贺庆华
- 作品数：34 被引量：110H指数：6
- 供职机构：西南民族大学生命科学与技术学院更多>>
- 发文基金：四川省青年科技基金国家自然科学基金四川省应用基础研究计划项目更多>>
- 相关领域：生物学农业科学更多>>
- PGC-1α对C2C12成肌细胞增殖的影响被引量：1
- 2014年
- PGC-1α(Peroxisome Proliferators Activated Receptor gamma coactivator 1 alpha)是一种核受体转录辅助激活因子,广泛参与机体的生物氧化和能量代谢活动.本实验以小鼠C2C12成肌细胞为材料,通过转染pc DNA3.1-flag-PGC-1α真核表达载体,并且与转染空载体的实验对照组比较,利用荧光定量PCR检测转染效果,利用MTT比色法检测PGC-1α对成肌细胞增殖的影响;结果显示,PGC-1α在C2C12成肌细胞中被成功超表达,在转染后的2-5 d,转染真核表达载体组与转染空载体组相比,显著抑制细胞增殖(P<0.05),但在第6 d差异不显著.
- 林亚秋谈永萍赵燕英贺庆华罗敏邱翔钟红梅
- 关键词：PGC-1Α增殖
- 睾丸特异乳酸脱氢酶-C基因选择性剪接的研究
- 乳酸脱氢酶-C(LDH-C)是睾丸组织和精子特异的乳酸脱氢酶同工酶,在精子发育和获能等过程中发挥重要作用。本研究采用 RT-PCR 方法从牦牛、狗和大鼠睾丸组织中克隆睾丸特异 LDH-C 基因的 cDNA 序列,结果在3...
- 洪键贺庆华郑玉才邝良德杜晞金素钰
- 文献传递
- 泸宁鸡MyoD基因的克隆及生物信息学分析
- 2016年
- 为了研究MyoD基因在鸡生长发育与肉质形成中的作用,以泸宁鸡为研究对象,采用RT-PCR技术克隆MyoD基因序列,并利用生物信息学的方法,对其氨基酸同源性、理化性质等进行分析和预测。结果表明：泸宁鸡MyoD基因序列长度为988 bp,其编码的蛋白含299个氨基酸残基,具有碱性螺旋-环-螺旋结构（b HLH）;根据MyoD基因比对,构建的进化树显示泸宁鸡与人等哺乳动物的同源性为63%-67%,与原鸡、绿头鸭、游隼的同源性为94%-99%。
- 龚静林森徐亚欧贺庆华林亚秋
- 关键词：基因克隆生物信息学
- 肿瘤坏死因子-α在脂肪组织中的作用被引量：3
- 2008年
- 作为一种由脂肪细胞产生和分泌的多功能细胞因子,肿瘤胚死因子-α(TNF-α)除了在免疫系统中发挥作用外,其在脂肪组织中也具有重要的调控作用,如促进脂肪分解、抑制脂肪合成、抑制脂肪细胞分化、诱导脂肪细胞凋亡等。综合起来看,TNF-α可抑制动物的脂肪沉积。
- 林亚秋李瑞文贺庆华
- 关键词：TNF-Α脂肪组织凋亡脂类代谢
- 藏绵羊肌红蛋白(Mb)基因克隆及肌肉Mb含量的测定被引量：1
- 2008年
- 为探索藏绵羊适应青藏高原缺氧环境的分子机制,克隆了藏绵羊的肌红蛋白(Mb)基因,纯化了心肌Mb,同时比较了心肌和骨骼肌的Mb含量。用RT-PCR克隆了心肌Mb的cDNA,长度为640 bp,编码153个氨基酸。试验采用盐析、CM-Sephadex离子交换层析、Sephadex G-50凝胶层析等方法分离纯化了藏绵羊Mb,SDS-PAGE分析其分子量约为17kD。组织含量测定表明,藏绵羊心肌中Mb含量极显著高于骨骼肌。
- 郑玉才王永邓会平金素钰朴影苏永杰贺庆华
- 关键词：藏绵羊肌红蛋白纯化
- 牦牛乳酸脱氢酶-1两种遗传变异体的纯化及酶学特性比较被引量：6
- 2009年
- 【目的】从乳酸脱氢酶(LDH)水平上探索牦牛(Bos grunniens)低氧适应性分子机制。【方法】利用聚丙烯酰胺凝胶电泳分析牦牛组织中LDH同工酶谱;用比色法测定牦牛、黄牛和水牛心脏、肝脏和肌肉组织中LDH总活力;采用染料亲和层析和DEAE-Sephadex离子交换层析从牦牛心肌组织中纯化LDH1(由4个H亚基组成)的2种遗传变异体,进行酶学性质的比较。【结果】电泳方法检测发现牦牛LDH1存在2种遗传变异体,根据电泳迁移率分别命名为快型和慢型(LDH1-F和LDH1-S)。获得纯化的牦牛LDH1-F和LDH1-S,比活力分别为21.4U·mg-1蛋白和17.8U·mg-1蛋白,在SDS-PAGE和PAGE上均显示1条区带。2种变异体以NADH为底物的米氏常数(Km)值差异不大,均显著高于普通牛的LDH1;以丙酮酸钠为底物的Km值LDH1-F小于LDH1-S。试验进一步比较了携带不同LDH1变异体的牦牛心脏、肝脏和肌肉组织中LDH总活力和各种同工酶谱,未见显著差异,而牦牛心脏、肝脏和肌肉组织中LDH总活力显著或极显著低于黄牛和水牛。【结论】牦牛LDH12种遗传变异体的Km值存在差异,且Km(NADH)高于普通牛;牦牛心脏、肝脏和肌肉组织中LDH总活力低于普通牛。
- 郑玉才赵兴波周静朴影金素钰贺庆华洪键李宁吴常信
- 关键词：牦牛乳酸脱氢酶
- 川西高原黑唇鼠兔乳酸脱氢酶C基因的原核表达
- 2011年
- [目的]研究黑唇鼠兔乳酸脱氢酶C(LDH-C)基因的原核表达及重组蛋白的纯化。[方法]采用RT-PCR方法克隆鼠兔LDH-C基因,并将其连接到表达载体pET-32a上,构建鼠兔LDH-C基因的大肠杆菌BL21(DE3)工程菌,通过IPTG诱导表达,表达产物用SDS-PAGE进行分析,使用亲和层析方法进行蛋白纯化。[结果]RT-PCR扩增出1条约1.0 kbp的条带,与预期结果相符;重组表达载体经PCR和双酶切鉴定,产生1个约1.0 kbp的目的片段,表明表达载体构建成功;表达产物经SDS-PAGE分析,得到了分子量略大于45.0kDa以包涵体形式存在的融合蛋白;通过镍亲和层析柱进行纯化,得到了较纯的融合蛋白。[结论]黑唇鼠兔LDH-C基因被成功克隆和表达。
- 张庆莲刘浩浩贺庆华刘东奇李蒙梁正旭
- 关键词：原核表达蛋白纯化
- 盐生杜氏藻3-磷酸甘油脱氢酶同工酶基因的克隆、功能及产生机制研究
- 盐生杜氏藻(Dunaliella salina，简称盐藻)是一种迄今为止发现的世界上最耐盐的真核光合生物，可以在0.3％到饱和盐浓度的范围内生长。盐藻是单细胞绿藻，没有细胞壁，生长快，是一种很好的研究盐胁迫和渗透胁迫的模...
- 贺庆华
- 关键词：盐生杜氏藻盐胁迫分子机制
- 一种低危害的基因组DNA和总RNA的提取方法被引量：1
- 2017年
- 从生物组织里提取基因组DNA和总RNA是多数专业研究人员都需要操作的实验内容,但该实验的常规操作流程中却存在致病性微生物的感染风险和有毒有害试剂的危害.本文从选择安全的实验材料和改进低危的实验方法两个方面入手,提出了以盐藻为实验材料的基因组DNA和总RNA的新的实验提取方法,该方法有效避免了致病性微生物的感染风险,也避免了有毒、挥发性试剂苯酚、氯仿和Trizol的使用,对核酸提取实验操作的安全性提供了一定的保障,可供研究者选取实验方案时参考.
- 贺庆华邱翔
- 关键词：DNARNA低毒盐藻
- 黄牛睾丸特异乳酸脱氢酶-C基因选择性剪接体的克隆与序列分析被引量：1
- 2009年
- 采用RT-PCR方法从黄牛睾丸组织中克隆睾丸特异乳酸脱氢酶-C(LDH-C)基因的cDNA序列,结果发现2种Ldhc剪接体,根据Ldhc基因在进化上的保守性,参照普通牛Ldhc基因结构分析了黄牛Ldhc基因的选择性剪接体的结构,结果显示,剪接体存在外显子缺失:其中剪接体1缺失第7个外显子,剪接体2缺失第4和第7两个外显子。因为LDH-C4酶的NAD+结合结构域由Ldhc的外显子2-4编码,酶的活性中心由外显子4编码。所以剪接体1包含完整酶的NAD+结合结构域和酶的活性中心,剪接体2失去了大部分NAD+结合结构域和酶的活性中心。对黄牛睾丸组织和精子LDH同工酶的电泳分析未检测到潜在的Ldhc剪接体的表达,推测睾丸组织Ldhc选择性剪接的功能是调控该基因在睾丸中表达的方式之一。
- 洪键郑玉才贺庆华
- 关键词：黄牛睾丸
