袁远华
- 作品数：12 被引量：53H指数：6
- 供职机构：华南农业大学兽医学院更多>>
- 发文基金：广东省科技厅农业攻关项目广东省科技计划工业攻关项目河南省教育厅自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 结肠小袋纤毛虫体外药物急性毒杀试验被引量：8
- 2009年
- 通过结肠小袋纤毛虫对甲硝唑、氟苯尼考和血虫净(三氮咪)的急性毒性试验,以机率单位法获得半数致死浓度(LC50),结果显示:甲硝唑、氟苯尼考对结肠小袋纤毛虫2 h的半数致死浓度(LC50,2 h)分别是457.8 mg/L,1705 mg/L,12 h的半数致死浓度(LC50,12 h)分别是25.64 mg/L、973.8 mg/L。血虫净(三氮咪)12h和24h半数致死浓度(LC50)分别是331.8 mg/L、295.4 mg/L。甲硝唑是杀灭结肠小袋纤毛虫的理想药物。
- 刘翠邓书民谷伟霞袁远华胡文发王天奇
- 关键词：结肠小袋纤毛虫
- 1株番鸭源新型鸭呼肠孤病毒(QY株)生物学鉴定被引量：13
- 2013年
- 从广东清远地区临床病变为发病鸭软脚,肝、脾肿大,有点/块状出血、坏死,其他各脏器不同程度出血的病死雏番鸭肝、脾组织中分离到1株病毒。通过形态观察、核酸图谱鉴定、RT-PCR扩增、基因序列分析、动物回归试验结果表明,该病毒为一株不同于以往番鸭呼肠孤病毒的新型鸭呼肠孤病毒,并命名为DRV-QY株。
- 袁远华王俊峰吴志新黄兴国贺东生黄淑坚
- 关键词：番鸭生物学鉴定
- RPMI 1640体外培养结肠小袋纤毛虫的正交试验被引量：2
- 2010年
- 利用L9(34)正交试验,研究了淀粉量、小牛血清比例和初始pH值3个因素对结肠小袋纤毛虫在RPMI 1640培养基中最高种群密度的影响。方差分析结果表明,初始pH值对最高种群密度影响最大,其次为小牛血清比例,淀粉量影响最小。最佳培养基组成为淀粉40mg/瓶、血清25%(RPMI 1640培养液2.25mL+小牛血清0.75mL);最适宜的RPMI 1640培养液初始pH值为7.0。
- 刘翠谷伟霞邓书民袁远华胡文发闫文朝王天奇
- 关键词：结肠小袋纤毛虫正交试验RPMI
- 一株基因Ⅸ型鸭源新城疫病毒F基因的克隆及序列分析被引量：6
- 2012年
- 从广东地区疑似患有新城疫的病死雏番鸭群中分离到1株新城疫病毒,命名为GD1002株。毒力测定结果表明,致死鸡胚平均死亡时间(MDT)、1日龄雏鸡脑内接种致病指数(ICPI)、6周龄鸡静脉接种致病指数(IVPI)分别为56.0h、1.64、2.29,符合强毒株的毒力判断标准。利用RT-PCR扩增了该分离株F基因的主要功能区片段,并进行了克隆与序列分析。该分离株F蛋白裂解位点的组成为112 R-R-Q-R-R-F117,具有典型新城疫强毒株的分子特征。F基因第47-420nt片段基因分型分析表明,该流行株属于基因Ⅸ型。相似性及遗传进化分析结果表明,该分离株与基因Ⅸ型毒株F48E9、JS/1/97/Ch和FJ/1/85/Ch株有较高同源性和较近的亲缘关系。
- 袁远华王俊峰蔡丽丽黄兴国梁小英曹伟胜黄淑坚
- 关键词：新城疫病毒F基因克隆
- 三黄鸡ST6基因的半定量RT-PCR分析
- 2013年
- 本研究旨在对三黄鸡ST6(ST6GalⅠ和ST6GalⅡ)基因进行组织表达谱分析。参考鸡ST6GalⅠ和ST6GalⅡ基因序列设计引物,利用半定量RT-PCR进行了组织表达谱分析。结果表明,ST6GalⅠ和ST6GalⅡ基因在各组织均有不同程度的表达,其中ST6GalⅠ在心脏中表达最高,脑中最低;ST6GalⅡ在胸腺中表达最高,在肝脏中表达最低。ST6GalⅠ在各组织中的表达比其相应组织中ST6GalⅡ的表达要低。
- 周飞于梦刘荣昌袁远华宁章勇
- 关键词：半定量
- 猪圆环病毒2型多抗原表位串联在大肠杆菌中表达与反应原性分析被引量：2
- 2012年
- 为将猪圆环病毒2型(PCV2)的多个抗原表位串联,并在大肠杆菌中表达,本研究人工合成PCV2多抗原表位串联的编码序列并与pET32a(+)载体连接构建重组表达质粒。将其转化到BL21感受态细胞,经IPTG诱导表达。检测结果显示,多抗原表位串联基因在大肠杆菌中获得表达并以包涵体形式存在;表达的融合蛋白分子量约为27 ku。将包涵体溶解并经Ni-His柱纯化得到纯化的目的蛋白,western blot和ELISA结果显示,该表达产物具有较好的反应原性。
- 蒋伟袁远华廖晓鸿苏丹萍贺东生
- 关键词：猪圆环病毒2型原核表达
- 三黄鸡α-2,3唾液酸转移酶Ⅲ基因的克隆及其在293T细胞中的表达
- 2013年
- 唾液酸转移酶催化机体唾液酸的形成,与流感病毒感染的种属特异性具有密切的关系。以三黄鸡法氏囊组织总RNA为模板,运用RT-PCR方法扩增了三黄鸡α-2,3唾液酸转移酶Ⅲ(ST3GalⅢ)基因。将其克隆到带有加强型绿色荧光蛋白(EGFP)报告基因的pIRES2真核表达载体中,对重组质粒pIRES2-EGFP-ST3GalⅢ进行酶切和测序鉴定后,采用阳离子脂质体转染法将重组质粒转染到293T细胞,荧光显微镜和West-ern blot检测观察其表达情况。结果表明,转染pIRES2-EGFP-ST3GalⅢ质粒后的细胞,在荧光显微镜下检测到绿色荧光信号,并且通过Westernblot进一步验证了ST3GalⅢ在细胞中的表达。
- 崔连成周飞黄志强童双黄冬妮袁远华宁章勇
- 关键词：三黄鸡真核表达
- 一株基因Ⅸ型鸭源新城疫病毒分离株F基因序列测定与分析
- 从广东地区疑似患有新城疫的病死雏番鸭群中分离到1株新城疫病毒，命名为GD1002株。毒力测定结果表明，MDT、ICPI分别为56.0 h、1.64，符合强毒株的毒力判断标准。利用RT-PCR扩增了该分离株F基因的主要功能...
- 袁远华王俊峰蔡丽丽黄兴国梁小英曹伟胜黄淑坚
- 关键词：鸭源新城疫病毒F基因基因序列
- 副猪嗜血杆菌分离鉴定及药敏试验被引量：2
- 2013年
- 本研究从采自佛山市某猪场送检的病死猪心脏、肝脏和肺脏等病料,分离出一株疑似副猪嗜血杆菌(HPS)的细菌。经形态学观察、培养特性鉴定、生化试验、PCR检测,显示该细菌为HPS。药敏试验显示该分离株对四环素、氧氟沙星等高敏;对苯唑西林和磺胺甲噁唑耐药性,动物致病性试验表明HPS分离株具有较强致病性。
- 黄美玲袁远华黄淑坚
- 关键词：副猪嗜血杆菌PCR药敏试验
- NDRV和MDRV双重RT-PCR检测方法的建立被引量：7
- 2014年
- 为建立一种能够同时快速检测新型鸭呼肠孤病毒(NDRV)和番鸭呼肠孤病毒(MDRV)的方法,根据GenBank上已发表的2种病原S3基因保守序列,设计合成2对特异性引物。经条件优化后,建立了检测NDRV、MDRV的双重RT-PCR方法,扩增2种病毒的片段,大小分别为298 bp和189 bp。试验表明,该方法具有良好的特异性和敏感性。采用该方法对在广东省不同地区采集的42份鸭病料样品进行检测的结果与单一RT-PCR结果一致,均检出19份感染NDRV的病料和8份感染MDRV的病料,表明该方法可用于临床样品检测。
- 卿柯香袁远华周飞郭霄峰黄淑坚
- 关键词：新型鸭呼肠孤病毒番鸭呼肠孤病毒
