钱永华曾毅
- 关键词：聚合酶链反应杂交流感
- 中国职业暴露人群感染H9N2禽流感病毒血清学调查被引量：22
- 2015年
- 目的评估我国职业暴露人群感染H9N2禽流感病毒的风险因素。方法利用2009 2011年间在我国22个省(直辖市、自治区)采集的职业暴露人群血清13 715份,筛选了在我国主要流行的G9系毒株A/Chicken/AK4/Anhui/2011作为检测抗原,使用血凝抑制方法初筛和微量中和方法复核两种血清抗体检测方法,在我国大陆地区开展系统的H9N2禽流感病毒血清学研究。结果 H9N2禽流感病毒在中国职业暴露人群的中和抗体血清阳性率为0.41%(63份阳性血清标本)。所有家禽职业暴露人群均有阳性血清标本检出,活禽市场暴露人群感染H9N2禽流感病毒风险显著高于其他职业暴露人群。结论活禽市场是人感染禽流感病毒的重要暴露风险因素。加强H9N2禽流感病毒在我国职业暴露人群的监测,对于有效评估和防控禽流感对人类的危害具有重要的意义。
- 辛丽白天周剑芳唐静陈永坤陈涛史景红李晓丹李燕朱闻斐高荣保王大燕舒跃龙
- 关键词：禽流感H9N2职业暴露人群血清学调查
- 含有H5N1 NA基因重组腺病毒疫苗在小鼠体内的免疫效果研究被引量：1
- 2009年
- 目的考察含有禽流感病毒A／Anhui／1／2005（H5N1）优化型NA基因的重组腺病毒在BALB／c小鼠体内的免疫效果，并筛选合适的免疫剂量。方法重组病毒以肌内注射方式在第0周和第4周免疫BALB／c小鼠两次，低、中、高组的免疫剂量分别是10^5、10^7和10^9 TCID50/次，第5周时分别使用神经氨酸酶活性抑制试验和ELISpot实验来检测和比较疫苗的体液和细胞免疫效果。结果重组病毒免疫后的小鼠均可检测出针对NA抗原的特异性体液和细胞免疫反应，并且免疫效果与免疫剂量呈正相关，10^7 TCID50／只／次是合适的免疫剂量。另外，从包含NA全长氨基酸残基的合成肽库中筛选到两个能够刺激BALB／c小鼠T淋巴细胞分泌IFN-γ的表位，即NA109-124：CRTFFLTQGALLNDKH和NA182-199：AVAVLKYNGIITDTIKSW。结论含有优化型NA基因的重组腺病毒疫苗能够诱导BALB／c小鼠同时产生NA抗原特异性的体液和细胞免疫反应，是较好的H5N1流感病毒候选疫苗株，值得进一步深入研究。
- 马晶张晓光李魁彪张晓梅王敏白天杨亮徐红舒跃龙曾毅
- 关键词：神经氨酸酶腺病毒免疫
- 一种重组流感病毒及其应用
- 本发明公开了一种重组流感病毒及其应用。本发明提供了一种制备重组病毒的方法，包括如下步骤：将HA6亚型流感病毒血凝素的编码基因、流感病毒神经氨酸酶NA基因、流感病毒内部6个基因PB2、PB1、PA、NP、M和NS共同导入宿...
- 周剑芳秦堃朱云白天王大燕舒跃龙
- 文献传递
- H5N1-NP蛋白的原核表达及与宿主蛋白相互作用的初步研究被引量：1
- 2010年
- 目的 原核表达并纯化禽流感病毒A/Anhui/1/2005（H5N1）的NP蛋白,并筛选人支气管上皮BEAS-2B细胞总蛋白中能够与纯化的NP蛋白相互作用的蛋白.方法 一方面,构建了含有NP基因的原核表达质粒pET30a-NP,并在大肠埃希菌中获得了可溶性表达.亲和层析和离子交换层析两步对NP蛋白进行纯化.另一方面,制备了BEAS-2B细胞总蛋白.在此基础上,联合应用Pull-down与LC-MS/MS技术来筛选并确认细胞中与纯化的NP蛋白相互作用的成分.结果 构建的pET30a-NP质粒在IPTG诱导下在原核细胞中实现了可溶表达,经过两步纯化后,得到可溶的NP蛋白纯品.Pull-down与LC-MS/MS技术初步筛选到BEAS-2B细胞中20个可能与NP蛋白相互作用的细胞蛋白.还需要进一步的实验来验证他们和NP蛋白之间的相互作用.结论 获得了高纯度的可溶NP蛋白及筛选到20个可能与其相互作用的BEAS-2B细胞候选蛋白.
- 王乃福马晶张晓光张晓梅白天王敏温乐英王大燕舒跃龙周玲曾毅
- 关键词：流感病毒A型核蛋白类蛋白质相互作用
- 以防控人感染H7N9禽流感为代表的新发传染病防治体系重大创新和技术突破
- 李兰娟舒跃龙管轶冯子健袁国勇高福袁正宏王宇余宏杰王大燕高海女王辰郑树森杨仕贵杨维中曹彬陈鸿霖李群朱华晨周剑芳刘翟高荣保吴南屏胡芸文姚航平张曦俞亮郑书发吴凡卢洪洲王嘉夏时畅崔大伟白天梁伟峰林赞育武桂珍揭志军郭静杜启泓盛吉芳刁宏燕向妮娟杨益大赵翔汤灵玲邹淑梅余斐朱丹华
- 新发突发传染病始终是全球安全的重大威胁和人类面临的严峻挑战。2003年中国SARS的惨痛教训记忆犹新。为了有效应对新发传染病，项目组承担国家任务，创建国家平台，汇聚国家力量，发挥举国体制优势，协同攻关。2013年春，长三...
- 关键词：
- 关键词：禽流感
- H5N1禽流感病毒HA假病毒的构建及特性研究
- 2009年
- 目的构建包膜蛋白为H5N1禽流感病毒HA蛋白的假病毒，对其生物学特性进行研究，并将其初步应用于H5N1禽流感病毒的血清检测。方法将我国分离的高致病性H5N1禽流感病毒的HA基因插入真核表达质粒，得到pLP-HA，与假病毒构建体系的三种质粒pLP1，pLP2和pEmGFP，瞬时共转染人胚肾细胞293T，48h收集假病毒上清，对其感染性，血凝活性进行测定，并应用于微量中和实验。同时，构建了优化HA基因的假病毒以及一株含有越南禽流感病毒HA基因的假病毒，进行比较。结果电镜下观察到假病毒颗粒的存在；Western-Blot表明HA蛋白存在于假病毒颗粒中；HA假病毒与野生型活病毒的微量中和实验相比，两者结果具有很好的相关性。结论成功构建了不同高致病性H5N1禽流感病毒HA蛋白的假病毒，所构建的假病毒可以应用于微量中和实验。研究发现不同禽流感病毒株HA蛋白假病毒的包装效率不同，并且真核表达优化基因并不能显著提高假病毒颗粒包装效率。
- 张玉松王大燕高荣保董婕李梓张晔白天王敏温乐英舒跃龙
- 关键词：类病毒流感病毒A型血凝素类
- 速度、反应和力量——中国流感监测网络在人感染H7N9禽流感疫情应对中发挥的作用被引量：4
- 2015年
- 2013年3月,新型甲型流感病毒(H7N9)人类感染首次被发现在我国华东地区。覆盖我国大陆31个省(自治区、直辖市)所有地市以及新疆生产建设兵团的流感监测网络,从迅速确定病原,明确流行规律,到建立检测技术,及时下发各地检测试剂;从实时开展监测,到疾病防控和科研部门及时对该病毒特性进行了科学研究,评估了传播风险,为政府部门科学制订防控措施提供了依据。中国流感监测网络在这次疫情应对中发挥了至关重要的作用。
- 陈涛王大燕白天杨静汪立杰祝菲李越严文婧舒跃龙
- 关键词：禽流感疫情监测网络
- 1977年俄罗斯流感的流行病学概述被引量：3
- 2009年
- 高燕孙闪华刘微姚媛媛白天李希妍徐翠玲郭元吉李德新舒跃龙
- 关键词：流感流行病学青少年年龄组
- 一种重组流感病毒及其应用
- 本发明公开了一种重组流感病毒及其应用。本发明提供了一种制备重组病毒的方法，包括如下步骤：将HA6亚型流感病毒血凝素的编码基因、流感病毒神经氨酸酶NA基因、流感病毒内部6个基因PB2、PB1、PA、NP、M和NS共同导入宿...
- 周剑芳秦堃朱云白天王大燕舒跃龙
- 文献传递
