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嗜热子囊菌原变种Thermoascus aurantiacus var.aurantiacus热稳定几丁质酶的克隆表达及活性研究被引量：5: 2010年; 研究通过RT-PCR和Tail-PCR技术从嗜热子囊菌原变种Thermoascus aurantiacus var.aurantiacus中克隆了一个几丁质酶同源基因。该基因全长1,253bp,包含一个由1,197个碱基构成的开放阅读框,编码398个氨基酸。序列比对分析表明,该基因编码蛋白属于糖苷水解酶18家族的几丁质酶。利用基因重组的方法构建酵母分泌型表达载体,并转化毕赤酵母。在甲醇的诱导下,重组蛋白得到了高效表达,第6天的表达量最高,达到0.433g/L,酶活力为28.96U/mg,同时对表达的几丁质酶进行了纯化,SDS-PAGE检测该蛋白的分子量为43.9kDa。该几丁质酶的最适反应温度为60℃,最适反应pH值为8.0,70℃处理30min仍有45%的相对酶活,具有较好的热稳定性及工业应用价值。; 张婕谢晨郭晓红李多川; 关键词：几丁质嗜热真菌嗜热酶

表达嗜热子囊菌光孢变种lgh基因的毕赤酵母工程菌株: 本发明是一种表达嗜热子囊菌光孢变种(Thermoascus aurantiacus var.levisporus)热稳定脂肪酶基因1gh的毕赤酵母工程菌GS-TA-LGH。通过RT-PCR及RACE等方法从嗜热子囊菌光孢...; 李多川李萌郭晓红黄刚; 文献传递

高活力表达疏绵状嗜热丝胞菌脂肪酶LN的酵母工程菌株: 本研究利用定向进化的方法对疏绵状嗜热丝孢菌（Thermomyces lanuginosus）脂肪酶LN进行分子改造。采用易错PCR方法，建立了含有12357个转化子的突变体库。以高活力为筛选压力，通过三丁酸甘油酯平板透明...; 李萌郭晓红李多川; 文献传递

优化玉米CMS-S双向电泳体系与差异蛋白比较: 2008年; 利用自主创建的Rf3近等基因系不育群体(P)s和可育恢复系群体(Pf)为试材,采用改进的双向(二维)聚丙烯酰胺凝胶电泳(2D-PAGE)技术,对苗期、成株期叶片细胞总蛋白进行分析,分离到在Pf遗传背景下一特异蛋白质RRPⅥ,分子量为30.8kD,等电点为5.0,该特异蛋白质点的出现与消失可能与玉米CMS-S的育性恢复有一定关系,对其纯化分离将为Rf3基因的克隆奠定基础和进一步了解玉米质核互作不育表达模式的分子机制。讨论了采用2D-PAGE技术在玉米分子生物学研究中的优化以及基因组学与蛋白组学研究的衔接。; 孙翠霞扬会李萌祝静静郭晓红李新征王泽立

嗜热毛壳菌热稳定酶的基因克隆、表达及分子改造: 嗜热毛壳菌（Chaetomium thermophilum）是一种生长上限温度较高的嗜热真菌,它能够产生很多具有重要工业价值的热稳定酶。本研究从该嗜热真菌中分别克隆和表达了1种脂肪酶、1种β-葡萄糖苷酶基因和1种β-1,...; 李安娜徐荣艳申晨郭晓红李多川; 关键词：嗜热毛壳菌 Β-葡萄糖苷酶 Β-1,3-葡聚糖酶基因克隆分子改造; 文献传递

表达嗜热子囊菌原变种chit-taa基因的毕赤酵母工程菌株: 本发明是一种表达嗜热子囊菌原变种(Thermoascus aurantiacus var.aurantiacus)热稳定几丁质酶基因chit-taa的毕赤酵母工程菌GS-CHIT-TAA-176。通过RT-PCR及RAC...; 李多川张婕谢晨郭晓红; 文献传递

嗜热毛壳菌热稳定脂肪酶的基因克隆、表达及性质研究: 脂肪酶（EC3.1.1.3），全称三酰甘油酰基水解酶，广泛存在于生物体内。微生物来源的脂肪酶由于种类多、生长周期短、易于培养等特点而被广泛用于工业生产。脂肪酶能够催化油脂中甘油酯键的水解，也可催化酯交换、酯化、醇解和酸解...; 郭晓红; 关键词：嗜热毛壳菌 CDNA克隆

嗜热毛壳菌热稳定脂肪酶基因(lm)的克隆及其在毕赤酵母中的表达(英文)被引量：1: 2015年; 研究从嗜热毛壳菌Chaetomium thermophilum中克隆了一个新的脂肪酶基因(lm)。其中DNA序列包含一个由870个碱基构成的开放阅读框,编码289个氨基酸,含有4个内含子,没有信号肽序列。序列提交Gen Bank,登录号为GU338248。将该基因在毕赤酵母中表达。在甲醇的诱导下,重组蛋白得到了高效表达,第6天的表达量最高,蛋白达到0.428mg/m L,菌物学报酶活力为19.77U/mg。SDS-PAGE检测该蛋白的分子量为35k Da。该脂肪酶的最适反应温度为60℃,具有热稳定性,在40–80℃热稳定,80℃处理60min仍有65%的相对酶活。该酶最适反应p H值为10.0,在p H 9.0–12.0酶活相对稳定。该酶具有较好的热稳定性和耐碱性,具有良好的工业应用价值。; 李萌郭晓红李多川; 关键词：嗜热真菌最适温度最适PH

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郭晓红