郑晓星
- 作品数：10 被引量：24H指数：3
- 供职机构：东北农业大学动物医学学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点实验室开放基金黑龙江省自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 产气荚膜梭菌α毒素单克隆抗体阻断ELISA检测方法
- 本发明公开了一种产气荚膜梭菌α毒素单克隆抗体阻断ELISA检测方法，用于α毒素的早期检测，为产气荚膜梭菌的早期诊断、传播预防、后续研究提供有效检测工具。所述方法包括以下两个步骤：一、单克隆抗体阻断ELISA检测方法的建立...
- 李广兴乔艺然张艳郑晓星任玉东
- A型产气荚膜梭菌重组α毒素对小鼠的致病性研究被引量：1
- 2015年
- 为了研究A型产气荚膜梭菌α毒素(PLC)的致病性,采用PCR扩增编码产气荚膜梭菌α毒素去除信号肽的plc基因片段,构建重组质粒pGEX-plc,经IPTG诱导表达获得重组蛋白PLC。对纯化鉴定后的PLC蛋白进行细胞毒性试验,结果显示,感染后第4小时Hela细胞开始出现病变,并随时间延长而逐渐严重,说明α毒素对Hela细胞有毒性作用。进一步建立小鼠病理模型,重组PLC蛋白接种组与阳性细菌感染组的病理变化显示,小鼠发病迅速,腹部膨大,肠道臌气明显;组织学观察结果显示,被感染小鼠内脏器官出现不同程度的病理变化,以小肠各段尤为明显,表现为肠黏膜损伤、绒毛脱落等。上述结果为A型产气荚膜梭菌致病机制的研究奠定了基础。
- 乔艺然李兰兰郑晓星王莹莹聂思静任玉东李广兴黄小丹杨贵君
- 关键词：产气荚膜梭菌气性坏疽Α毒素细胞毒性试验
- 产气荚膜梭菌α毒素单克隆抗体阻断ELISA检测方法
- 本发明公开了一种产气荚膜梭菌α毒素单克隆抗体阻断ELISA检测方法，用于α毒素的早期检测，为产气荚膜梭菌的早期诊断、传播预防、后续研究提供有效检测工具。所述方法包括以下两个步骤：一、单克隆抗体阻断ELISA检测方法的建立...
- 李广兴乔艺然张艳郑晓星任玉东
- 文献传递
- 产气荚膜梭菌NetB毒素基因重组植物乳酸杆菌的构建
- 2017年
- 选择产气荚膜梭菌坏死性肠炎毒素B(NetB)为抗原,构建产气荚膜梭菌NetB毒素基因重组植物乳酸杆菌,利用植物乳酸杆菌穿梭载体pSIP409构建重组质粒pSIP409-NetB,经双酶切鉴定和序列测定正确后转化大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞并进行SppIP诱导表达。Western blot证明重组蛋白表达成功,并且主要以包涵体形式存在,NetB重组蛋白相对分子质量为36 ku。重组质粒pSIP409-NetB电转化植物乳酸杆菌NC8细胞,PCR和双酶切鉴定正确后进行SppIP诱导表达。Western Blot和间接免疫荧光鉴定表明构建的重组植物乳酸杆菌具有诱导分泌NetB蛋白的能力,可作为黏膜免疫的候选抗原。
- 张艳周庆民冯万宇徐馨黄健王新李兰兰郑晓星李广兴
- 关键词：产气荚膜梭菌植物乳酸杆菌
- 产气荚膜梭菌plc基因的原核表达及其多克隆抗体的制备被引量：8
- 2012年
- 采用PCR方法扩增编码产气荚膜梭菌α毒素去除信号肽的plc基因片段,利用原核表达载体pGEX-6P-1构建重组质粒pGEX-plc,经双酶切和测序鉴定正确后转化E.coli BL21(DE3),进行IPTG诱导表达,表达产物经切胶纯化后作为免疫原制备多克隆抗体,应用间接ELISA和Western-blot方法对所得抗体进行检测。结果显示,经1.0mmol/L IPTG诱导4～5h后重组蛋白表达量最高,并且主要以包涵体的形式存在,分子质量为66ku。用间接ELISA方法检测的多抗血清效价达到1∶65 536。Western-blot结果证实,重组蛋白与制备的多克隆抗体发生特异性结合,具有良好的反应原性,而且多抗血清能够检测产气荚膜梭菌分泌的天然α毒素蛋白。上述结果表明,此多克隆抗体能够应用于临床诊断。
- 郑晓星解真真任晓峰王衡王勇杨静红任玉东马德星李广兴
- 关键词：产气荚膜梭菌多克隆抗体蛋白质印迹
- 产气荚膜梭菌plc和NetB基因的表达及单克隆抗体制备与鉴定
- 产气荚膜梭菌/(Clostridium perfringens, C. perfringens/)是一种重要的人兽共患病病原体,广泛分布于自然界,导致多种动物发生坏死性肠炎、肠毒血症,以及人类的气性坏疽和食物中毒。产气荚...
- 郑晓星
- 关键词：产气荚膜梭菌单克隆抗体
- 文献传递
- 二氟沙星肺靶向微球制剂的制备被引量：3
- 2009年
- 以可生物降解的明胶为载体,液体石蜡为油相,Span-80为乳化剂,选择正交设计优化空白明胶微球生产工艺,并考察其理化性质,采用乳化交联法制备二氟沙星肺靶向明胶微球。采用紫外可见分光光度计法,测定微球中二氟沙星的含量。结果表明,优选所制的二氟沙星肺靶向明胶微球形态圆整,表面光滑,平均粒径为8.33μm,粒径分布在5.0～25.0μm的微球达到95.71%,二氟沙星明胶微球包封率为62.43%,载药量为13.71%。采用动态分析法研究体外释药特性,二氟沙星明胶微球在12h处药物释放量达到65%,24h内药物释放量达到71%。制备工艺稳定可行,所得二氟沙星明胶微球具有良好的缓释效果。
- 崔琳李艳华郑晓星曹楠徐志增苑青艳
- 关键词：二氟沙星肺靶向明胶微球
- 产气荚膜梭菌NetB毒素基因重组植物乳酸杆菌疫苗免疫保护性研究被引量：1
- 2017年
- 为了评估表达产气荚膜梭菌NetB毒素的重组植物乳酸杆菌口服活菌疫苗对鸡的免疫保护效果,分别进行了重组活菌疫苗的免疫和产气荚膜梭菌攻菌试验。免疫组雏鸡分为3组,于7~28日龄分别连续免疫p SIP409空载体植物乳酸杆菌、p SIP409-NetB重组植物乳酸杆菌和灭菌PBS;攻菌组雏鸡免疫方法同上,于43~47日龄连续口服产气荚膜梭菌(设置PBS免疫对照组和不攻菌只口服等量PBS对照组)。通过采用ELISA检测抗体动态变化,观察雏鸡体重变化和免疫器官发育情况以评价疫苗的免疫效果。结果显示,NetB组特异性抗体Ig G和s Ig A水平随日龄增长呈现上升趋势,且与未免疫对照组存在显著或极显著差异(P<0.05或P<0.01);NetB攻菌组各项指标在短暂下降后很快升高,且明显高于未免疫对照组雏鸡(P<0.01)。NetB组周增重14日龄后均高于其他组,且35日龄开始与其他组差异极显著(P<0.01);攻菌组体重变化总趋势是NetB攻菌组最高,其次是空载体攻菌组(P<0.05),PBS攻菌组最低(P<0.01)。免疫组在免疫结束时胸腺和脾脏指数呈明显上升趋势,NetB组的这两项指数分别在56日龄和49日龄达到最高,法氏囊指数在28日龄下降,随后稳步上升;虽然攻菌后各免疫器官指数上升趋势变缓,但NetB攻菌组的各项指数在各时间点均与其他组差异极显著(P<0.01)。表明重组口服活菌疫苗对产气荚膜梭菌攻击雏鸡起到很好的保护作用,所构建的重组疫苗安全有效,结果为重组植物乳酸杆菌表达系统应用于口服疫苗提供了理论依据。
- 张艳周庆民冯万宇徐馨黄健王靓靓李兰兰王莹莹郑晓星李广兴
- 关键词：产气荚膜梭菌植物乳酸杆菌免疫保护
- 鸡产气荚膜梭菌的分离鉴定及药敏试验被引量：5
- 2015年
- 对哈尔滨市3个鸡场送检疑似鸡坏死性肠炎病例进行了病理剖检和细菌分离,从菌落、菌体的形态、生化特性、PCR鉴定、病理组织学检查和细菌致病性等方面对病原菌进行了鉴定。结果表明,病原菌为厌氧的革兰阳性短杆菌,在含卵黄的TSC培养基上形成周围带白浊环的黑色圆菌落,能发酵葡萄糖、麦芽糖、蔗糖、乳糖和紫牛乳;PCR鉴定及致病性试验表明分离的细菌为产气荚膜梭菌,且有致病性。药敏试验显示,分离菌株对青霉素等5种药物高度敏感;对新霉素等4种药物耐药。
- 张艳李兰兰黄艺华王莹莹解真真张自强郑晓星黄小丹杨贵君张瑞丽刘思国李广兴
- 关键词：鸡坏死性肠炎产气荚膜梭菌药敏试验
- 产气荚膜梭菌EF-Tu基因的原核表达及其多克隆抗体的制备被引量：2
- 2013年
- 通过PCR方法扩增产气荚膜梭菌ATCC13124株EF-Tu基因,利用原核表达载体pGEX-6P-1构建重组质粒pGEX-EF,经双酶切和测序鉴定正确后转化E.coli Rosseta,进行IPTG诱导表达,表达产物纯化后免疫大白兔制备多克隆抗体,应用间接ELISA、Western-blot和间接免疫荧光方法对所得抗体进行检测。结果显示,经1.0mmol/L IPTG诱导5h后蛋白表达量最高,并且主要以包涵体的形式存在,分子质量为69ku。间接ELISA方法检测的多抗血清效价为1∶262 144。Western-blot结果证实,重组蛋白与产气荚膜梭菌ATCC13124株制备的多克隆抗体发生特异性结合,具有良好的免疫原性。Western-blot和间接免疫荧光结果表明,多抗血清能分别与pGEX-EF重组蛋白、ATCC13124菌体裂解液、pcDNA3.1-EF-Tu瞬时转染后的BHK-21细胞及ATCC13124感染的小鼠肠组织中菌体发生特异性结合反应。上述结果表明,此多克隆抗体能够应用于临床诊断。
- 解真真郑晓星李广兴张艳李兰兰
- 关键词：产气荚膜梭菌多克隆抗体WESTERN-BLOT
