周飞
- 作品数：4 被引量：8H指数：1
- 供职机构：华南农业大学兽医学院更多>>
- 发文基金：广东省科技计划工业攻关项目广东省自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学农业科学更多>>
- 三黄鸡ST3Gal6基因的半定量RT-PCR及生物信息学分析被引量：1
- 2012年
- 本研究旨在对三黄鸡ST3Gal6基因进行组织表达谱和生物信息学分析。参考三黄鸡ST3Gal6基因序列设计引物,采用PCR技术克隆三黄鸡ST3Gal6基因序列,并利用半定量RT-PCR进行组织表达谱分析;同时对其进行生物信息学分析。结果表明,克隆的三黄鸡ST3Gal6基因全长1169bp,含有1059bp的完整CDS编码区,编码352个氨基酸。其CDS编码区的核苷酸序列与人、黑猩猩、牛、大鼠、蟾ST3Gal6基因对应序列的同源性分别为62%、62%、61.9%、59%、54.4%。组织表达谱分析表明,ST3Gal6基因在各组织均不同程度地表达,其中在大脑表达量很高,肺脏中最低。生物信息学预测ST3Gal6蛋白结构发现,三黄鸡的ST3Gal6蛋白存在2个跨膜螺旋结构域,同时预测ST3Gal6存在22个磷酸化位点和1个特异性蛋白激酶磷酸化位点。
- 周飞崔连成安玉甫宁章勇
- 关键词：半定量生物信息学
- 三黄鸡ST6基因的半定量RT-PCR分析
- 2013年
- 本研究旨在对三黄鸡ST6(ST6GalⅠ和ST6GalⅡ)基因进行组织表达谱分析。参考鸡ST6GalⅠ和ST6GalⅡ基因序列设计引物,利用半定量RT-PCR进行了组织表达谱分析。结果表明,ST6GalⅠ和ST6GalⅡ基因在各组织均有不同程度的表达,其中ST6GalⅠ在心脏中表达最高,脑中最低;ST6GalⅡ在胸腺中表达最高,在肝脏中表达最低。ST6GalⅠ在各组织中的表达比其相应组织中ST6GalⅡ的表达要低。
- 周飞于梦刘荣昌袁远华宁章勇
- 关键词：半定量
- 三黄鸡α-2,3唾液酸转移酶Ⅲ基因的克隆及其在293T细胞中的表达
- 2013年
- 唾液酸转移酶催化机体唾液酸的形成,与流感病毒感染的种属特异性具有密切的关系。以三黄鸡法氏囊组织总RNA为模板,运用RT-PCR方法扩增了三黄鸡α-2,3唾液酸转移酶Ⅲ(ST3GalⅢ)基因。将其克隆到带有加强型绿色荧光蛋白(EGFP)报告基因的pIRES2真核表达载体中,对重组质粒pIRES2-EGFP-ST3GalⅢ进行酶切和测序鉴定后,采用阳离子脂质体转染法将重组质粒转染到293T细胞,荧光显微镜和West-ern blot检测观察其表达情况。结果表明,转染pIRES2-EGFP-ST3GalⅢ质粒后的细胞,在荧光显微镜下检测到绿色荧光信号,并且通过Westernblot进一步验证了ST3GalⅢ在细胞中的表达。
- 崔连成周飞黄志强童双黄冬妮袁远华宁章勇
- 关键词：三黄鸡真核表达
- NDRV和MDRV双重RT-PCR检测方法的建立被引量：7
- 2014年
- 为建立一种能够同时快速检测新型鸭呼肠孤病毒(NDRV)和番鸭呼肠孤病毒(MDRV)的方法,根据GenBank上已发表的2种病原S3基因保守序列,设计合成2对特异性引物。经条件优化后,建立了检测NDRV、MDRV的双重RT-PCR方法,扩增2种病毒的片段,大小分别为298 bp和189 bp。试验表明,该方法具有良好的特异性和敏感性。采用该方法对在广东省不同地区采集的42份鸭病料样品进行检测的结果与单一RT-PCR结果一致,均检出19份感染NDRV的病料和8份感染MDRV的病料,表明该方法可用于临床样品检测。
- 卿柯香袁远华周飞郭霄峰黄淑坚
- 关键词：新型鸭呼肠孤病毒番鸭呼肠孤病毒
