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富血小板血浆对体外培养条件下人真皮成纤维细胞增殖能力的影响被引量：6: 2011年; 目的:探讨富血小板血浆(PRP)对人真皮成纤维细胞(hDFbs)在体外培养条件下增殖能力的影响,探讨PRP促进皮肤、黏膜伤口愈合的机制。方法:PRP和hDFbs来源于健康成年人,两次离心法制备PRP,倒置相差显微镜观察0、12.5%、25.0%、50.0%和100.0%PRP浓度作用下hDFbs的增殖;免疫细胞化学检测50.0%浓度不同剂量PRP作用下细胞血小板源性生长因子(PDGF)的表达;荧光染色技术观察PRP作用下hDFbs在纯钛材料表面的生长;流式细胞术检测PRP培养后不同时间hDFbs细胞周期;CCK-8法检测不同浓度PRP培养条件下细胞增殖活力。结果:倒置相差显微镜下见PRP各浓度组细胞数量均多于对照组,细胞数量增加、折光性增强;免疫细胞化学检测,30μL PRP组PDGF表达量最高且细胞密度最大,但10μL PRP组累积吸光度值(IOD)高于20μL PRP组(836.27±21.15 vs 794.35±30.26,P<0.05);荧光染色技术观察,PRP组材料表面hDFbs细胞密集,数量较对照组高;细胞周期检测,PRP促进细胞进入S期进行DNA复制,PRP作用后第2天PRP组S期细胞百分比高于空白组(34.41%vs 22.00%,P<0.05),第8天PRP组G0/G1期细胞百分比高于空白组(95.07%vs 89.70%,P<0.05);CCK-8测定细胞增殖活性,100.0%PRP组吸光度A450值高于12.5%PRP组(34.41%vs 22.00%,P<0.05)。结论:高浓度的PRP虽然表现较强的促细胞增殖作用,但并不存在浓度、剂量依赖性,适宜浓度的PRP可促进hDFbs的增殖。; 王悦马英智朱喆苏学今周延民; 关键词：人真皮成纤维细胞富血小板血浆细胞增殖

蒺藜皂苷对H_2O_2诱导PC12细胞凋亡保护作用及其机制研究被引量：2: 2008年; 目的探讨蒺藜皂苷(gross saponin of Tribulus terrestris,GSTT)对H2O2诱导大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞(pheochromocytoma cells,PC12)凋亡的保护作用及其机制。方法实验分为对照组、模型组及蒺藜皂苷高(GSTT1)、低(GSTT2)剂量组。用H2O2刺激PC12细胞使其发生凋亡,MTT法检测PC12细胞活性,流式细胞仪检测细胞凋亡率及线粒体膜电位的变化,Western blotting检测凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax。结果与模型组比较蒺藜皂苷组随着剂量的增加PC12细胞存活率提高(P<0.001),凋亡比率下降(P<0.01),线粒体膜电位回升(P<0.01),Bcl-2表达增加(P<0.05),而Bax的表达降低(P<0.05)。结论蒺藜皂苷可抑制H2O2诱导的PC12细胞凋亡,其机制可能与抑制线粒体途径的细胞凋亡有关。; 姜恩平苏学今李红杨世杰; 关键词：蒺藜皂苷 PC12细胞 H2O2 凋亡

恶性卵巢肿瘤患者外周血T淋巴细胞亚群的检测分析被引量：5: 2009年; 目的:探讨卵巢癌患者外周血T淋巴细胞亚群与各临床病理指标相关变化及意义。方法:采用流式细胞术(FCM)对61例恶性卵巢肿瘤(原发肿瘤53例,转移性肿瘤8例)患者术前进行外周血T淋巴细胞亚群检测,并与28例健康妇女进行定量比较分析。同时就原发性卵巢癌与各临床病理因素进行统计学分析。结果:53例上皮性卵巢癌及8例转移性恶性卵巢肿瘤T淋巴细胞亚群中CD8+明显高于健康对照组(P<0.01),CD3+、CD4+、CD4+/CD8+均明显低于健康对照组(P<0.05或P<0.01)。肿瘤患者外周血T淋巴细胞变化与年龄、癌块大小、腹水量、组织分化程度、FIGO临床分期、CA125水平有关,但与组织类型无关。结论:恶性卵巢肿瘤患者T淋巴细胞免疫功能受到明显抑制,且与早期诊断及预后相关的临床病理指标有密切联系。; 王倩马晓艳郭琛苏学今; 关键词：恶性卵巢肿瘤 T淋巴细胞亚群细胞免疫功能

通过体内传代和流式分选建立稳定转染MUC1 VNTR的B16细胞株被引量：5: 2008年; 目的获得具有较好致瘤性、在动物体内保留表达外源基因MUC1 VNTR(mucin1,variable number tandemrepeats)能力的稳定转染细胞株B16-GFP-MUC1,供MUC1靶向药物研究中体内抑瘤实验所用到的肿瘤模型。方法用脂质体转染的方法和有限稀释法获得单克隆细胞株;将该细胞株进行体内传代后,流式分选GFP阳性细胞群,并对分选后细胞用有限稀释法进行单克隆化。用流式细胞仪和共聚焦荧光显微镜观察各时期细胞克隆的GFP表达情况。结果脂质体转染方法得到的在G418压力选择下存在的细胞B16-1,其GFP阳性细胞比率最高为80%左右;致瘤性较差,75d内仅87.5%小鼠出瘤;体外的稳定性观察中,在无抗生素的培养液中观察5周,其阳性率降至20%左右;经过体内接种后仅有10%左右的肿瘤细胞保留了外源基因的表达。而经过体内传代和流式分选后得到的单克隆细胞群B16-39,其GFP阳性细胞比率>90%;致瘤性为20d内100%小鼠出瘤;体外培养8周,GFP阳性的细胞比率>90%;体内剥离后的肿瘤细胞的GFP阳性细胞比率均>90%。结论对于用于体内动物模型的稳定转染细胞,通过体内传代,流式分选并单克隆化,是获得致瘤性好,体内体外较为稳定的稳定转染细胞株的一个可行方案。; 陈亚静苏学今王丽颖于永利; 关键词：稳定转染流式细胞术 MUC1 VNTR

RhoC基因沉默对肝癌细胞增殖的影响被引量：6: 2008年; 目的构建靶向RhoC基因的RNA干扰(RNAi)载体,并研究RhoC基因沉默对肝癌细胞增殖的影响。方法将合成的寡核苷酸片段克隆入RNAi载体,并转染肝癌细胞,以沉默RhoC基因表达,RT-PCR检测基因抑制效果。绘制生长曲线,检测转染细胞的增殖情况,FCM检测细胞周期变化。结果构建的RNAi载体有效地抑制了肝癌细胞RhoC基因的表达,RhoC基因沉默显著地抑制肿瘤细胞增殖,增殖期细胞百分数显著下降,而静止期细胞百分数显著升高。结论RhoC基因沉默能够抑制肝癌细胞的增殖,为靶向RhoC的肿瘤基因治疗奠定了基础。; 谢淑丽陈志明苏学今孙梅全成实; 关键词：基因沉默 RHOC RNA干扰细胞增殖

长春新碱对人成骨肉瘤MG63细胞的促凋亡作用及其机制被引量：2: 2010年; 目的:观察长春新碱对人成骨肉瘤MG63细胞促凋亡作用,探讨其引起细胞凋亡的分子机制。方法:以0、5、10、20、50、100μg.L-1不同浓度长春新碱处理的MG63细胞,分别经AnnexinV-PI双染和DCFH-DA染色后,应用流式细胞仪检测细胞凋亡和细胞内活性氧化物(ROS)水平,用实时定量RT-PCR分析mRNA表达水平。结果:较低浓度(10μg.L-1)长春新碱即可使MG63细胞凋亡率升高至17.6%(P<0.05),且随着长春新碱浓度的增加细胞凋亡率增加,呈明确的剂量-效应关系;更低浓度(5μg.L-1)长春新碱即可引起细胞内ROS水平明显升高及过氧化氢酶(CAT)基因表达下调(P<0.05)。结论:长春新碱从较低浓度起即有促进细胞凋亡作用,其作用机制是通过下调CAT基因表达,导致细胞内ROS异常蓄积以促进MG63细胞凋亡。; 王洋苏学今曲珊珊娄楠张海英史艳芬李玉林李荣贵; 关键词：MG63 长春新碱 CAT

射干、金银花等八种中药抗真菌实验研究被引量：35: 2007年; 目的:体外观察射干、金银花等8种中药对新型隐球菌、镰刀、白色念珠菌、曲霉等临床分离的9种致病真菌的作用。方法:本实验应用试管法对射干、金银花、土槿皮、蛇床子、苦参、虎杖、黄连、黄岑等八种中药对9种临床分离的致病性真菌的抗真菌作用进行了研究。结果:射干的最小抑菌浓度MIC:25 mg/ml,金银花的MIC:100 mg/ml,土槿皮的MIC:25 mg/ml,蛇床子的MIC:25 mg/ml,苦参的MIC:25 mg/ml,虎杖的MIC:25 mg/ml,黄连的MIC:200 mg/ml,黄岑的MIC:12.5 mg/ml,黄连对9种致病真菌无作用外,其余7种中药均对9种致病真菌均有疗效。结论:中草药抗真菌效果较好,为临床治疗提供了依据。; 于军苏学今王丽; 关键词：射干金银花土槿皮蛇床子微生物敏感性试验

国人前列腺癌组织学变化、生长因子与凋亡及其调控基因表达的研究: 随着人口老龄化及饮食生活习惯等诸多因素的改变,前列腺癌的临床诊断率逐年增加.在美日等国应用血清PSA进行筛查,改变了前列腺癌晚期诊断的历史,手术摘除的前列腺癌病例明显增加,病理组织的Gleason评分在7分以下者超过70...; 苏学今; 关键词：前列腺癌病理组织学细胞生长因子凋亡相关基因; 文献传递

人前列腺癌PC3细胞亚群的分离及其生物学行为分析: 2010年; 目的研究人前列腺癌PC3肿瘤细胞系中是否存在具有干细胞特征的细胞亚群,并对其形态及克隆生长特征进行分析,同时探讨染料Rho123着色强度是否可用于区分不同的肿瘤细胞亚群。方法采用Rho123染色后流式细胞仪分析;Rho123与DAPI复染后荧光显微镜下形态学观察及细胞克隆生长特征分析等方法。结果PC3细胞中存在对Rho123着色显著差异的两类细胞亚群,其形态结构、增殖能力及克隆生长方式均有明显差别。结论人前列腺癌PC3细胞系中存在具有干细胞特性的细胞亚群,对Rho123拒染的特性可用于区分肿瘤干细胞与其他肿瘤细胞。; 曲珊珊李荣贵苏学今张海英王洋李玉林; 关键词：前列腺癌罗丹明123 肿瘤干细胞

一次细胞融合制备分泌抗狂犬病毒单抗杂交瘤及分泌抗独特型单抗杂交瘤的实验研究: 1997年; 根据独特型与抗独特型的免疫网络与免疫调节学说，利用狂犬病毒作为免疫原，设计了不同的动物免疫方案，免疫Ｂａｌｂ／ｃ小鼠，免疫脾细胞与骨髓瘤细胞经一次融合，同时获得了分泌抗狂犬病毒单克隆抗体杂交瘤及分泌狂犬病毒抗独特型单克隆抗体杂交瘤，为抗独特型抗体的制备开辟了一条简捷经济的途径。; 苏学今李一雷陈远耀王传庆; 关键词：细胞融合抗独特型狂犬病毒杂交瘤

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