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郑青

作品数：109 被引量：489H指数：14
供职机构：暨南大学药学院更多>>
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相关领域：医药卫生生物学化学工程农业科学更多>>

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  • 10篇2004
  • 9篇2003
  • 13篇2002
共 109 条 记 录，以下是 1-10
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排序方式：
人内皮细胞抑制生长素在毕赤酵母中的高效表达被引量：3
2004年
根据人胶原蛋白ⅩⅧNC结构域C末端编码内皮细胞抑制生长素 (Endostatin)的成熟多肽序列 ,人工合成了由毕赤酵母 (Pichiapastoris)中偏爱密码子组成的内皮细胞抑制生长素基因序列。该基因以N端融合的方式正确插入毕赤酵母诱导型表达载体pPICZαA中。通过电激将线性化的重组质粒转化到毕赤酵母SMD1 1 68细胞中 ,筛选获得表达具有生物活性的内皮细胞生长抑制素的高产菌株。在摇瓶发酵水平上 ,产量达到 80mg L。而利用生物反应器进行高密度发酵 ,Endostatin的产量可达 1 2 5mg L。
苏志坚吴晓萍郑青冯雅于平野曲红艳刘太胜李校堃
关键词：毕赤酵母高密度发酵癌症
人酸性成纤维细胞生长因子的高效表达被引量：11
2001年
构建能高效表达人酸性成纤维细胞生长因子 (haFGF)的基因工程菌 ,优化产物分离纯化条件 ,并对纯化产物进行理化性质鉴定 .采用PCR方法扩增haFGFcDNA ,将该cDNA片段插入表达载体 pET3c的表达框架中 ,筛选得到了重组质粒pET3c_haFGF ,转化大肠杆菌BL2 1(DE3) ,构建了表达菌株BL2 1(DE3) / pET3c_haFGF .IPTG诱导表达 ,通过离子交换、肝素亲和两步层析的方法分离纯化产物 .用MTT法测定产物的活性 .haFGF的表达量约为 2 0 % .经过两步层析纯化 ,获得了电泳纯的haFGF样品 .纯化haFGF样品的比活性为ED50 小于 4 .0ng/mL .BL2 1(DE3) / pET3c表达系统能高效表达haFGF ,经过纯化得到了理化性质及生物活性与天然haFGF对照品一致的重组人酸性成纤维细胞生长因子 .
李校堃吴晓萍郑青黄亚东许华姚成灿赵文
关键词：人酸性成纤维细胞生长因子分离纯化基因工程氨基酸残基理化性质生物活性
haFGF和nm-haFGF过表达对乳腺肿瘤细胞增殖及c-fos、c-jun mRNA表达的影响被引量：5
2006年
目的研究非促分裂人酸性成纤维细胞生长因子(non-mitogenetic human acidic fibroblast growth factor,nm-haF-GF)和人酸性成纤维细胞生长因子(haFGF)对恶性肿瘤细胞的增殖作用及其与对c-fos、c-jun mRNA表达的影响,探讨nm-haFGF在治疗神经系统疾病和心血管疾病等方面的临床应用安全性。方法构建细胞内真核表达载体pIRES/haF-GF、pIRES/nm-haFGF,分泌型真核表达载体pSectag/haFGF、pSectag/nm-haFGF。转染乳腺癌细胞MCF-7,Western blot鉴定细胞内及上清中aFGF的表达。用流式细胞技术分析细胞周期(G0/G1,S期,G2/M)。用半定量RT-PCR检测立早基因c-fos、c-jun mRNA的表达。结果nm-haFGF和haFGF在MCF-7细胞中能够过量表达。转染nm-haFGF组的S期和G2/M细胞比率与对照组差异无显著性,而转染haFGF组差异有显著性。转染haFGF后,c-fos、c-jun mRNA的表达明显升高,转染nm-aFGF后却与未转染组无差别。结论与haFGF相比,nm-haFGF消除了促肿瘤细胞增殖活性,基本不会诱导细胞c-fos、c-jun原癌基因的转录与表达。
郑青彭菲苏志坚吴晓萍许华李校堃
关键词：增殖活性C-FOSC-JUN
外用重组成纤维细胞生长因子(γFGF)临床等方面的开发和应用被引量：1
2002年
医药产业在发达国家成为支柱产业之一,占国内GNP的20～30%.现今发达国家有近4000家企业和科研机构从事生物医药产品的研究开发,生物医药产业创造的利润远高于其他传统产业创造的利润,并带动其他相关产业的发展,提供就业机会.
李校坤杨晓明许华黄亚东郑青洪岸林剑付小兵郭振荣郭立君
关键词：医药产品
流感病毒两种反向遗传学操作系统的初步构建被引量：2
2015年
目的构建依赖辅助病毒和宿主细胞内合成病毒核糖核蛋白复合体(vRNPs)的反向遗传学系统,利用上述两系统表达绿色荧光蛋白(EGFP)。方法将EGFP cDNA精确插入人RNA聚合酶I启动子和小鼠终止子序列之间,构建RNA POLI系统,此系统被克隆入pBluescript II sk(+),获得重组质粒pBluescript II sk(+)-tI-EGFP-PIh;基于辅助病毒H1N1,pBluescript II sk(+)-tI-EGFP-PIh转染MDCK细胞,观察荧光。来源于甲型流感病毒H1N1分离株A/Puerto Rico/8/34的PB2、PB1、PA、NP 4个基因片段cDNA克隆入载体pcDNA3.1(+),获得pcDNA3.1-PB2、pcDNA3.1-PB1、pcDNA3.1-PA、pcDNA3.1-NP,将pBluescript II sk(+)-tI-EGFP-PIh与4个表达质粒共转染293T细胞,观察荧光。结果所构建的载体均经菌液PCR及测序验证正确;两种转染体系均可观察到绿色荧光。结论所构建的依赖辅助病毒和宿主细胞内合成vRNPs的反向遗传学系统均可使绿色荧光蛋白表达。
连孟洋王昕彭博武伟华刘慧董方圆丁小满房师松郑青
关键词：反向遗传学绿色荧光蛋白转染
甲型流感病毒跨物种传播的分子机制研究进展被引量：1
2015年
甲型流感病毒容易引起人畜共患疾病,严重危害公共卫生事业与畜牧业的发展。通常情况下流感病毒具有宿主限制性,然而历史上发生由流感病毒的跨物种传播屡见不鲜,一旦流感病毒打破宿主限制在人类中传播,对人产生的危害不可估量。本文主要对影响流感病毒跨物种传播的因素进行总结。
董方圆郑青房师松
关键词：甲型流感病毒环境因素
一种缺失核定位信号区的hbFGF的表达及纯化(英文)
2005年
目的:为了研究缺失核定位信号区的人碱性成纤维细胞生长因子(hbFGF)独特的转运机制,在大肠杆菌BL21(DE3)中高效表达和纯化了缺失核定位信号区的hbFGF。方法:将PCR扩增得到的hbFGFcDNA片断克隆到表达载体pET3c中,重组质粒转化大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导表达,通过离子交换和肝素亲和层析从菌体上清中纯化目标蛋白,MTT法检测促分裂活性。结果:hbFGF的表达量约为全菌体蛋白的20%,纯化的缺失核定位信号区的hbFGF的促分裂活性与缺失核定位信号区的hbFGF标准品相当。结论:BL21(DE3)/pET3c表达系统能高效表达缺失核定位信号区的hbFGF,纯化得到的hbFGF可用于进一步的研究。
吴晓萍苏志坚郑青吴思娴冯雅曲红艳许华李校堃
关键词：人碱性成纤维细胞生长因子核定位信号纯化
Blackboard平台在生物技术药物学中的应用被引量：1
2019年
随着我国现代化教育水平的不断提高,越来越多的高校利用在线课程来辅助教学。生物技术药物学是药学学科的一门专业课程,具有知识点难度大、内容抽象等特点。将Blackboard平台应用于生物技术药物学教学课程中,能够提高学生学习的积极性,增强师生之间的交流,使得教学空间得到显著拓宽,有效提升教学水平。
王峰雷思佳沈良华张斌莫雪梅郑青张志民孙晗笑周光雄
关键词：BLACKBOARD平台在线课程
非促有丝分裂型人酸性成纤维细胞生长因子对细胞增殖活性的影响被引量：3
2005年
目的研究观察人酸性成纤维细胞生长因子(haFGF)和N端缺失27个氨基酸残基的非促分裂人酸性成纤维细胞生长因子(non-mitogenetichumanacidicfibroblastgrowthfactor,nm-haFGF)对鼻咽癌细胞及血管内皮细胞增殖活性的影响。方法用不同浓度(0.01～100ng/ml)的人酸性成纤维细胞生长因子(haFGF)及nm-haFGF分别刺激鼻咽癌细胞及血管内皮细胞,作用48h后采用MTT法测定haFGF和nm-haFGF对两种细胞的增殖活性。结果在各浓度(>0.01ng/ml)下,nm-haFGF组对鼻咽癌细胞(除浓度为50ng/ml外)和血管内皮细胞的促增殖作用都显著低于haFGF组。结论nm-haFGF对鼻咽癌细胞及血管内皮细胞的促分裂活性下降。
郭钦丽汪小凤孟娟郑青
关键词：人酸性成纤维细胞生长因子有丝分裂鼻咽癌细胞促增殖作用MTT法
深圳市H5N6、H7N9流感病毒HA-UTR基因分子特征分析
2017年
目的 了解深圳市H5N6、H7 N9流感病毒HA基因非翻译区（Untranslated region,UTR）的分子特征.方法 使用MEGA7.0、DNAStar7.1.0等生物信息学分析软件对全球及深圳H5N6、H7N9流感病毒HA基因的UTR进行核苷酸序列同源性分析及基因多态性分析.结果 3株2014-2015年深圳市H5N6病毒与其他H5NX病毒株比较,HA-3＇UTR核苷酸同源性为77.4％-100％,H5N6-HA-3＇UTR未见明显突变位点;HA-5＇UTR核苷酸同源性为91.7％ - 100％,H5N6-HA-5＇UTR第24、31位发生突变.11株2013-2014年深圳市H7N9病毒与其他H7NX病毒株比较,HA-5＇UTR核苷酸同源性为81.2％ -100％,H7N9-HA-5＇UTR在第2-6、9、10、12及15 - 17位发生多位点突变.结论 深圳市人感染H5N6及H7N9病毒HA的UTR保守区高度同源性及其可变区具有基因多态性.
陈燕慈王昕彭博武伟华刘慧耿艺介郑青房师松
关键词：血凝素非翻译区同源性
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