解真真
- 作品数：4 被引量：15H指数：2
- 供职机构：东北农业大学动物医学学院更多>>
- 发文基金：国家重点实验室开放基金国家自然科学基金黑龙江省博士后基金更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 产气荚膜梭菌plc基因的原核表达及其多克隆抗体的制备被引量：8
- 2012年
- 采用PCR方法扩增编码产气荚膜梭菌α毒素去除信号肽的plc基因片段,利用原核表达载体pGEX-6P-1构建重组质粒pGEX-plc,经双酶切和测序鉴定正确后转化E.coli BL21(DE3),进行IPTG诱导表达,表达产物经切胶纯化后作为免疫原制备多克隆抗体,应用间接ELISA和Western-blot方法对所得抗体进行检测。结果显示,经1.0mmol/L IPTG诱导4～5h后重组蛋白表达量最高,并且主要以包涵体的形式存在,分子质量为66ku。用间接ELISA方法检测的多抗血清效价达到1∶65 536。Western-blot结果证实,重组蛋白与制备的多克隆抗体发生特异性结合,具有良好的反应原性,而且多抗血清能够检测产气荚膜梭菌分泌的天然α毒素蛋白。上述结果表明,此多克隆抗体能够应用于临床诊断。
- 郑晓星解真真任晓峰王衡王勇杨静红任玉东马德星李广兴
- 关键词：产气荚膜梭菌多克隆抗体蛋白质印迹
- 产气荚膜梭菌EF-Tu和PFO基因真核表达质粒构建及免疫评价
- 鸡坏死性肠炎是由A型和部分C型产气荚膜梭菌引起的重要禽类肠道疾病，对全球家禽生产造成重大的经济影响。该病主要通过在饲料或饮水中添加抗菌药物控制，自欧盟立法禁止在饲料中添加抗菌促生长剂后此病频频发生，疫苗免疫作为替代抗菌药...
- 解真真
- 关键词：鸡坏死性肠炎产气荚膜梭菌
- 文献传递
- 鸡产气荚膜梭菌的分离鉴定及药敏试验被引量：5
- 2015年
- 对哈尔滨市3个鸡场送检疑似鸡坏死性肠炎病例进行了病理剖检和细菌分离,从菌落、菌体的形态、生化特性、PCR鉴定、病理组织学检查和细菌致病性等方面对病原菌进行了鉴定。结果表明,病原菌为厌氧的革兰阳性短杆菌,在含卵黄的TSC培养基上形成周围带白浊环的黑色圆菌落,能发酵葡萄糖、麦芽糖、蔗糖、乳糖和紫牛乳;PCR鉴定及致病性试验表明分离的细菌为产气荚膜梭菌,且有致病性。药敏试验显示,分离菌株对青霉素等5种药物高度敏感;对新霉素等4种药物耐药。
- 张艳李兰兰黄艺华王莹莹解真真张自强郑晓星黄小丹杨贵君张瑞丽刘思国李广兴
- 关键词：鸡坏死性肠炎产气荚膜梭菌药敏试验
- 产气荚膜梭菌EF-Tu基因的原核表达及其多克隆抗体的制备被引量：2
- 2013年
- 通过PCR方法扩增产气荚膜梭菌ATCC13124株EF-Tu基因,利用原核表达载体pGEX-6P-1构建重组质粒pGEX-EF,经双酶切和测序鉴定正确后转化E.coli Rosseta,进行IPTG诱导表达,表达产物纯化后免疫大白兔制备多克隆抗体,应用间接ELISA、Western-blot和间接免疫荧光方法对所得抗体进行检测。结果显示,经1.0mmol/L IPTG诱导5h后蛋白表达量最高,并且主要以包涵体的形式存在,分子质量为69ku。间接ELISA方法检测的多抗血清效价为1∶262 144。Western-blot结果证实,重组蛋白与产气荚膜梭菌ATCC13124株制备的多克隆抗体发生特异性结合,具有良好的免疫原性。Western-blot和间接免疫荧光结果表明,多抗血清能分别与pGEX-EF重组蛋白、ATCC13124菌体裂解液、pcDNA3.1-EF-Tu瞬时转染后的BHK-21细胞及ATCC13124感染的小鼠肠组织中菌体发生特异性结合反应。上述结果表明,此多克隆抗体能够应用于临床诊断。
- 解真真郑晓星李广兴张艳李兰兰
- 关键词：产气荚膜梭菌多克隆抗体WESTERN-BLOT
